Un preclinici Modello murino di metastasi epatiche
Summary
Un preclinico, modello murino di metastasi epatiche effettuato tramite una tecnica di iniezione hemispleen.
Abstract
Numerosi modelli murini sono stati sviluppati per studiare tumori umani e far progredire la comprensione del trattamento del cancro e di sviluppo. Qui, un preclinico, modello murino di tumore pancreatico di metastasi epatiche tramite un'iniezione hemispleen delle cellule tumorali pancreatiche murine singeniche è descritto. Questo modello riproduce molte delle condizioni cliniche in pazienti con malattia metastatica al fegato. Mice costantemente sviluppano metastasi nel fegato permettendo indagine del processo metastatico, testing terapia sperimentale, e la ricerca del tumore immunologia.
Introduction
Duttale del pancreas adenocarcinoma (PDA) è la quarta principale causa di decessi per cancro correlati negli Stati Uniti 1. La sopravvivenza a cinque anni per i pazienti con PDA metastatico è 2-12% 1. Anche se la chemioterapia adiuvante e neoadiuvante per il cancro del pancreas è oggi più efficace che mai, rimane ancora un disperato bisogno di nuove terapie.
Lo sviluppo di nuove terapie richiede modelli affidabili animali preclinici. Sebbene i modelli tumorali sottocutanei sono semplici da usare, svantaggi includono l'incapacità di questi tumori a metastatizzare e imitare la progressione del tumore e microambienti visto in tumori umani. Modelli geneticamente modificati, come il topo geneticamente modificato contenente Kras e p53 knock-in mutazioni oncogene (il modello KPC) 2 e il modello KPC con un lignaggio tracciante YFP (il modello PKCY) 3 consentono lo studio dei tumori presenti in natura in immunocompetetopi NT. Inoltre, il microambiente tumorale è inalterata e assomiglia più da vicino visto che nella progressione tumorale umano. Purtroppo, i tempi di sviluppo del tumore è variabile all'interno di questi modelli, che lo rende difficile studiare terapie sperimentali. Inoltre, retroincroci di questi topi richiede una notevole quantità di tempo e di impegno finanziario, che non è sempre fattibile. Infine, modelli murini di xenotrapianto PDA impiantati, esigono topi, che hanno modificato o microambienti tumorali assenti immunocompromessi. Di conseguenza, l'efficacia delle terapie sperimentali dimostrate in questi modelli preclinici spesso non sono riproducibili in studi clinici umani 4.
Questo modello murino hemisplenectomy utilizza cellule tumorali Panc02, che sono una, metilcolantrene indotta pancreas linea di cellule tumorali altamente cancerogeno derivato da C57BL / 6 topi 5, 6. Inoltre, altre linee cellulari PDA murine derivate dal microfono KPCe può essere utilizzato in questo modello. Schulick et al. Hanno già sviluppato una tecnica hemisplenectomy e creato un modello singenico topo delle metastasi del cancro al colon 7. Questo modello hemisplenectomy (Figura 1) offre costante e pari inoculazione del tumore nei topi immunocompetenti si presta alla ricerca di nuovi agenti terapeutici 7-10.
Protocol
Representative Results
Discussion
Questo modello murino preclinico del pancreas metastasi del cancro al fegato tramite una tecnica di iniezione hemispleen è il primo modello descritto che rispecchia molte delle condizioni cliniche e immunologiche dei pazienti con malattia metastatica al fegato. Questo modello offre diversi vantaggi rispetto ad altri modelli murini. In primo luogo, a differenza dei modelli transgenici di cancro al pancreas in cui solo il 30% dei topi sviluppano metastasi al fegato e la tempistica della formazione di metastasi è abbasta…
Divulgazioni
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
KF e KO sono co primi autori insieme a KS
Questo lavoro è stato supportato in parte dal AHPBA Fellowship (KS), NIH K23 CA148964-01 (LZ), Johns Hopkins School of Medicine Clinical Scientist Award (LZ), Viragh Fondazione e l'Skip Viragh pancreas Cancer Center della Johns Hopkins (EMJ e LZ), il Pancreas Fondazione Nazionale (LZ), il Lefkofsky Family Foundation (LZ), il SPORE NCI in tumori gastrointestinali P50 CA062924 (EMJ, LZ), la Fondazione Lustgarten (LZ), e le sovvenzioni Sol Goldman pancreas Cancer Center (KS , BHE, LZ).
Materials
| Cell culture media and components | will vary depending on cell line | ||
| Phosphate Buffered Saline | Gibco by Life Technologies | 10010-023 | |
| 15 mL centrifigure tubes | Corning | 430052 | |
| Curved Operating Scissor | Roboz Surgical Store | RS-6835 | |
| Micro dissecting Graefe Forceps | Roboz Surgical Store | RS-5130 | |
| Needle holder (regular) | World Precision Instruments, Inc | ||
| 3-0 or 4-0 suture | courtesy of dept of surgery, Johns Hopkins | ||
| Weck Horizon Open Ligating Clip Applier, small, angled | Teleflex | 137085 | |
| Weck Horizon Open Ligating Clip Applier, medium, angled | Teleflex | 237115 | |
| Weck Horizon medium ligating clips | Teleflex | 002200 | |
| Weck Horizon small ligating clips | Teleflex | 001200 | |
| Syringe, 1 cc, tb syringe, 3/8" slip tip | Becton Dickinson | 309625 | |
| Syringe, 1 cc, tb syringe, 5/8" slip tip | Becton Dickinson | 309597 | |
| 9 mm Autoclip Applier | Mikron | 427630 | |
| 9 mm Autoclip | Becton Dickinson | 427631 | |
| Heating pad | Sunbeam | CAT93 | |
| 70% Ethanol | sold by numerous vendors | ||
| Ketamine Hydrochloride | Hospira | 22395DD | |
| Xylazine hydrochloride | Sigma | X1251 |
Riferimenti
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