Summary

在极少数情况下,表皮转谷氨酰胺酶IgA和组织转谷氨酰胺酶2抗体的识别恒河猴皮炎

Published: December 15, 2011
doi:

Summary

疱疹性皮炎(DH)是一种慢性炎症性IGA和表皮转谷氨酰胺酶(ETG)之间的自身免疫反应的条件。卫生署发展中的麸质敏感和/或腹腔的患者非常小的部分。这项研究的结果表明,卫生署也可以在idiopatic皮炎症状猕猴主机发展。

Abstract

组织转谷氨酰胺酶2(tTG2)是肠道的消化酶deamidates已经部分消化的饮食面筋如醇溶蛋白肽。在遗传倾向的个体,tTG2触发自身免疫反应的特点是由生产tTG2抗体和直接沉积到小肠壁 1,2 。这种抗体的存在,构成腹腔病(CD)的重要标志之一。表皮转谷氨酰胺酶(ETG),也可以作为在少数的CD患者的自身抗原的转谷氨酰胺酶家族的另一成员。在这些比较少见的情况下,ETG触发自身免疫反应(皮疹),临床上称为疱疹性皮炎(DH)。虽然CD和卫生署的发病的确切机制还不是很清楚,它是已知tTG2和血清抗体可以识别CD和卫生署病人 3,4 ETG份额抗原表位。

<p c姑娘="“jove_content”">在这项研究中,共聚焦显微镜检查两个恒河猴( 猕猴 )皮炎(表1,图1和2)皮损活检标本用于研究受影响的组织。在一个动物(EM96)IgA和tTG2抗体(图3)光谱重叠证明。集中在深的表皮,真皮​​乳头周围,存在的双阳性tTG2 + IGA +细胞。这是符合卫生署病人描述的病变 3 。当EM96是一个无麸质饮食,皮炎,以及放置tTG2 + IGA +存款消失,不再检测到(图1-3)皮炎再现然而,基于EM96的饮食面筋(未显示)的重新引入。包括动物无关皮炎的其他猕猴,tTG2 + IGA +存款均未检出。无麸质饮食依赖性皮炎缓解EM96 tTG2存在+ IGA +在它的皮肤细胞表明自身免疫性疾病,卫生署状这种情况的发展机制。这是任何非人类灵长类动物中的DH -样皮炎的第一次报告。

Protocol

1。皮肤活检样品采集之前皮肤活检手术,麻醉动物肌注2.5毫克/公斤盐酸tiletamine zolazepam盐酸telazol的混合物(道奇堡动物健康,道奇堡,IA)。监控管理,直到斜卧麻醉的动物,然后删除其外壳。 取下的头发和皮肤面积大小40刀片(奥斯特的专业产品,麦克明维尔,TN)利用奥斯特金A5单速兽医帆船利益无菌准备与优碘擦洗,酒精交替。一个在选定的活检部位的安全无菌孔的悬垂。 </…

Discussion

最近,我们新成立的非人类灵长类动物模型面筋敏感性是用于研究饮食面筋 5,6引发的肠道通透性变化。等离子体tTG2抗体以及肠道tTG2 + IGA +存款中检测到一些敏感的麸质的猕猴。由于我们最近认同在殖民地特发性皮炎的罕见事件恒河猴猕猴,这里没有通常的传染病/代谢的病因可能是成立,本研究的目的是,以评估如果tTG2 + IGA +抗体的存款可能被检测到的皮肤样本从这些罕见的情况下皮炎?…

Divulgazioni

The authors have nothing to disclose.

Acknowledgements

作者想感谢他们的技术援助阿曼达Tardo,博士穆斯塔法Bouljihad,斯蒂芬妮费力,卡罗尔柯尼博士艾琳Ribka,博士皮特迪迪埃和多萝西Kuebler。这项工作得到了NIH的拨款R01 – DK076653 DK076653 3R01 – 02S1金水TNPRC RR000164基地经营授予。

Materials

Name of the reagent or equipment Company Catalogue Number / Product Code Note
Anti-Human IgA-FITC * Sigma, St. Louis, MO F-5259 1:100 working dilution
Anti-Human tTG2 Thermo Scientific, Kalamazoo, MI MS-300-P1ABX 1:100 working dilution
Anti-Mouse IgG1 ** Invitrogen, Carlsbad, CA A-21124 1:1,000 working dilution
ToPro-3 DNA probe *** Invitrogen, Carlsbad, CA T-3605 1:1,000 working dilution
Zinc Formalin
(Z-fix)
Anatech Ltd., Battle Creek, MI 171  
OCT Freezing
Medium
Sakura Finetek, Torrence, CA 4583  
Cytoseal Mounting
Medium
Richard-Allan Scientific, Kalamazoo, MI 8312-4  
Anti-Quenching
Solution
Sigma, St. Louis, MO P 3130  
Ethilon
(Nylon Suture)
Ethicon, Johnson & Johnson, Berkshire, UK 663G  
Miltex Punch Dermal Biopsy Instrument Miltex, York, PA NA  
Oster Golden A5 Single Speed Vet Clipper with a size 40 blade Oster Products, McMinnville, TN 78005-050  
Leica Tissue Processor Leica Microsystems Inc., Buffalo Grove, KS ASP300  
Rotary Microtome Microm International,
Waldorf, Germany
HM325  
Cryostat Thermo Scientific,
Kalamazoo, MI
HM560  
Confocal Microscope Leica, Wetzlar,
Germany
TCS SP2  

* Fluorescein isothiocyanate
** Secondary (Alexa Fluor 568-conjugated) antibody used after tTG2 primary antibody
** Dye

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Citazione di questo articolo
Sestak, K., Mazumdar, K., Midkiff, C. C., Dufour, J., Borda, J. T., Alvarez, X. Recognition of Epidermal Transglutaminase by IgA and Tissue Transglutaminase 2 Antibodies in a Rare Case of Rhesus Dermatitis. J. Vis. Exp. (58), e3154, doi:10.3791/3154 (2011).

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