Summary

वयस्क पुरुष माउस में Transurethral जगाकर प्रक्रिया

Published: November 02, 2017
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Summary

Transurethral जगाकर एक चुनौतीपूर्ण प्रक्रिया है और साहित्य में अच्छी तरह से वर्णित नहीं किया गया है । इस पांडुलिपि का उद्देश्य मूत्राशय और वयस्क पुरुष चूहों में सक्रिय पदार्थों के साथ तरल पदार्थ के intravesical वितरण के लिए एक कैथेटर के transurethral प्रविष्टि के लिए एक तकनीक का वर्णन है ।

Abstract

Transurethral जगाकर सक्रिय अवयवों (जैसे, दवाओं, रसायनों, बैक्टीरिया, और वायरस) के साथ विभिन्न समाधान देने के लिए इस्तेमाल किया जा सकता है या तो मूत्राशय विकृतियों के पशु मॉडल प्रेरित करने के लिए मूत्र में स्थानीय रूप से या intravesical उपचार की प्रभावशीलता । कम मूत्र पथ के सबसे कुतर मॉडल (LUT) विकृतियों मादा मूत्रमार्ग के माध्यम से पदार्थों की intravesical जगाकर की आसानी के कारण मादा चूहों में प्रेरित कर रहे हैं । हालांकि, महिला और पुरुष LUT के बीच संरचनात्मक मतभेदों के कारण, एक पुरुष माउस में transurethral जगाकर एक बहुत ही चुनौतीपूर्ण प्रक्रिया समझा गया है, और यह पहले से नहीं बताया गया है । इस पांडुलिपि में, हम कैसे एक पुरुष माउस के मूत्रमार्ग में बाद में सम्मिलन के लिए पॉलीथीन (पीई) टयूबिंग तैयार करने के लिए का एक विस्तृत विवरण प्रदान करते हैं । इसके अलावा, हम पीई टयूबिंग के आदर्श प्रकार टीका की वांछित साइट के आधार पर इस्तेमाल किया जा करने के लिए चर्चा । इसके अलावा, हम बिंदु से बिंदु का वर्णन कैसे एक सफल transurethral जगाकर के लिए एक जानवर को तैयार करने के लिए मूत्रमार्ग को चोट से बचने और इच्छित स्थान पर समाधान के वितरण सुनिश्चित करते हैं । प्रक्रिया चमड़ी और मुण्ड मूत्रमार्ग कुहर के उद्घाटन का पर्दाफाश करने के लिए मुकर द्वारा शुरू कर दिया है । अगला, मुण्ड कुंद गैर कुचल संदंश लिंग और पीई ट्यूबिंग को स्थिर करने के द्वारा समझा रहे हैं । पीई टयूबिंग पहले पशु शरीर के लिए मूत्रमार्ग कुहर समानांतर में डाला जाता है, तो अपने कोण कैथेटर झुकाव के लिए यह मूत्रमार्ग की प्राकृतिक वक्रता का पालन करने के लिए पैंतरेबाज़ी द्वारा समायोजित किया जाता है । इस तकनीक को मूत्राशय विकृतियों के प्रेरित murine मॉडल और/या पुरुष चूहों में intravesical उपचार की प्रभावशीलता का मूल्यांकन करने के लिए इस्तेमाल किया जा सकता है ।

Introduction

transurethral जगाकर दृष्टिकोण का उपयोग पिछले अध्ययनों में एक के रूप में प्रयोग किया गया है मूत्राशय विकृतियों के1,2,3,4 और का मूल्यांकन करने के लिए इस्तेमाल किया जा सकता है के रूप में कुतर मॉडल बनाने के लिए चूहों में स्थानीय रूप से दिया उपचार की प्रभावशीलता. हालांकि पशु मॉडल पूरी तरह से मानव विकृतियों दोहराऊंगा नहीं कर सकते, पशु अध्ययन में अंतर्निहित तंत्र की पहचान ऐसे मध्यवर्ती cystitis/मूत्राशय दर्द सिंड्रोम, तंत्रिकाजन्य के रूप में मानव LUT विकारों की एक बेहतर समझ प्रदान करता है cystitis, स्व-प्रतिरक्षित cystitis, और प्रोस्टेटिक शोथ5.

transurethral जगाकर प्रक्रिया एक वयस्क पुरुष माउस पर प्रदर्शन किया है और अधिक तकनीकी रूप से एक वयस्क महिला माउस में intravesical जगाकर की तुलना में चुनौतीपूर्ण6। अपने छोटे व्यास के साथ साथ पुरुष मूत्रमार्ग के स्वाभाविक रूप से घुमावदार एनाटॉमी यह एक कैथेटर के transurethral प्रविष्टि को पूरा करने के लिए तकनीकी रूप से मुश्किल बना । इसलिए, माउस मूत्र पथ के संक्रमण के transurethral प्रेरण के लिए विस्तृत निर्देश6 और LUT शोथ7,8,9,10,11 , 12 , 13 , 14 , 15 के माध्यम से मूत्राशय-डाला कैथेटर पहले महिला चूहों के लिए ही उल्लिखित थे । इस पांडुलिपि वीडियो क्लिप, चित्र, और चित्र सहित पुरुष चूहों में पदार्थों की transurethral जगाकर के लिए तकनीक का एक कदम दर कदम विवरण प्रदान करना है । एक वयस्क पुरुष माउस में Transurethral जगाकर प्रक्रियाओं के समान चर inoculates के साथ किया जा सकता है कि पहले मादा माउस7 में वर्णित है और ऐसे electromyogram रिकॉर्डिंग के रूप में अतिरिक्त तकनीकों के साथ विलय कर दिया visceromotor प्रतिक्रियाएं (VMR)16

Protocol

जानवरों के साथ सभी प्रक्रियाओं, विधि और संज्ञाहरण की अवधि सहित, साथ ही पश्चात देखभाल, एक पशुचिकित्सा के साथ चर्चा की और संस्थागत पशु देखभाल और उपयोग समिति द्वारा अनुमोदित किया गया (IACUC) संबद्ध संस्था । ?…

Representative Results

पीई के माध्यम से नीले रंग की Transurethral जगाकर ५० टयूबिंग मूत्राशय (चित्र 4a) में डाई के जगाकर के परिणामस्वरूप, और पीई 10 एसवी और एपी (चित्रा 4B), क्रमशः के रंगभरण में टयूबिंग के मा?…

Discussion

इस पांडुलिपि विस्तार से वयस्क पुरुष माउस में transurethral जगाकर की एक विधि का वर्णन करता है । अंतर प्राथमिक सीडिंग क्षेत्र अलग व्यास के पीई टयूबिंग का उपयोग करके पहुँचा जा सकता है । पीई-५० को सफलतापूर्वक मूत्र…

Divulgazioni

The authors have nothing to disclose.

Acknowledgements

लेखकों को कोई पावती नहीं है ।

Materials

BD INTRAMEDIC Polyethylene Tubing/ PE 10 BD Medical 63019-004
BD INTRAMEDIC Polyethylene Tubing/ PE 50 BD Medical 63019-048
BD Insyte-N Autoguard/ Angiocath BD Medical 311411
Ethanol (EtOH) Fisher Scientific BP2818500
BD Needle Only 22 Gauge (G) 1 inch Becton Dickson 205155
BD Needle Only 27 Gauge (G) 1/2 inch Becton Dickson 305129
Luer stub, 22 G X 0.5 in / Blunt Needle Instech LS22
Luer stub, 27 G X 0.5 in / Blunt Needle Instech LS27
6" Long x 2" Wide x 1" Thick, Aluminum Oxide Sharpening Stone / Oil Stone Norton 40204034
Surgical Lubricant Sterile Bacteriostatic Folilpac Surgilube 281020543
Isoflurane Fluriso 13985-528-60
SomnoSuite Low-Flow Anesthesia System Kent Scientific SS-01
Dissecting Forceps, Curved vwr 82027-392
BD 1 ml Syringe BD Medical 309626
India Ink Solution., 0.2% in PBS buffer Alfa Aesar J61007
8~12 weeks old male C57B/6 Mice Jackson Lab #000664

Riferimenti

  1. Lee, S., Yang, G., Bushman, W. Prostatic inflammation induces urinary frequency in adult mice. PLoS One. 10 (2), e0116827 (2015).
  2. Wong, L., Hutson, P. R., Bushman, W. Prostatic inflammation induces fibrosis in a mouse model of chronic bacterial infection. PLoS One. 9 (6), e100770 (2014).
  3. Elkahwaji, J. E., Zhong, W., Hopkins, W. J., Bushman, W. Chronic bacterial infection and inflammation incite reactive hyperplasia in a mouse model of chronic prostatitis. Prostate. 67 (1), 14-21 (2007).
  4. Boehm, B. J., Colopy, S. A., Jerde, T. J., Loftus, C. J., Bushman, W. Acute bacterial inflammation of the mouse prostate. Prostate. 72 (3), 307-317 (2012).
  5. Bjorling, D. E., Wang, Z. Y., Bushman, W. Models of inflammation of the lower urinary tract. Neurourol Urodyn. 30 (5), 673-682 (2011).
  6. Thai, K. H., Thathireddy, A., Hsieh, M. H. Transurethral induction of mouse urinary tract infection. J Vis Exp. (42), (2010).
  7. Bjorling, D. E., Wang, Z. Y., Boldon, K., Bushman, W. Bacterial cystitis is accompanied by increased peripheral thermal sensitivity in mice. J Urol. 179 (2), 759-763 (2008).
  8. Hopkins, W. J., Gendron-Fitzpatrick, A., Balish, E., Uehling, D. T. Time course and host responses to Escherichia coli urinary tract infection in genetically distinct mouse strains. Infect Immun. 66 (6), 2798-2802 (1998).
  9. Dinis, P., Charrua, A., Avelino, A., Cruz, F. Intravesical resiniferatoxin decreases spinal c-fos expression and increases bladder volume to reflex micturition in rats with chronic inflamed urinary bladders. BJU Int. 94 (1), 153-157 (2004).
  10. Cayan, S., et al. Botulinum toxin type A may improve bladder function in a rat chemical cystitis model. Urol Res. 30 (6), 399-404 (2003).
  11. Jerde, T. J., Bjorling, D. E., Steinberg, H., Warner, T., Saban, R. Determination of mouse bladder inflammatory response to E. coli lipopolysaccharide. Urol Res. 28 (4), 269-273 (2000).
  12. Saban, M. R., et al. LPS-sensory peptide communication in experimental cystitis. Am J Physiol Renal Physiol. 282 (2), F202-F210 (2002).
  13. Schilling, J. D., Mulvey, M. A., Vincent, C. D., Lorenz, R. G., Hultgren, S. J. Bacterial invasion augments epithelial cytokine responses to Escherichia coli through a lipopolysaccharide-dependent mechanism. J Immunol. 166 (2), 1148-1155 (2001).
  14. Saban, M. R., et al. Discriminators of mouse bladder response to intravesical Bacillus Calmette-Guerin (BCG). BMC Immunol. 8, 6 (2007).
  15. Bjorling, D. E., et al. Acute acrolein-induced cystitis in mice. BJU Int. 99 (6), 1523-1529 (2007).
  16. Sadler, K. E., Stratton, J. M., Kolber, B. J. Urinary bladder distention evoked visceromotor responses as a model for bladder pain in mice. J Vis Exp. (86), (2014).
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Citazione di questo articolo
Lee, S., Carrasco Jr., A., Meacham, R. B., Malykhina, A. P. Transurethral Instillation Procedure in Adult Male Mouse. J. Vis. Exp. (129), e56663, doi:10.3791/56663 (2017).

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