Summary

Безлинзовой флуоресцентной микроскопии на чип

Published: August 17, 2011
doi:

Summary

Безлинзовой на-чипе флуоресцентные платформы микроскопия показала, что может флуоресцентные изображения объектов на ультра-широкое поле сектор обзора, например,> 0.6-8 см2 с <4μm разрешение использования сжатие выборки на основе алгоритма декодирования. Такой компактный и широким полем флуоресцентные на-чипе изображения модальности может быть полезен для высокой пропускной цитометрии, редко-клеточной исследований и микрочипов-анализа.

Abstract

Встроенный в чип безлинзовой изображения в целом направлен на замену громоздкой линзы основе оптических микроскопов с более простой и компактный дизайн, особенно для высокой пропускной способности приложений скрининга. Это новая технология платформы есть потенциал, чтобы исключить необходимость в громоздких и / или дорогостоящих оптических компонентов, благодаря помощи новых теорий и алгоритмов цифровой реконструкции. В том же ключе, то здесь мы демонстрируем на-чипе флуоресцентного метода микроскопии, что можно добиться, например, <4μm пространственным разрешением на ультра-широкое поле сектор обзора (FOV) в> 0.6-8 см 2 без использования каких-либо линзы , механического сканирования или тонкопленочные фильтры на основе интерференции. В этой технике, флуоресцентного возбуждения достигается через призму или полусферической-стекло освещенного некогерентного источника. После взаимодействия со всем объемом объекта, это возбуждение света отклоняется полного внутреннего отражения (ПВО) процесс, который происходит в нижней части образца микро-жидкостный чип. Флуоресцентного излучения из возбужденного объекты Затем собранные волоконно-оптической панелью или конические и поставляется на массив оптико-электронных датчиков, таких как зарядовой связью (ПЗС). Используя сжатие выборки основан алгоритм декодирования, приобретенные lensfree сырья флуоресцентные изображения образца может быть быстро обработаны для получения, например, <4μm разрешение в поле зрения> 0.6-8 см 2. Более того, вертикально друг над другом микро-каналов, которые отделены друг от друга, например, 50-100 мкм, также могут быть успешно отображаемого с использованием тех же lensfree на-чипе микроскопии платформе, что еще больше увеличивает общую пропускную способность этого механизма. Этот компактный встроенный флуоресцентный платформы визуализации, с быстрым сжатие декодер за ней, может быть весьма ценной для высокой пропускной цитометрии, редко-клеточной исследований и микрочипов-анализа.

Protocol

В этом разделе мы рассмотрим экспериментальные методы нашей безлинзовой на-чипе флуоресцентного микроскопа платформы 1-4. Чтобы продемонстрировать возможности этого метода, мы покажем на-чипе результатов визуализации для флуоресцентной микро-частиц и помечены белой клетки кро?…

Discussion

Мы показали на-чипе флуоресцентного микроскопа платформу, которая может достигать, например, <4μm пространственным разрешением более например,> 0.6-8 см 2 поля-обзора, без использования каких-либо линзами, механическим сканированием или тонкопленочных помех фильтров. В этой техн?…

Divulgazioni

The authors have nothing to disclose.

Acknowledgements

А. Озджан выражает благодарность поддержке NSF КАРЬЕРА Award, следователь ОНР Молодые Award 2009 и Нью-премии Новатор NIH директора DP2OD006427 из канцелярии директора, NIH. Авторы также отметить поддержку Билла и Мелинды Гейтс, Фонд Vodafone Америки, и NSF Биш программы (под наград # 0754880 и 0930501).

Materials

Material Name Company Catalogue number
Charge-coupled device(CCD) KODAK KAF-8300
Charge-coupled device(CCD) KODAK KAF-11002
Charge-coupled device(CCD) KODAK KAF-39000
Complementary Metal-Oxide-Semiconductor (CMOS) Micron MT9T031C12STCD
High power LED light source Thorlabs M455L2-C2
High power LED driver Thorlabs LEDD1B
Fiber coupled LED light source Mightex FCS-0625-000
Vacuum Pen Edmund Optics NT57-636
2, 4, 10 μm Fluospheres Invitrogen F-8826, F-8859, F-8836
RBS lysis buffer 1X eBioscience 00-4333
SYTO 16 labeling reagent Invitrogen S7578
Fiber-optic faceplate Edmund Optics NT55-142
Fiber-optic taper Edmund Optics NT55-134
Prisms Edmund Optics NT47-626, NT45-403
Filters Edmund Optics NT39-417
PDMS Elastomers Dow Corning Slygard 184

Riferimenti

  1. Coskun, A. F., Su, T., Ozcan, A. Wide field-of-view lens-free fluorescent imaging on a chip. Lab Chip. 10, 824-824 (2010).
  2. Coskun, A. F., Sencan, I., Su, T., Ozcan, A. Lensless wide-field fluorescent imaging on a chip using compressive decoding of sparse objects. Opt. Express. 18, 10510-10523 (2010).
  3. Coskun, A. F., Sencan, I., Su, T., Ozcan, A. Lensfree Fluorescent On-Chip Imaging of Transgenic Caenorhabditis elegans Over an Ultra-Wide Field-of-View. PLoS ONE. 6, e15955-e15955 (2011).
  4. Coskun, A. F., Sencan, I., Su, T., Ozcan, A. Wide-field lensless fluorescent microscopy using a tapered fiber-optic faceplate on a chip. Analyst. , (2011).
  5. Seo, S. High-Throughput Lens-Free Blood Analysis on a Chip. Analytical Chemistry. 82, 4621-4627 (2010).
  6. Mudanyali, O. Compact, light-weight and cost-effective microscope based on lensless incoherent holography for telemedicine applications. Lab Chip. 10, 1417-1417 (2010).
  7. Tseng, D. Lensfree microscopy on a cellphone. Lab Chip. 10, 1787-1787 (2010).
  8. Lucy, L. B. An iterative technique for the rectification of observed distributions. The Astronomical Journal. 79, 745-745 (1974).
  9. Richardson, W. H. Bayesian-Based Iterative Method of Image Restoration. J. Opt. Soc. Am. 62, 55-59 (1972).
  10. Biggs, D. S. C., Andrews, M. Acceleration of iterative image restoration algorithms. Appl. Opt. 36, 1766-1775 (1997).
  11. Candes, E., Wakin, M. An Introduction To Compressive Sampling. Signal Processing Magazine, IEEE. 25, 21-30 (2008).
  12. Kim, S., Koh, K., Lustig, M., Boyd, S., Gorinevsky, D. An Interior-Point Method for Large-Scale L1-Regularized Least Squares. Selected Topics in Signal Processing, IEEE. 1, 606-617 (2007).
  13. Candes, E. The restricted isometry property and its implications for compressed sensing. Comptes Rendus Mathematique. 346, 589-592 (2008).
  14. Baraniuk, R. Compressive Sensing [Lecture Notes]. Signal Processing Magazine, IEEE. 24, 118-121 (2007).
  15. Romberg, J. Imaging via Compressive Sampling. Signal Processing Magazine, IEEE. 25, 14-20 (2008).
check_url/it/3181?article_type=t

Play Video

Citazione di questo articolo
Coskun, A. F., Su, T., Sencan, I., Ozcan, A. Lensless Fluorescent Microscopy on a Chip. J. Vis. Exp. (54), e3181, doi:10.3791/3181 (2011).

View Video