Transuréthrale médicamenteuse chez les souris mâles adultes
Summary
Instillation transuréthrale est une procédure difficile et n’a pas été bien décrite dans la littérature. Le but de ce manuscrit est de décrire une technique pour l’insertion d’un cathéter intravésical livraison de liquides par des substances actives dans la vessie ou la prostate chez les souris mâles adultes transurétrale.
Abstract
Instillation transurétrale peut être utilisée pour offrir des solutions différentes, avec des ingrédients actifs (par exemple, médicaments, produits chimiques, de bactéries et virus) localement dans la vessie à induire des modèles animaux de pathologies de la vessie ou évaluer la efficacité des traitements intravésicale. Plus les modèles de rongeurs du bas appareil urinaire (LUT) pathologies sont induites chez les souris femelles due à la facilité d’instillation intravésicale des substances par l’intermédiaire de l’urètre féminin. Toutefois, en raison de différences anatomiques entre le LUT féminin et masculin, transurethral instillation dans une souris mâle a été considéré comme une procédure très difficile, et il n’a pas été précédemment décrit. Dans ce manuscrit, nous fournir une description détaillée de la façon de préparer les tubes en polyéthylène (PE) pour une insertion ultérieure dans l’urètre d’une souris mâle. En outre, nous analysons le type idéal de tubes PE à utiliser selon le site désiré d’inoculation. En outre, nous décrire point par point comment préparer un animal pour une instillation transuréthrale réussi à éviter toute blessure de l’urètre et assurer la livraison de la solution à l’endroit désiré. La procédure est engagée en rétractant le prépuce et le gland pour exposer l’ouverture du méat urétral. Ensuite, le gland sont saisies par émoussé pinces non-concasser pour stabiliser le pénis et les tubes de PE. Les tubes PE sont d’abord inséré dans le méat urétral parallèle au corps animal, puis son angle est ajusté en inclinant le cathéter pour manœuvrer pour suivre la courbure naturelle de l’urètre. Cette technique peut être utilisée pour les modèles murins induite par des pathologies de la vessie et/ou évaluer l’efficacité du traitement intravésical chez les souris mâles.
Introduction
L’approche de l’instillation transuréthrale a été utilisé dans des études antérieures comme l’une des méthodes pour créer des modèles de rongeurs de la vessie pathologies1,2,3,4 et peut être utilisé pour évaluer la efficacité des traitements localement livrés chez la souris. Bien que les modèles animaux ne peuvent pas entièrement récapituler des pathologies humaines, identification des mécanismes sous-jacents dans les études animales fournit une meilleure compréhension des troubles humains LUT comme le syndrome de douleur de la cystite interstitielle/vessie, neurogène cystite, cystite auto-immune et inflammation bénigne de la prostate5.
La procédure de l’instillation transuréthrale réalisée sur une souris mâle adulte est techniquement plus difficile que l’instillation intravésicale dans une souris femelle adulte6. L’anatomie naturellement courbée de l’urètre masculin ainsi que de son petit diamètre, il est techniquement difficile accomplir la transurethral insertion d’un cathéter. Par conséquent, des instructions détaillées pour l’induction transuréthrale de souris de l’infection des voies urinaires6 et LUT inflammation7,8,9,10,11 , 12 , 13 , 14 , 15 par cathéter inséré à la vessie ont été définis précédemment chez les souris femelles seulement. Ce manuscrit a pour but de fournir une description étape par étape de la technique pour l’instillation transuréthrale de substances chez les souris mâles, y compris les clips vidéo, des images et illustrations. Instillation transuréthrale procédures chez une souris mâle adulte peuvent être effectuées avec la variable inocule semblable à celle précédemment décrite dans la souris femelle7 et fusionné avec des techniques complémentaires telles que des enregistrements d’électromyogramme de viscéromotrice réponses (VMR)16.
Protocol
Representative Results
Discussion
Ce manuscrit a décrit en détail une méthode de transurethral instillation chez les souris mâles adultes. Différentiel principal domaine de semis sont accessibles à l’aide de tubes de PE de différents diamètres. PE-50 est recommandé pour arriver avec succès à la lumière de la vessie, tout en un plus grand diamètre que PE-10 est utilisé pour atteindre l’AP et la SV (Figure 3 a-B). Outre le choix de la taille des tubes PE et organe cible pour l’inoculation, …
Divulgazioni
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
Les auteurs n’ont pas des remerciements.
Materials
| BD INTRAMEDIC Polyethylene Tubing/ PE 10 | BD Medical | 63019-004 | |
| BD INTRAMEDIC Polyethylene Tubing/ PE 50 | BD Medical | 63019-048 | |
| BD Insyte-N Autoguard/ Angiocath | BD Medical | 311411 | |
| Ethanol (EtOH) | Fisher Scientific | BP2818500 | |
| BD Needle Only 22 Gauge (G) 1 inch | Becton Dickson | 205155 | |
| BD Needle Only 27 Gauge (G) 1/2 inch | Becton Dickson | 305129 | |
| Luer stub, 22 G X 0.5 in / Blunt Needle | Instech | LS22 | |
| Luer stub, 27 G X 0.5 in / Blunt Needle | Instech | LS27 | |
| 6" Long x 2" Wide x 1" Thick, Aluminum Oxide Sharpening Stone / Oil Stone | Norton | 40204034 | |
| Surgical Lubricant Sterile Bacteriostatic Folilpac | Surgilube | 281020543 | |
| Isoflurane | Fluriso | 13985-528-60 | |
| SomnoSuite Low-Flow Anesthesia System | Kent Scientific | SS-01 | |
| Dissecting Forceps, Curved | vwr | 82027-392 | |
| BD 1 ml Syringe | BD Medical | 309626 | |
| India Ink Solution., 0.2% in PBS buffer | Alfa Aesar | J61007 | |
| 8~12 weeks old male C57B/6 Mice | Jackson Lab | #000664 |
Riferimenti
- Lee, S., Yang, G., Bushman, W. Prostatic inflammation induces urinary frequency in adult mice. PLoS One. 10 (2), e0116827 (2015).
- Wong, L., Hutson, P. R., Bushman, W. Prostatic inflammation induces fibrosis in a mouse model of chronic bacterial infection. PLoS One. 9 (6), e100770 (2014).
- Elkahwaji, J. E., Zhong, W., Hopkins, W. J., Bushman, W. Chronic bacterial infection and inflammation incite reactive hyperplasia in a mouse model of chronic prostatitis. Prostate. 67 (1), 14-21 (2007).
- Boehm, B. J., Colopy, S. A., Jerde, T. J., Loftus, C. J., Bushman, W. Acute bacterial inflammation of the mouse prostate. Prostate. 72 (3), 307-317 (2012).
- Bjorling, D. E., Wang, Z. Y., Bushman, W. Models of inflammation of the lower urinary tract. Neurourol Urodyn. 30 (5), 673-682 (2011).
- Thai, K. H., Thathireddy, A., Hsieh, M. H. Transurethral induction of mouse urinary tract infection. J Vis Exp. (42), (2010).
- Bjorling, D. E., Wang, Z. Y., Boldon, K., Bushman, W. Bacterial cystitis is accompanied by increased peripheral thermal sensitivity in mice. J Urol. 179 (2), 759-763 (2008).
- Hopkins, W. J., Gendron-Fitzpatrick, A., Balish, E., Uehling, D. T. Time course and host responses to Escherichia coli urinary tract infection in genetically distinct mouse strains. Infect Immun. 66 (6), 2798-2802 (1998).
- Dinis, P., Charrua, A., Avelino, A., Cruz, F. Intravesical resiniferatoxin decreases spinal c-fos expression and increases bladder volume to reflex micturition in rats with chronic inflamed urinary bladders. BJU Int. 94 (1), 153-157 (2004).
- Cayan, S., et al. Botulinum toxin type A may improve bladder function in a rat chemical cystitis model. Urol Res. 30 (6), 399-404 (2003).
- Jerde, T. J., Bjorling, D. E., Steinberg, H., Warner, T., Saban, R. Determination of mouse bladder inflammatory response to E. coli lipopolysaccharide. Urol Res. 28 (4), 269-273 (2000).
- Saban, M. R., et al. LPS-sensory peptide communication in experimental cystitis. Am J Physiol Renal Physiol. 282 (2), F202-F210 (2002).
- Schilling, J. D., Mulvey, M. A., Vincent, C. D., Lorenz, R. G., Hultgren, S. J. Bacterial invasion augments epithelial cytokine responses to Escherichia coli through a lipopolysaccharide-dependent mechanism. J Immunol. 166 (2), 1148-1155 (2001).
- Saban, M. R., et al. Discriminators of mouse bladder response to intravesical Bacillus Calmette-Guerin (BCG). BMC Immunol. 8, 6 (2007).
- Bjorling, D. E., et al. Acute acrolein-induced cystitis in mice. BJU Int. 99 (6), 1523-1529 (2007).
- Sadler, K. E., Stratton, J. M., Kolber, B. J. Urinary bladder distention evoked visceromotor responses as a model for bladder pain in mice. J Vis Exp. (86), (2014).
