Мышиные Экспериментальная модель самобытного развития опухолевого и перитонеальный метастаз<em> с помощью</em> Ортотопическая Заражение клеток карциномы яичников
Summary
Для уточнения многоэтапный процесс брюшины распространения рака яичников, текущее исследование представляет собой мышиный экспериментальную модель развития первичной опухоли и метастазов с помощью перитонеального ортотопической прививки с этими опухолевыми клетками.
Abstract
Эпителиальный рак яичников (EOC) ассоциируется с плохим прогнозом, поскольку он показывает перитонеальный распространение. Чтобы улучшить прогноз, важно контролировать перитонеальный распространение. Тем не менее, до сих пор неясно, как опухолевые клетки отделяются от первичных повреждений и прикрепить к мезотелием. Создание соответствующей животной модели необходимо , чтобы получить представление о механизме распространения брюшную в естественных условиях. В настоящем исследовании мы вводим процесс из локальной инъекции клеток EOC в мышиной яичников поверхности к развитию метастаз, включая брюшину и отдаленные органы. использовали женских особей голых мышей (BALB / C Nu / Nu) в возрасте 8 недель. Под микроскопического поля зрения, EOC клетки (1 х 10 5 клеток / мкл среднего внеклеточного матрикса (ЕСМ) основе гидрогеля / одностороннее яичник / мышь) вводили в мышиные яичниках через забрюшинного подход со стороны спинного фланга. Этот предложенный метод является лесс инвазивная процедура для мыши и сводит к минимуму повреждения яичника. Здесь мы описываем методологические шаги в развитии оригинального и метастатического формирования опухоли EOC.
Introduction
Эпителиальный рак яичников (EOC) приходится самый высокий уровень заболеваемости раком , связанных с смертности среди гинекологических злокачественных опухолей 1. EOC ассоциируется с плохим прогнозом, в первую очередь из – за его позднего симптоматики, и часто ассоциируется с множественными внутрибрюшинных вкраплениями и отдаленных метастазов 2-4. Перитонеальный распространение является многоступенчатым процессом. Во-первых, опухолевые клетки отделяются от первичных поражений, и мигрируют в брюшную полость. Когда опухолевые клетки прикрепляются к перитонеальной мезотелием, они начинают вторгаться ткани через Мезотелия 5,6. Для того , чтобы лучше понять биологию опухоли (например, прогрессирование рака и терапевтический ответ), мышиные модели обеспечивают большой объем информации. Ксенотрансплантата с раковыми клетками человека широко используется для моделей мышей, в которых раковые клетки человека, привитых подкожно, внутрибрюшинно, внутривенно, и ортотопически. Модель животных с ортотопически гсплавлялись опухоль может более эффективно и точно получать результаты, которые отражают окружающую среду опухоли у человека по сравнению с животной модели с гетеротопически привитой опухолью. Таким образом, для многих опухолей человека, Ортотопическая модели трансплантации были созданы 7-11.
Здесь мы опишем ортотопическая инокуляции клеток EOC человека через забрюшинного подход со стороны спинного фланг, который имеет ограниченную инвазивность по сравнению с вентральной прививкой. Этот метод может обеспечить разнообразие полезной информации о ЕОС, особенно механизм внутрибрюшинного распространения.
Protocol
Representative Results
Discussion
Модели на животных имеют важное значение для анализа механизмов развития опухоли, прогрессии, метастазировании и эффективности лекарственного средства против раковых клеток. Мыши, несущие клеток рака яичников человека также были использованы в качестве животной модели. Здесь мы опи?…
Divulgazioni
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
Авторы благодарят членов кафедры акушерства и гинекологии и биологии рака за полезные обсуждения и технической помощи. Это исследование было поддержано Японского общества содействия развитию науки (JSPS) Грант-в-помощь для научных исследований (15K15604; Х. Кэджияма).
Materials
| Matrigel matrix | BD | 354234 | ECM-based hydrogel |
| Insulin syringe | TERUMO | SS-05M2913 | 1/2cc, 29Gx1/2" |
| Suturing needle with suture | 11mm, 3/8, Nylon6-0 | ||
| Reflex 7mm Wound Clip Applier | CellPoint Scientific | 204-1000 | |
| Reflex 7mm wound clips | CellPoint Scientific | 203-1000 |
Riferimenti
- Jemal, A., et al. Global cancer statistics. CA Cancer J Clin. 61 (2), 69-90 (2011).
- Kajiyama, H., et al. Long-term clinical outcome of patients with recurrent epithelial ovarian carcinoma: is it the same for each histological type. Int J Gynecol Cancer. 22 (3), 394-399 (2012).
- Kikkawa, F., et al. Advances in treatment of epithelial ovarian cancer. Nagoya J Med Sci. 68 (1-2), 19-26 (2006).
- Yoshikawa, N., et al. Clinicopathologic features of epithelial ovarian carcinoma in younger vs. older patients: analysis in Japanese women. J Gynecol Oncol. 25 (2), 118-123 (2014).
- Kajiyama, H., et al. Involvement of SDF-1alpha/CXCR4 axis in the enhanced peritoneal metastasis of epithelial ovarian carcinoma. Int J Cancer. 122 (1), 91-99 (2008).
- Terauchi, M., et al. Possible involvement of TWIST in enhanced peritoneal metastasis of epithelial ovarian carcinoma. Clin Exp Metastasis. 24 (5), 329-339 (2007).
- Bronstein, L., Zechner, C., Koeppl, H. Bayesian inference of reaction kinetics from single-cell recordings across a heterogeneous cell population. Methods. 85, 22-35 (2015).
- Guo, W., Zhang, S., Liu, S. Establishment of a novel orthotopic model of breast cancer metastasis to the lung. Oncol Rep. 33 (6), 2992-2998 (2015).
- Lewis-Tuffin, L. J., et al. Src family kinases differentially influence glioma growth and motility. Mol Oncol. , (2015).
- Saar, M., et al. Orthotopic tumorgrafts in nude mice: A new method to study human prostate cancer. Prostate. 75 (14), 1526-1537 (2015).
- Zou, Y., et al. miR-29c suppresses pancreatic cancer liver metastasis in an orthotopic implantation model in nude mice and affects survival in pancreatic cancer patients. Carcinogenesis. 36 (6), 676-684 (2015).
- Lau, D. H., Lewis, A. D., Ehsan, M. N., Sikic, B. I. Multifactorial mechanisms associated with broad cross-resistance of ovarian carcinoma cells selected by cyanomorpholino doxorubicin. Cancer Res. 51 (19), 5181-5187 (1991).
- Bao, L., Matsumura, Y., Baban, D., Sun, Y., Tarin, D. Effects of inoculation site and Matrigel on growth and metastasis of human breast cancer cells. Br J Cancer. 70 (2), 228-232 (1994).
- Huang, M. J., et al. Epidemiological investigation on major depressive disorder in the most heavily damaged areas from Wenchuan earthquake in 2008. Zhonghua Liu Xing Bing Xue Za Zhi. 31 (2), 167-170 (2010).
- Ma, L., et al. Mortality of neonatal respiratory failure related to socioeconomic factors in Hebei province of China. Neonatology. 100 (1), 14-22 (2011).
- Lin, Z., et al. Serum levels of FGF-21 are increased in coronary heart disease patients and are independently associated with adverse lipid profile. PLoS One. 5 (12), e15534 (2010).
- Liu, B., et al. Lumbar interspinous non-fusion techniques: comparison between Coflex and Wallis. Nan Fang Yi Ke Da Xue Xue Bao. 30 (11), 2455-2458 (2010).
- Zhang, Y., et al. Wave intensity analysis of carotid artery: a noninvasive technique for assessing hemodynamic changes of hyperthyroid patients. J Huazhong Univ Sci Technolog Med Sci. 30 (5), 672-677 (2010).
- Song, G. S., et al. Comparative transcriptional profiling and preliminary study on heterosis mechanism of super-hybrid rice. Mol Plant. 3 (6), 1012-1025 (2010).
- Wan, L., et al. The analysis of variation of Han female adolescent bone development in Henan and Zhejiang province. Fa Yi Xue Za Zhi. 26 (2), 97-99 (2010).
- Wang, H. B., et al. Excitation-emission fluorescence characterization study of the three phenolic compounds. Guang Pu Xue Yu Guang Pu Fen Xi. 30 (5), 1271-1274 (2010).
