バイオメディカル応用のための機械的に調整可能な生物活性金属スキャフォールドの作製

Summary

Bioactive and mechanically reliable metal scaffolds have been fabricated through a method which consists of two processes, dynamic freeze casting for the fabrication of porous Ti, and coating and densification of the Ti scaffolds. The densification process is simple, effective and applicable to the fabrication of functionally graded scaffolds.

Abstract

Biometal systems have been widely used for biomedical applications, in particular, as load-bearing materials. However, major challenges are high stiffness and low bioactivity of metals. In this study, we have developed a new method towards fabricating a new type of bioactive and mechanically reliable porous metal scaffolds-densified porous Ti scaffolds. The method consists of two fabrication processes, 1) the fabrication of porous Ti scaffolds by dynamic freeze casting, and 2) coating and densification of the porous scaffolds. The dynamic freeze casting method to fabricate porous Ti scaffolds allowed the densification of porous scaffolds by minimizing the chemical contamination and structural defects. The densification process is distinctive for three reasons. First, the densification process is simple, because it requires a control of only one parameter (degree of densification). Second, it is effective, as it achieves mechanical enhancement and sustainable release of biomolecules from porous scaffolds. Third, it has broad applications, as it is also applicable to the fabrication of functionally graded porous scaffolds by spatially varied strain during densification.

Introduction

金属の生体材料が広く、それらの優れた機械的強度や弾力性^、1-3の耐荷重インプラント、内部固定デバイスとして使用されてきたが、それらは2つの重要な課題が伴う：1）機械的な不一致を金属は生体組織よりもはるかに硬いので、望ましくない損害を引き起こします周囲組織としばしばしばしば異物反応（例えば、炎症または血栓症）を引き起こす、生物学的組織と悪い界面をもたらす^。4-6多孔性金属足場は改善、構造において骨成長を促進するために提案されている2）低い生物活性に骨-インプラント接触応力遮蔽効果は、それらの低減剛性を抑制しつつ^7-9また、種々の表面改質は、金属インプラントの生物学的活性を増強するために適用されています。このような改変は、生物活性分子（ 例えば、成長 FACで金属表面を被覆含まター）または薬物 （例えば、バンコマイシン、テトラサイクリン^）。10-12しかし、このような多孔性金属足場の減少、機械的特性等の問題が、剛性が低下し、生物活性コーティング層の迅速な放出は未解決のまま^。13-16

具体的には、チタン（Ti）およびTi合金は、その優れた機械的特性、化学的安定性、および良好な生体適合性の中で最も人気のあるバイオメタルシステムの一つです^。13,17-19彼らの泡状のアプリケーションが3Dので、関心の高まりをもを集めています多孔質のネットワークは、骨様の機械的特性に加えて、骨の内部成長を促進する^。20-22努力は、ポリマースポンジの複製、金属粒子の焼結、ラピッドプロトタイピング（RP）方式を含む新しい製造技術を開発することにより、機械的特性を改善するためになされている、および毛穴の様々な機能を制御するために、スペースホルダー法（例えば、細孔画分、形状、大きさ、分布、および接続）と材料特性（ 例えば 、金属相と不純物^）。23-25 ​​近年、水ベースの金属スラリーの凍結鋳造は、よく整列細孔と機械的に強化されたTi形態を製造するために、かなりの注目を集めています凝固時に一方向の氷のデンドライト成長を利用した構造。しかし、水と金属粉末の接触による酸素汚染は、Ti足場の脆化を最小限にするために、特別な注意が必要です^。14,15

したがって、我々は、生物活性と機械的に同調可能な多孔性のTi足場を製造に向けた新たなアプローチを開発しました^。25足場は最初に50％以上の気孔率を有する多孔質構造を有しています。製造された多孔質足場は、生物活性分子でコーティングされ、その後、最終的な多孔性、機械的特性および薬物放出挙動は、アプリによって制御された時に機械的なプレスを用いて圧縮しました。ED株。緻密化した多孔質チタンインプラントは、骨（3-20万気圧^）。2ので、コーティング層のと同等の剛性が低いのにもかかわらず、良好な強度と低い多孔性を示してきた、緻密化多孔質チタンの生物活性が大幅に改善されました。また、ために高密度化プロセスにより誘導されたユニークなフラットな細孔構造の、コーティングされた生物活性分子は徐々に長期間その有効性を維持し、足場から放出されることが見られました。

本研究では、生物医学的用途における潜在的な使用のために緻密化した多孔質チタンの足場を製造するために、当社の確立された方法を紹介しました。プロトコルは、金属スラリーと多孔質足場の緻密化とダイナミック凍結鋳造が含まれています。まず、 図1（a）に示すように 、動的凍結鋳造法が導入された良好な延性を有する多孔質チタン足場を作製しました。 Ti粉末を液体カンフェン中に分散させました。次に、温度を下げることにより、液相は、Ti粉末ネ​​ットワークと固体カンフェン結晶間の相分離をもたらす、固化させました。その後、凝固したTi-カンフェングリーン体は、Ti粉末を連続チタン支柱と縮合され、カンフェン相が完全に多孔質構造を得るために除去された焼結しました。得られた多孔質足場を有するコーティング及び緻密化プロセスが緻密化し、初期空隙率の度合いを変化させること、を使用しました。コー​​ティング層およびその放出挙動は、GFPでコーティングされた高密度のチタンと比較して緻密化して多孔質とすることなく、チタンコーティングを採用して可視化し、緑色蛍光タンパク質（GFP）を用いて定量しました。最後に、二つの異なる多孔質構造を有する傾斜機能チタン足場が提案され、多孔質足場の内側及び外側部分の緻密化の度合いを変えることによって実証されました。

Protocol

多孔性金属足場の作製1。 4初期多孔度（40、50、60、及び70）を有する多孔質チタン足場のために、表1に記載したように材料の適切な量を秤量した後、市販のTi粉末、カンフェン、及びKD-4を混合したTi-カンフェンスラリーを準備します。 500 mlのポリエチレン（PE）ボトルにスラリーを注ぎ、30 rpmでボールミルオーブン中で30分間55℃でボトルを回転させます。 60ミリ?…

Representative Results

多孔質チタン足場を製造するために使用される製造プロセスは、 図1Aに示されています。 Ti粉末を12時間44℃で容器の連続的な回転によってカンフェン中に均一に分散保持され、液体カンフェンが完全に固化している間、比較的重いTi粉末のいずれかの堆積物を最小限にすることができます。その結果、均質のTi-カンフェングリーン体は、図1（b）に示すように 、動的…

Discussion

バイオメタルシステムは、広く、生物医学的用途に使用されているが、特に、荷重支持材料として、高い剛性と低い金属の生物活性は、主要な課題とみなされてきました。本研究では、新しい金属系、生体模倣機械的特性ならびに持続的な放出挙動を持つ生理活性表面を有する緻密化多孔性金属足場の製造方法を確立しました。当社の製造方法の主要な利点は、1を含む）に、我々はすでに開…

Materials

Titanium powder	Alfa Aesar	#42624	-325 mesh, 99.5% (metals basis)
Camphene	SigmaAldrich	#456055	95%, C10H16
KD-4	Croda	­	Hypermer, polymeric dispersant
Phosphate Buffer Solution (PBS)	Welgene	ML 008-01	­
Green Fluorescent Protein (GFP)	Genoss Co.	–	>98% purity, 1mg/ml
Ball mill oven	SAMHENUG ENERGY	SH-BDO150	­
Freeze dryer	Ilshin Lab.	PVTFD50A	­
Cold isostatic pressing (CIP) machine	SONGWON SYSTEMS	CIP 42260	­
Vaccum furnace	JEONG MIN INDUSTRIAL	JM-HP20	­
electical chaege machine	FANUC robocut	0iB	External use
Press machine	CG&S	AJP-200	­
Confocal laser scanning spectroscopy (CLSM)	Olympus	FluoView FV1000	External use