肝切除肝内肿瘤生长的影响
Summary
A high incidence of tumor recurrence after resection of liver metastases remains an unsolved problem. The illustrated mouse model may be useful to investigate the reasons for such recurrences. It combines a liver resection model with intrahepatic tumor cell injection for the first time.
Abstract
肿瘤复发转移切除肝脏病变后的高发病率仍然是一个未解决的问题。小的肿瘤细胞沉积物，这是不通过常规临床成像可检测的，可通过肝切除后的肝再生因子来刺激。这是不完全清楚，但是，哪些因素是肿瘤复发的关键。
所提出的小鼠模型可能是有用的，以探索肝切除后发挥复发性恶性病变的发展中的作用的机制。该模型结合了规定量的小鼠肝组织切除，肿瘤诱导（注射）中的易于执行和可重复的技术。动物用一个单剖腹手术，30％的肝切除，或70％的肝切除术。所有动物随后收到一个肿瘤细胞注射到剩余的肝组织。两周的观察后，将肝脏和肿瘤大小和重量，并进行了评价免疫组化检查。
一个70％的肝切除后，肿瘤的体积和重量比单独一个剖腹（P <0.05）均显著增加。此外，免疫组织化学（Ki67的）显示切除组中增加的肿瘤增殖率（P <0.05）。
这些结果表明，对肝内肿瘤生长肝再生机制的影响。像组织后处理，或RNA分析相结合的方法，所描述的小鼠模型可以作为参与肝脏内肿瘤的生长和转移复发的疾病不同因素密切审查的基础。相当多的像的术后观察的长度的变量，用于注射或注射和肝切除的时刻的细胞系探索肝切除后的转移的情况下的一个具体问题时提供多种角度。此过程的局限性是互惠thorization执行对动物的过程中，获得适当的动物试验设施，并购置某些设备。
Introduction
结直肠癌（CRC）占近9％的恶性肿瘤。它是第三大常见癌症，无论是在美国和世界各地。从30万CRC全球范围内的死亡率为50多万，每年1。患者的百分之二十在他们的大肠肿瘤的发现从肝转移苦。可切除的转移是由部分肝切除2,3通常的方式处理。改进的外科技术，新的多策略和可切除转移新的定义呈现部分肝切除可能越来越多的患者4的疗法。
继发性恶性肿瘤复发，但是，在现代胃肠外科具有挑战性的临床后遗症。 CRC患者谁接受肝转移灶切除术在其剩余肝5开发一种新的肿瘤的30〜50％的机会。因此，有必要对在进一步的研究参与肝转移复发的机制。
约70％的肝切除通常是由剩余的肝组织在几周内补偿。该再生涉及多个机制，包括象白细胞介素-6（IL-6），肿瘤坏死因子α（TNF-α），肝细胞生长因子（HGF）的细胞因子，转化生长因子β（TGF-β），血管内皮生长因子（VEGF ），基质金属蛋白酶（MMP-2和MMP-9）和CXC趋化因子6-11。这些物质支持肝再生，并且还可以通过诱导的小肿瘤细胞沉积物，其中不是由常规临床成像检测到的剩余的肝生长负责初级和次级肝恶性肿瘤的复发率较高。这种因果关系尚未迄今证实。
建立了如下假设。部分肝切除之后，增殖因子，负责活ř肥大也可能诱导以前未发现的肿瘤细胞在肝脏的生长。小鼠模型的设计相结合肝切除和肿瘤诱导的技术。第三无胸腺裸-foxn1nu / nu小鼠分为三组，每组10只动物。他们每个人都用无论是单独的剖腹手术（A组）治疗，30％的肝切除（B组）或70％肝切除术（C组）。在所有组中的动物随后收到一个肿瘤细胞注射到肝脏的定义剩余部分，以模拟休眠肿瘤细胞。其中，两个星期观察，然后动物评价肿瘤生长和肝脏肥大。
的目标是创建可用于搜索可能发挥肝切除后肿瘤形成的作用的分子和致病因素的模型。这种方法可以是在评估帮助：参与肝再生内分泌因子的来源;肝内TUM责任机制或肝切除术后的增长;和必要的肝内肿瘤生长诱导肝切除量。只是对动物，因为它们承诺向的基本生物学原理的理解，并可以预期受益通过改进的治疗选择人类知识的发展已经执行了下面的方法。由于涉及在这些问题的机制，它在体内被检查，如体外方法可能无法提供人类病理学的一个真实的表现。
这些调查可能导致的有关目标的发现为用于降低肿瘤复发的预防性治疗方案。
Protocol
Representative Results
Discussion
表演在啮齿类动物外科手术之前的实验已经能够确定某些变量，可以作为来源的偏见。为了获得可靠和有效的结果，请考虑以下注意事项。
常规操作前禁食可导致肝脂肪变性12，其可以抑制肝再生13,14。因此，不建议使用。肝细胞的有丝分裂最高活性在整个15天发生变化。如果可能的话，在白天所有组在一定的时间进行的程序。鼠肝再生是最有效的动?…
Divulgazioni
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
特别致谢去本杰明博士天牛他在技术问题援助。作者也想感谢马库斯Forschner博士和伯克穆勒为自己的多媒体支持，埃里卡Magelky她编辑的专业知识和丽莎霍农，罗兰Jurgons博士和斯蒂芬·冯·Hörsten教授（均来自弗朗兹 – Penzoldt中心，大学埃尔兰根），他们在动物处理和护理专业精神。我们感谢在临床化学研究所，德国海德堡大学医学院曼海姆迈克尔Neumaier教授提供MC38肿瘤细胞。
目前的工作是在用于获得程度的要求履行执行“MED博士”。在弗里德里希 – 亚历山大大学埃尔兰根 – 纽伦堡（FAU）。
Materials
| Equipment | |||
| Operation Microscope | Zeiss | OPMI-1 FC S21 | |
| Induction Cage (Plexiglas Box) | UNO BV, Netherlands | 180000132 | |
| Flowmeter + Connection Kit | UNO BV, Netherlands | 180000008 | |
| UNO Vaporizer Sigma Delta | UNO BV, Netherlands | 180000002 | |
| Key Filler for Anesthetic | UNO BV, Netherlands | 180000010 | |
| Activated Charcoal Filter Adsorber | UNO BV, Netherlands | 180000140 | |
| Gas Exhaust Unit | UNO BV, Netherlands | 180000118 | |
| Face Mask for mouse | UNO BV, Netherlands | 180000065 | |
| Vaporizer Stand | UNO BV, Netherlands | 180000006 | |
| Heat lamp | Physitemp Instruments | HL-1 | |
| Styrofoam Pad | RAYHER | 30074000 | |
| Third Hand Tool | TOOLCRAFT | ZD-10F | |
| Precision Scales | Kern | EW 220-3NM | |
| Scales | Kern | EMB 500-1 | |
| Sliding Caliper | MIB | MIB 82026100 | |
| Microdissection forceps | Braun/Aesculap | BD195R | |
| Microdissection scissors | Braun/Aesculap | FD100R | |
| Microdissection needle holder | Braun/Aesculap | BM563R | |
| Retractor | Fine Science Tools (F.S.T.) | No. 17001-0 | Type: Bowmann |
| Clamp | Braun/Aesculap | BJ002R | |
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| Expendable Items | |||
| (NOTE: Quantities are per animal and procedure) | |||
| Foliodrape sterile cover (45x75cm) | Hartmann | 2775001 | |
| Sterile Cotton Swabs (2x) | Hartmann | 4700151 | Peha |
| Sterile fluid (0,9%NaCl) | Braun | 3570310 | PZN=04454809 |
| Disinfectant (Softasept – 250ml) | Braun | 3887138 | PZN=0762008808505018 |
| 2 x 1ml syringe (Injekt-F ) | Braun | 9166017V | |
| 26G canula (Sterican) – for Carprofen injection | Braun | 4665457 | |
| 30G canula (Sterican) – for Tumor injection | Braun | 4656300 | |
| Caprofen (=Rimadyl) | Pfizer | QM01AE91 | |
| Metamizole (=Novaminsulfon) | Ratiopharm | 16543.00.00 | |
| 4-0 Vicryl suture | Ethicon | J835G | |
| 5-0 Prolene suture | Ethicon | 8618G | |
| SafeLock Flex-Tube 1.5mL | Eppendorf | 22363778 | |
| 4×4 Gauze Sponge | Kendall/Covidien | UPC: 728795135355 | ASIN: B005BFQTWM |
| Large paperclip | ACCO | A7072510G | |
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| Animals | |||
| Female athymic nude-foxn1nu/nu | Harlan Laboratories B.V. | Code 069 | |
Riferimenti
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