Summary

Topo adulto venosa Ipertensione Modello: carotide comune di External Vena giugulare anastomosi.

Published: January 27, 2015
doi:

Summary

Noi descriviamo un metodo per creare un modello affidabile di ipertensione venosa cerebrale nel topo adulto. Questo modello è stato ampiamente descritto ed testati nel ratto. Questo nuovo omologo nei topi apre la possibilità di utilizzare animali geneticamente modificate e amplia così le applicazioni del modello.

Abstract

La comprensione della fisiopatologia del cervello malformazioni artero-venose e fistole arterovenose è migliorata grazie a modelli animali. Un modello di ratto creare una fistola artificiale tra l'arteria carotide comune (CCA) e la vena giugulare esterna (EJV) è stato ampiamente descritto ed dimostrato tecnicamente fattibile. Questo costrutto provoca una consistente ipertensione venosa cerebrale (CVH), e quindi ha contribuito a studiare il contributo di ipertensione venosa alla formazione, i sintomi clinici, e la prognosi di MAV cerebrali e FAV durale. Modelli di topi equivalenti sono stati solo poco descritti e hanno mostrato problemi con stenosi della fistola. Un modello murino stabilito permetterebbe lo studio non solo fisiopatologia, ma anche potenziali terapie genetiche per queste malattie cerebrovascolari.

Presentiamo un modello di fistola artero che produce una ipertensione venosa intracranica durevole nel topo. Microsurgical anastomosi of murino CCA e EJV possono essere difficili a causa di anatomia diminutivo e spesso provocare una fistola non-brevetto. In questo protocollo step-by-step affrontiamo tutte le importanti sfide incontrate durante questa procedura. Evitare eccessiva retrazione della vena durante l'esposizione, utilizzando 11-0 suture invece di 10-0, e facendo un attentamente pianificato anastomosi end-to-side sono alcuni dei passaggi critici. Anche se questo metodo richiede abilità microchirurgia avanzata ed una curva di apprendimento più che l'equivalente nel ratto, può essere sviluppato in modo coerente.

Questo modello romanzo è stato progettato per integrare le tecniche di topi transgenici con un sistema sperimentale già ben consolidata che si è dimostrato utile per studiare MAV cerebrali e FAV durale. Aprendo la possibilità di utilizzare topi transgenici, un più ampio spettro di modelli validi può essere raggiunta e trattamenti genetici può essere testato. Il costrutto sperimentale potrebbe anche essere ulteriormente adattata allo studio di otle sue malattie cerebrovascolari legati con ipertensione venosa, come l'emicrania, amnesia globale transitoria, transitoria cecità monoculare, etc.

Introduction

I modelli animali di ipertensione venosa cerebrale hanno dimostrato di essere uno strumento fondamentale per la comprensione della fisiopatologia del cervello malformazioni artero-venose e fistole arterovenose 1-7. Il più diffuso è il modello di ratto creata attraverso una fistola artificiale tra l'arteria carotide comune (CCA) e la vena giugulare esterna (EJV), che provoca una ipertensione venosa cerebrale coerente (CVH) nel ratto 1,8-10. Modelli di topi equivalenti, aprendo la possibilità di utilizzare diversi ceppi di topi transgenici, consentirebbe ulteriori studi sulla fisiopatologia non solo, ma anche potenziali terapie genetiche per queste malattie cerebrovascolari. Inoltre, il costrutto sperimentale potrebbe anche essere ulteriormente adattata allo studio di altre malattie cerebrovascolari sono collegati con ipertensione venosa come emicrania, amnesia globale transitoria, cecità monoculare transitoria, ecc 11 Tuttavia, i tentativi precedenti per costruire tali modelli topi have dimostrato le difficoltà con pervietà della fistola grazie all'anatomia diminutivo 5,12. Qui, descriviamo nostro protocollo passo-passo per una anastomosi successo della murino CCA e EJV che si traduce in una fistola brevetto a lungo termine e una ipertensione venosa durevole nel topo.

Protocol

1. Preparare il mouse Indurre l'anestesia generale nel topo con gas isoflurano. Iniettare 0,15 ml di brupenorphine intraperitoneale per la gestione del dolore. Prima di procedere, verificare che il livello di anestesia è soddisfacente pungendo zampe del topo. Ponga il mouse in decubito dorsale con i quattro arti fissati dal nastro adesivo. Rimuovere il pelo del collo e la parte superiore del torace con le forbici. Via iniezione sottocutanea, somministrare 0,2-0,4 ml di soluzione salina allo 0,9…

Representative Results

Un esito positivo del modello è una fistola artero-venosa brevetto che induce l'ipertensione venosa nel cervello murino. Per convalidare il modello che abbiamo inizialmente misurato la pressione venosa intracranica nel seno sagittale dei topi a 2, 3 e 4 settimane dopo l'intervento chirurgico. 6 diversi topi sono stati assegnati a ogni gruppo il tempo. La pressione del seno era 8.8 ± 1.2 mmHg nel gruppo misurate due settimane dopo l'intervento chirurgico. Nei 6 topi misurati 3 settimane dopo l'intervent…

Discussion

Ipertensione venosa cerebrale prolungata è stata strettamente correlata con più gravi manifestazioni cliniche e prognosi sfavorevole nei pazienti con FAV durale e MAV cerebrali 3. Questi effetti di CVH sono stati ampiamente studiati in modelli di ratto 1,2,8. Un modello equivalente nel topo dovrebbe consentire l'uso di animali geneticamente modificati, che finirebbe per consentire l'analisi dei meccanismi molecolari coinvolti nella patogenesi di ipertensione venosa e la sua relazione con …

Divulgazioni

The authors have nothing to disclose.

Acknowledgements

Questo progetto è in parte sostenuto da NIH T32 GM008440 a Espen Walker, R01 NS27713 a William L.Young, P01 NS44155 a William L.Young e Hua Su, R21 NS070153 a Hua SU e dalla American Heart Association AHA 10GRNT3130004 a Hua Su. Dr Ana Rodríguez-Hernández è sostenuta da una sovvenzione "Obra Social La Caixa"

Materials

10-0 Sterile Microsuture Arosurgical Ic. VT5A010Q10
11-0 Sterile Microsuture Arosurgical Ic VT4A00N07
DUROTIP Scissors Aesculap BC210R
Micro-Adson Tissue Forceps Aesculap BD510R
Microscissors Aesculap OC496R
Micro Forceps #5 Jewelers Aesculap BD331R
Angled Jewelers Forceps Aesculap BD329R
Micro Suture Forceps Aesculap BD338R
DUROGRIP Needle Holder Aesculap BM009R

Riferimenti

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Citazione di questo articolo
Yang, S., Rodriguez-Hernandez, A., Walker, E. J., Young, W. L., Su, H., Lawton, M. T. Adult Mouse Venous Hypertension Model: Common Carotid Artery to External Jugular Vein Anastomosis.. J. Vis. Exp. (95), e50472, doi:10.3791/50472 (2015).

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