Summary

Bir Chip Lensless Floresan Mikroskopi

Published: August 17, 2011
doi:

Summary

Lensless bir çip üzerinde floresan mikroskobu platformu göstermiştir floresan nesneler, örneğin bir ultra-geniş alanda-görünüm görüntü> <4μm çözünürlük çözme algoritması tabanlı bir basınç örnekleme yöntemiyle 0,6-8 cm2. Böyle bir kompakt ve geniş alan floresan çip üzerinde görüntüleme yöntemidir yüksek verimli sitometri, nadir hücre araştırmaları ve mikroarray-analiz için değerli olabilir.

Abstract

Genel olarak on-chip lensless görüntüleme, özellikle yüksek verimli tarama uygulamaları için, daha basit ve daha kompakt tasarımları ile hantal lense bağlı optik mikroskoplar değiştirmeyi hedefliyor. Bu gelişmekte olan teknoloji platformu, yeni teoriler ve dijital rekonstrüksiyon algoritmalar yardımı ile, hantal ve / veya pahalı optik bileşenleri için gereksinimini ortadan kaldırmak için bir potansiyele sahiptir. Aynı doğrultuda, burada, herhangi bir lenslerin kullanımı olmadan 0,6-8 cm 2 <4μm mekansal çözünürlükte ultra geniş bir alan-view (FOV) üzerinden>, örneğin elde edebilirsiniz çip üzerinde floresan mikroskopi yöntemi göstermektedir mekanik tarama veya ince film tabanlı girişim filtreleri. Bu teknikte, floresan uyarılma, tutarsız bir kaynağı tarafından aydınlatılmış bir prizma veya hemisferik cam arayüz üzerinden elde edilir. Tüm nesne hacmi ile etkileşim sonra, bu uyarma ışık toplam iç yansıma (TIR) ​​örnek akışkan mikro-çip alt kısmında meydana gelen işlem reddedilir. Heyecanlı nesnelerden floresan emisyon sonra bir fiber-optik kaplamasını veya konik tarafından toplanan ve şarj-çiftli-device (CCD) gibi bir optoelektronik sensör dizisi teslim edilir. Bir basınç örnekleme dayalı çözme algoritması kullanarak, örnek edinilen lensfree çiğ floresan görüntüler hızla örneğin verim işlenmiş bir FOV üzerinde 0,6-8 cm 2 <4μm çözünürlük>. Ayrıca, örneğin ayrılır mikro-kanal dikey yığılmış, 50-100 mikron de başarılı bir şekilde bu yöntemin, toplam işlem hacmini daha da artırır aynı lensfree on-chip mikroskobu platformu kullanarak görüntülü olabilir. Bu çip üzerinde kompakt floresan görüntüleme platformu, arkasında hızlı bir basınç dekoder, yüksek verimli sitometri, nadir hücre araştırmaları ve mikroarray-analiz için oldukça değerli olabilir.

Protocol

Bu bölümde, biz, bizim lensless çip üzerinde floresan mikroskobu platformu 1-4 deneysel yöntemler gözden geçirecektir . Bu tekniğin yeteneklerini göstermek için, floresan mikro parçacıklar ve etiketli beyaz kan hücreleri için yonga üzerinde görüntüleme sonuçları gösterecektir. Burada tartışılan olmasa da, aynı lensfree floresan mikroskobu platformu transgenik C gibi görüntü küçük modeli hayvanlar için kullanılır. elegans örnekleri 3. <p class…

Discussion

Biz, örneğin elde edebilirsiniz çip üzerinde floresan mikroskobu platformu gösterdi <örneğin üzerinde 4μm mekansal çözünürlükte,> 0,6-8 cm 2 lensler, mekanik tarama veya ince film parazit filtreleri kullanmadan alan görüş. Bu teknikte, bir fiber-optik kaplamasını veya konik kullanımı ile, floresan emisyon nesnelerden bir CCD gibi bir opto-elektronik sensör dizisi teslim edilmeden önce, fiber-optik kablolar bir 2D-dizisi ile toplanır / CMOS çipi. Bu kazanılmış lensfree görün…

Divulgazioni

The authors have nothing to disclose.

Acknowledgements

A. Özcan NSF KARİYER Ödülü, ONR Genç Araştırmacı Ödülü Direktörü, NIH Office 2009 ve NIH Müdürü Yenilikçisi Ödülü DP2OD006427 destek minnetle kabul eder. Yazarlar ayrıca, Bill & Melinda Gates Vakfı, Vodafone Amerika Vakfı, ve NSF bish programı (# 0.754.880 ve 0.930.501 Ödülleri altında) desteğiyle kabul etmiş sayılırsınız.

Materials

Material Name Company Catalogue number
Charge-coupled device(CCD) KODAK KAF-8300
Charge-coupled device(CCD) KODAK KAF-11002
Charge-coupled device(CCD) KODAK KAF-39000
Complementary Metal-Oxide-Semiconductor (CMOS) Micron MT9T031C12STCD
High power LED light source Thorlabs M455L2-C2
High power LED driver Thorlabs LEDD1B
Fiber coupled LED light source Mightex FCS-0625-000
Vacuum Pen Edmund Optics NT57-636
2, 4, 10 μm Fluospheres Invitrogen F-8826, F-8859, F-8836
RBS lysis buffer 1X eBioscience 00-4333
SYTO 16 labeling reagent Invitrogen S7578
Fiber-optic faceplate Edmund Optics NT55-142
Fiber-optic taper Edmund Optics NT55-134
Prisms Edmund Optics NT47-626, NT45-403
Filters Edmund Optics NT39-417
PDMS Elastomers Dow Corning Slygard 184

Riferimenti

  1. Coskun, A. F., Su, T., Ozcan, A. Wide field-of-view lens-free fluorescent imaging on a chip. Lab Chip. 10, 824-824 (2010).
  2. Coskun, A. F., Sencan, I., Su, T., Ozcan, A. Lensless wide-field fluorescent imaging on a chip using compressive decoding of sparse objects. Opt. Express. 18, 10510-10523 (2010).
  3. Coskun, A. F., Sencan, I., Su, T., Ozcan, A. Lensfree Fluorescent On-Chip Imaging of Transgenic Caenorhabditis elegans Over an Ultra-Wide Field-of-View. PLoS ONE. 6, e15955-e15955 (2011).
  4. Coskun, A. F., Sencan, I., Su, T., Ozcan, A. Wide-field lensless fluorescent microscopy using a tapered fiber-optic faceplate on a chip. Analyst. , (2011).
  5. Seo, S. High-Throughput Lens-Free Blood Analysis on a Chip. Analytical Chemistry. 82, 4621-4627 (2010).
  6. Mudanyali, O. Compact, light-weight and cost-effective microscope based on lensless incoherent holography for telemedicine applications. Lab Chip. 10, 1417-1417 (2010).
  7. Tseng, D. Lensfree microscopy on a cellphone. Lab Chip. 10, 1787-1787 (2010).
  8. Lucy, L. B. An iterative technique for the rectification of observed distributions. The Astronomical Journal. 79, 745-745 (1974).
  9. Richardson, W. H. Bayesian-Based Iterative Method of Image Restoration. J. Opt. Soc. Am. 62, 55-59 (1972).
  10. Biggs, D. S. C., Andrews, M. Acceleration of iterative image restoration algorithms. Appl. Opt. 36, 1766-1775 (1997).
  11. Candes, E., Wakin, M. An Introduction To Compressive Sampling. Signal Processing Magazine, IEEE. 25, 21-30 (2008).
  12. Kim, S., Koh, K., Lustig, M., Boyd, S., Gorinevsky, D. An Interior-Point Method for Large-Scale L1-Regularized Least Squares. Selected Topics in Signal Processing, IEEE. 1, 606-617 (2007).
  13. Candes, E. The restricted isometry property and its implications for compressed sensing. Comptes Rendus Mathematique. 346, 589-592 (2008).
  14. Baraniuk, R. Compressive Sensing [Lecture Notes]. Signal Processing Magazine, IEEE. 24, 118-121 (2007).
  15. Romberg, J. Imaging via Compressive Sampling. Signal Processing Magazine, IEEE. 25, 14-20 (2008).
check_url/it/3181?article_type=t

Play Video

Citazione di questo articolo
Coskun, A. F., Su, T., Sencan, I., Ozcan, A. Lensless Fluorescent Microscopy on a Chip. J. Vis. Exp. (54), e3181, doi:10.3791/3181 (2011).

View Video