マウスのリンパ管内免疫療法やワクチン
Summary
予防的および治療的ワクチン接種は、多くの場合、週のリンパ節へのワクチンの排水および免疫細胞の関与の結果として、乏しいによる強力な免疫応答を刺激することができない。リンパ節へのワクチンの直接注射することによって、いわゆるリンパ内注射は、ワクチンの有効性を強く改善することができ、ワクチン用量を低減することができる。
Abstract
ワクチンは、典型的には、免疫応答の刺激のために、皮下または筋肉内に注射する。これが成功するかどうかは、抗原提示細胞が欲しかった免疫応答を生成するためのリンパ球と対話することができ、リンパ節へのワクチンの効率的な排液を必要とします。強さと誘導される免疫応答のタイプは、密度や周波数の相互作用ならびに微小環境、サイトカインの、特に内容によって異なります。末梢注入されたワクチンの分画のみがリンパ節に到達すると、マウスおよびヒトのワクチン接種、 すなわちリンパ内注射、鼠径リンパ節へのワクチンの直接注射により実施した。男性では、手順は、超音波によって導かれる。マウスでは、小さな（5〜10 mm）の切開が、リンパ節の局在化及び鉗子で固定化されているが、麻酔した動物の鼠径部に形成されており、ワクチンの10〜50μlの容量を視覚的制御下に注入される。切開部を外科用縫合糸を使用して、シングルステッチで閉じられる。マウスを、プラスミドDNA、RNA、ペプチド、タンパク質、粒子、および細菌ならびにアジュバントでワクチン接種し、ワクチンのすべてのタイプに対する免疫応答の強力な改善が観察された。ワクチン接種のリンパ管内方法は、従来のワクチン接種が不十分な免疫または利用可能な場合、ワクチンの量が限られているが生成状況では特に適しています。
Introduction
ワクチンは、典型的には、免疫応答の刺激のために、皮下または筋肉内に注射する。この方法の成功は、抗原提示細胞は、T-およびB細胞応答の生成のためにリンパ球と相互作用することができるリンパ節へのワクチンの効率的な排水を必要とする。また、強度と誘導される免疫応答のタイプも密度や周波数などの相互作用ならびに微小環境自体、サイトカイン、特に内容によって異なります。末梢組織に注入されたワクチンのごく一部は、リンパ節に到達すると、リンパ節へのワクチンの直接注射によりマウスおよびヒトのワクチン接種は、免疫応答部位が生成された、行われている。ヒトにおいて、手順は、超音波、また、リンパ系における可視化および診断のための造影剤の投与のために使用した手順によって案内される。マウスでは、手順が侵襲的である。ここでは、小さな（5〜10 mm）のincisioN麻酔した動物1の鼠径部で行われ、リンパ節はローカライズやピンセットで固定化して、ワクチンの10〜20μLの容量は、視覚的な制御の下で注入されて、10μlを最初の注射のために使用され、若いマウスでは小リンパ節、20μlの大きなリンパ節を有するより古いか、すでにプライミングしたマウスのリンパ節に注入することができる一方。切開は、外科用縫合糸を使用して、シングルステッチで閉鎖することができる。この方法によって、マウスをプラスミドDNA 2,3、メッセンジャーRNA 4、1,3,5,6ペプチド、タンパク質7-10、11粒子 、細菌12ならびにアジュバント7,13、および免疫の強力な改善でワクチン接種されているワクチンは、すべての種類に対する応答が観察されている。ワクチン接種のリンパ管内方法は、従来のワクチン接種が不十分な免疫を生産するか、利用可能なワクチンの量が限られていたり、バージョンである状況では特に適しています高価なY。人間では、予防接種のリンパ管内の方法は、アレルギー患者14,15にまたは癌16〜21の患者に適用されている。現在の概念はリンパ管内の方法は、筋肉内および皮下注射などの他の注射方法より侵襲的であるということですが、痛みの知覚は、静脈穿刺15後よりも高いではありません。これは、リンパ内ワクチン接種は、予防および特に治療予防接種の他の方法に代わる、または補完になることが期待されている。この記事では、リンパ管内ワクチン接種の手順は、マウスで実行する方法を詳細に説明します。記載されているすべての手順は、チューリッヒ州立獣医庁によって承認され、スイス連邦のガイドラインおよび科学的目的のために使用される動物の保護に関する指令を実施した。
Protocol
Representative Results
Discussion
リンパ管内免疫化および免疫療法は、抗体応答およびT細胞応答の両方を刺激するため適切であることが示されている。このビデオの記事で示されているように、ワクチン接種のリンパ管内の手順は、マウスにおいて強力な免疫応答を刺激するための迅速かつ簡単な方法です。訓練された外科医は、3〜4分の間に手続きを行うことができます。セッションも1は、一般的に麻酔や縫合をしている…
Divulgazioni
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
著者は、アイリスエルトマン、バーバラ·フォン·ボイスト、ジュリア·マリア·マルティネス·ゴメスからマウスではリンパ管内免疫化の方法を開発する上での実験の助けに感謝しています。私たちは、このビデオ制作のために彼らの手術室を使用させるためにもマギーアラスとニコラCesarovicに感謝します。
Materials
| Ketamine (Ketasol-100) | Graeub AG, Switzerland | Anesthetics | |
| Xylazine (Rompun) | Bayer, Germany | Anesthetics | |
| Viscotears Eye-Gel | Novartis, Switzerland | To keep eyes from drying out during anesthesia. | |
| BD Micro-Fine 0.5 ml | BD Medical, France | 29 G Insulin syringes with permanently attached needles | |
| 6-0 Dermalon Monofilament nylon | Covidien, MA, USA | For sutures (0.7 metric, 18G, 45 cm, Blue) | |
| Curved forceps, 4.5 inch | Polymed, Switzerland | For incision and holding of lymph node | |
| Straight surgical scissors, 4.5 inch | Polymed, Switzerland | For incision | |
| Needle holder, 5.5 inch | Polymed, Switzerland | To close incision with suture | |
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