Summary

Erwachsene Maus venöse Bluthochdruckmodell: A. carotis communis, um äußere Jugularvene Anastomose.

Published: January 27, 2015
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Summary

Wir beschreiben ein Verfahren zum Erzeugen einer zuverlässigen Modell der zerebralen venöse Hypertonie in der adulten Maus. Dieses Modell ist vielfältig beschrieben und geprüft bei der Ratte ist. Diese neue Gegenstück in den Mäusen eröffnet die Möglichkeit der Verwendung von gentechnisch veränderten Tieren und verbreitert, wodurch die Anwendungen des Modells.

Abstract

Das Verständnis der Pathophysiologie von Gehirn arteriovenösen Fehlbildungen und arteriovenösen Fisteln hat dank Tiermodellen verbessert. Ein Rattenmodell die Schaffung eines künstlichen Fistel zwischen der A. carotis communis (CCA) und der externen Halsschlagader (EJV) ist vielfältig beschrieben und bewiesen technisch möglich ist. Dieses Konstrukt provoziert eine konsistente cerebralvenösen Hypertonie (CVH), und damit dazu beigetragen hat die Untersuchung der Beteiligung von venöser Hypertonie, um die Bildung, die klinischen Symptome und der Prognose von Gehirn AVMs und Dura AVFs. Entspricht Mäusen Modelle wurden nur knapp beschrieben und haben Probleme mit Stenose der Fistel gezeigt. Ein etabliertes Mausmodell würde das Studium nicht nur Pathophysiologie, sondern auch potenzielle genetische Therapien für diese zerebrovaskuläre Erkrankungen ermöglichen.

Wir präsentieren ein Modell der arteriovenöse Fistel, die eine dauerhafte Hirnvenenbluthochdruck in der Maus erzeugt. Mikrochirurgische Anastomose of murinen CCA und EJV kann schwierig sein, aufgrund von winzigen Anatomie und in einem nicht-Patent Fistel häufig führen. In diesem Schritt-für-Schritt-Protokoll sprechen wir alle wichtigen Herausforderungen bei diesem Vorgang auftreten. Vermeidung übermäßiger Zurückziehen der Vene während der Belichtung mit 11-0 Nähte statt 10-0, und machen eine sorgfältig geplante End-zu-Seit-Anastomose sind einige der wichtigsten Schritte. Obwohl diese Methode erfordert erweiterte mikro Fähigkeiten und eine längere Lernkurve, die den Gegenwert in der Ratte, es konsequent weiterentwickelt werden kann.

Dieses neuartige Modell wurde entworfen, um Transgene Maus Techniken mit einer zuvor etablierten experimentellen Systems, das auf die Gehirn AVMs und Dura AVFs untersuchen erwiesen integrieren. Durch Öffnen der Möglichkeit der Verwendung von transgenen Mäusen kann ein breiteres Spektrum von gültigen Modellen erzielt werden und genetische Anwendungen können ebenfalls getestet werden. Die experimentelle Konstrukt könnte auch auf die Untersuchung von ot angepasst werdenihr zerebrovaskuläre Erkrankungen mit venösen Bluthochdruck wie Migräne, transiente globale Amnesie, transiente monokulare Blindheit usw. verwandt

Introduction

Tiermodelle der Hirnvenenbluthochdruck haben sich als ein wichtiges Instrument für das Verständnis der Pathophysiologie des Gehirns arteriovenöse Malformationen und arteriovenöse Fisteln 1-7 sein. Das am häufigsten verwendete ist die Ratten-Modell durch eine künstliche Fistel zwischen der Arteria carotis communis (CCA) und die äußere Jugularvene (EJVs), die eine konsistente cerebralvenösen Hypertonie (CVH) bei der Ratte 1,8-10 provoziert erstellt. Äquivalent Mäusemodellen, indem die Möglichkeit der Verwendung verschiedener transgener Mäuse Stämme wären weitere Studie über nicht nur Pathophysiologie sondern auch möglichen genetischen Therapien für diese zerebrovaskuläre Erkrankungen ermöglichen. Ferner sind die Versuchs Konstrukt könnte auch auf die Untersuchung von anderen zerebrovaskulären Krankheiten mit venöser Hypertonie, wie Migräne, transienten globalen Amnesie, transiente monokulare Blindheit usw. 11 Frühere Versuche im Zusammenhang geeignet ist, diese Mäusemodellen h konstruierenave demonstriert die Schwierigkeiten mit der Durchgängigkeit der Fistel aufgrund der winzigen anatomischen 5,12. Hier beschreiben wir die Schritt-für-Schritt-Protokoll für eine erfolgreiche Anastomose des murinen CCA und EJVs die in einen langfristigen Patent Fistel und einem haltbaren venöse Hypertonie in der Maus übersetzt.

Protocol

1. Vorbereitung der Maus Induzieren Vollnarkose in der Maus mit Isofluran Gas. Injizieren 0,15 ml intraperitoneale brupenorphine für die Schmerztherapie. Überprüfen Sie zunächst, ob die Narkoseniveau ist durch Einstechen Pfoten die Maus zufriedenstellend. Sie mit der Maus in Rückenlage mit den vier von Klebeband fixiert Gliedmaßen. Entfernen Sie die Haare des Halses und der oberen Brustbereich mit einer Schere. Subkutane Injektion verabreichen 0,2-0,4 ml 0,9% Kochsalzlösung, um die Maus währ…

Representative Results

Ein erfolgreiches Ergebnis des Modells ist ein Patent arteriovenöse Fistel, die venöse Hypertonie im murinen Gehirn induziert. Um das Modell zu validieren wir zunächst den intrakraniellen Venendruck in der sagittalen Sinus der Mäuse gemessen bei 2, 3 und 4 Wochen nach der Operation. 6 verschiedene Mäuse wurden für jede Zeitgruppe zugewiesen. Der Sinus Druck betrug 8,8 ± 1,2 mmHg in der Gruppe, gemessen zwei Wochen nach der Operation. In den 6-Mäusen gemessen 3 Wochen nach der Operation, die Sinus Druck betrug 4,…

Discussion

Anhaltende Hirnvenenbluthochdruck hat eng mit schweren klinischen Manifestationen und schlechter Prognose bei Patienten mit Dura AVFs und Gehirn AVMs 3 zusammen. Diese Wirkungen von CVH wurden weitgehend in Rattenmodellen 1,2,8 sucht. Eine entsprechende Modell in der Maus würde die Verwendung von gentechnisch veränderten Tieren, die letztlich erlauben würde die Analyse der molekularen Signalwege auf die Pathogenese der venösen Bluthochdruck und seine Beziehung mit der Dura AVF und Gehirn AVM be…

Divulgazioni

The authors have nothing to disclose.

Acknowledgements

Das Projekt wird teilweise durch die NIH T32 GM008440 zu Espen Walker, R01 NS27713 William L.Young, P01 NS44155 William L.Young und Hua Su, R21 NS070153 Hua SU und von der American Heart Association AHA 10GRNT3130004 Hua Su unterstützt. Dr. Ana Rodríguez-Hernández wird durch einen Zuschuss von "Obra Social La Caixa" unterstützt

Materials

10-0 Sterile Microsuture Arosurgical Ic. VT5A010Q10
11-0 Sterile Microsuture Arosurgical Ic VT4A00N07
DUROTIP Scissors Aesculap BC210R
Micro-Adson Tissue Forceps Aesculap BD510R
Microscissors Aesculap OC496R
Micro Forceps #5 Jewelers Aesculap BD331R
Angled Jewelers Forceps Aesculap BD329R
Micro Suture Forceps Aesculap BD338R
DUROGRIP Needle Holder Aesculap BM009R

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Citazione di questo articolo
Yang, S., Rodriguez-Hernandez, A., Walker, E. J., Young, W. L., Su, H., Lawton, M. T. Adult Mouse Venous Hypertension Model: Common Carotid Artery to External Jugular Vein Anastomosis.. J. Vis. Exp. (95), e50472, doi:10.3791/50472 (2015).

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