Un préclinique modèle murin de métastases hépatiques
Summary
Un modèle murin de métastases hépatiques préclinique réalisée par une technique d'injection de hemispleen.
Abstract
De nombreux modèles murins ont été développées pour étudier les cancers humains et de faire progresser la compréhension du traitement du cancer et le développement. Ici, un modèle préclinique murin pancréas tumeur des métastases hépatiques par une injection de cellules syngéniques de hemispleen tumorales pancréatiques de souris est décrit. Ce modèle imite un grand nombre de conditions cliniques chez les patients ayant une maladie métastatique au foie. Souris développent constamment des métastases dans le foie qui permet d'observer le processus métastatique, les essais de thérapie expérimentale, et la recherche en immunologie tumorale.
Introduction
Canalaire pancréatique adénocarcinome (PDA) est la quatrième cause de décès liés au cancer aux États-Unis 1. La survie à cinq ans pour les patients atteints de PDA métastatique est 2-12% 1. Bien que la chimiothérapie adjuvante et néoadjuvante pour cancer du pancréas est plus efficace que jamais, il reste encore un besoin désespéré de nouvelles thérapies.
Le développement de nouveaux produits thérapeutiques requiert des modèles animaux précliniques fiables. Bien que les modèles de tumeurs sous-cutanées sont simples à utiliser, les inconvénients comprennent l'incapacité de ces tumeurs et de métastases imiter la progression de la tumeur et des microenvironnements vu dans les cancers humains. Des modèles génétiquement modifiés, tels que la souris transgénique contenant Kras et p53 knock-in mutations oncogéniques (le modèle KPC) 2 et le modèle KPC avec une lignée traceur YFP (le modèle de PKCY) 3 permettent l'étude des tumeurs d'origine naturelle dans immunocompetesouris NT. En outre, le micro-environnement de la tumeur n'est pas modifiée et ressemble plus étroitement à celle observée dans la progression tumorale humaine. Malheureusement, le calendrier de développement de la tumeur est variable dans ces modèles, ce qui rend difficile l'étude de thérapies expérimentales. En outre, le rétrocroisement de ces souris nécessite une quantité importante de temps et d'engagement financier, qui n'est pas toujours possible. Enfin, les modèles de xénogreffe de souris implantées PDA nécessitent du souris, qui ont modifié ou micro-environnements tumoraux absents immunodéprimés. Par conséquent, l'efficacité des thérapies expérimentales démontré dans plusieurs modèles précliniques sont souvent pas reproductible dans quatre essais cliniques humains.
Ce modèle de souris de hemisplenectomy utilise des cellules tumorales qui sont Panc02, une lignée cellulaire de tumeur hautement tumorigène induit par le méthylcholanthrène pancréatique provenant de souris C57BL / 6 5, 6. En outre, d'autres lignées cellulaires murines PDA dérivées de la micro KPCe peut être utilisé dans ce modèle. Schulick et al. Ont déjà mis au point une technique de hemisplenectomy et créé un modèle de souris syngéniques de métastases du cancer du côlon 7. Ce modèle de hemisplenectomy (figure 1) offre inoculation de la tumeur cohérent et égal chez les souris immunocompétentes se prêtant à la recherche de nouveaux agents thérapeutiques 7-10.
Protocol
Representative Results
Discussion
Ce modèle murin préclinique de la métastase du cancer du pancréas dans le foie via une technique d'injection de hemispleen est le premier modèle qui reflète décrit un grand nombre de conditions cliniques et immunologiques de patients ayant une maladie métastatique au foie. Ce modèle offre plusieurs avantages par rapport à d'autres modèles murins. Tout d'abord, à la différence des modèles transgéniques de cancer du pancréas, dans lequel seulement 30% des souris développent des métastases ver…
Divulgazioni
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
KF et KO sont co premiers auteurs avec KS
Ce travail a été financé en partie par le AHPBA Fellowship (KS), NIH K23 CA148964-01 (LZ), Johns Hopkins School of Medicine Bourse de recherche clinique scientifique (LZ), Fondation Viragh et Cancer Center Passer Viragh pancréas à l'Université Johns Hopkins (EMJ et LZ), le pancréas Fondation nationale (LZ), la Fondation de la famille Lefkofsky (LZ), la SPORE NCI dans Gastrointestinal Cancers CA062924 P50 (EMJ, LZ), la Fondation Lustgarten (LZ), et les subventions Sol Goldman pancréas Cancer Center (KS , BHE, LZ).
Materials
| Cell culture media and components | will vary depending on cell line | ||
| Phosphate Buffered Saline | Gibco by Life Technologies | 10010-023 | |
| 15 mL centrifigure tubes | Corning | 430052 | |
| Curved Operating Scissor | Roboz Surgical Store | RS-6835 | |
| Micro dissecting Graefe Forceps | Roboz Surgical Store | RS-5130 | |
| Needle holder (regular) | World Precision Instruments, Inc | ||
| 3-0 or 4-0 suture | courtesy of dept of surgery, Johns Hopkins | ||
| Weck Horizon Open Ligating Clip Applier, small, angled | Teleflex | 137085 | |
| Weck Horizon Open Ligating Clip Applier, medium, angled | Teleflex | 237115 | |
| Weck Horizon medium ligating clips | Teleflex | 002200 | |
| Weck Horizon small ligating clips | Teleflex | 001200 | |
| Syringe, 1 cc, tb syringe, 3/8" slip tip | Becton Dickinson | 309625 | |
| Syringe, 1 cc, tb syringe, 5/8" slip tip | Becton Dickinson | 309597 | |
| 9 mm Autoclip Applier | Mikron | 427630 | |
| 9 mm Autoclip | Becton Dickinson | 427631 | |
| Heating pad | Sunbeam | CAT93 | |
| 70% Ethanol | sold by numerous vendors | ||
| Ketamine Hydrochloride | Hospira | 22395DD | |
| Xylazine hydrochloride | Sigma | X1251 |
Riferimenti
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