Burada, fare arkalığındaki kan akışını ölçmek için Lazer Doppler perfüzyon görüntüleme tekniğini ve gerekli kontrolleri gösteren bir protokol sunuyoruz.
Kan akışı iyileşmesi deneysel hindlimb iskemi veya iskemi-reperfüzyondan sonra kritik bir sonuç ölçüsüdür. Lazer Doppler perfüzyon görüntüleme (LDPI), kan akışı iyileşmesini değerlendirmek için yaygın, noninvaziv, tekrarlanabilir bir yöntemdir. Teknik, örneklenen dokudaki genel kan akışını, bir lazerin hareketli kırmızı kan hücrelerine çarpması sonucu ortaya çıkan frekanstaki Doppler kaymasından hesaplar. Ölçümler rastgele perfüzyon üniteleri ile ifade edilir, bu nedenle bacak üzerinde müdahale edilmeyen kontrallateral genellikle ölçümleri kontrol etmeye yardımcı olmak için kullanılır. Ölçüm derinliği 0,3-1 mm aralığındadır; hindlimb iskemi için bu, dermal perfüzyonin değerlendirildiği anlamına gelir. Dermal perfüzyon çeşitli faktörlere bağlıdır – en önemlisi cilt sıcaklığı ve anestezik ajan, güvenilir okumalarla sonuçlanacak şekilde dikkatlice kontrol edilmelidir. Ayrıca, saç ve cilt pigmentasyonu lazerin dermis’e ulaşma veya nüfuz etme yeteneğini değiştirebilir. Bu makalede, fare arkalığındaki LDPI tekniği göstermektedir.
Yetersiz yara iyileşmesi ile cilt ülserasyon, insan hastalarda amputasyonların önde gelen bir nedenidir1. Yeterli yara iyileşmesi, periferik arteriyel hastalığı olan hastalarda tehlikeye giren sağlam cildi korumak için gerekenden daha yüksek arteriyel perfüzyon gerektirir2,3,4. Diğer birkaç romatolojik durum ve diyabet de yaraları iyileştirmek için rahatsız ve yetersiz cilt mikroserkülasyonuna yol açabilir5,6. Birçok diyabetik hastada eşlik eden periferik arteriyel hastalık vardır ve bu da onları özellikle amputasyon riskiyle karşı karşıya bırakarak. Lazer Doppler perfüzyon görüntüleme (LDPI), klinik durumlarda cilt mikrosirkülasyonunu değerlendirmek için ve deneysel hindlimb iskemi, iskemi-reperfüzyon ve mikrocerrahi kapaklar7’densonra kan akışını ve kan akışı iyileşmesini değerlendirmek için araştırma durumlarında kullanılır.
LDPI sistemi, ilgi çekici bir bölge üzerinde hareket etmek için bir tarama aynası tarafından saptırılan düşük güçlü bir lazer ışını yansıtır. Bu, akış dektiyometrisiprobu 8ile doğrudan temas halinde olan küçük doku alanı için perfüzyon ölçümü sağlayan Lazer Doppler akış debimetrisinden farklıdır. Lazer ışını mikrovaskültürdeki hareketli kanla etkileşime girdiğinde, tarayıcı tarafından foto algılanan ve rastgele perfüzyon ünitelerine dönüştürülen bir Doppler frekans değişimine uğrar. LDPI ışık tabanlı bir teknik olduğundan, penetrasyon derinliği açısından 0,3-1 mm ile sınırlıdır, yani çoğunlukla dermal perfüzyon7. Dermal akış cilt sıcaklığı ve çeşitli anestezik ajanlardan etkilenebilecek sempatik sinir sistemi ile değiştirilebilir9. Optik lazerden yapılan ölçümler de ortam aydınlatma koşullarından, cilt pigmentasyonundan etkilenir ve aşırı kürk veya saç7ile engellenebilir.
LDPI, iskemi sonrası perfüzyon iyileşmesini izlemek için en sık kullanılan araştırma tekniğidir, çünkü invaziv değildir, kontrast yönetimi gerektirmez ve birden fazla hayvanda veri toplanmasına izin vermek için hızlı tarama sürelerine sahiptir. Bu, terapötik arteriogenez veya anjiogenez amaçlayan tedavilerin küçük hayvan modellerinde etkili olup olmadığını belirlemeye yardımcı olmak için idealdir. LDPI ile ölçülen hindlimb iskemi sonrası kan akışıiyileşmesi,Microfil döküm veya mikro-CT10, 11gibi diğer yollarla değerlendirildiğinde kollateral arter gelişimi ile iyiilişkilidir. Bu protokolün amacı, LDPI kullanılarak hindlimb perfüzyonunun değerlendirilmesini göstermektir.
LDPI ile güvenilir sonuçlar elde etmek için tutarlı teknik kritik öneme sahiptir. Tüm zaman dilimi boyunca aynı anestezi, sıcaklık ayarları, fare konumu ve ilgi alanı kullanılmalıdır. Farklı anestezik ajanlar daha yüksek veya daha düşük perfüzyon değerlerine neden olur9. Isofluran anestezisi, hızlı başlaması ve ortaya çıkmasının yanı sıra genel güvenliği nedeniyle uygundur. Bu vazodilatör ajan ile anestezi derinliği olarak tutarlı bir izofluran yüzdesi deri per…
The authors have nothing to disclose.
Bu çalışma VA Puget Ses Sağlık Merkezi’ndeki tesis ve kaynakların kullanımı ile gerçekleştirilmiştir. Çalışma yazarın eseridir ve Gazi İşleri Bakanlığı’nın veya Abd hükümetinin konumunu veya politikasını yansıtmak zorunda değildir. Dr Tang şu anda VA (Merit 5 I01 BX004975-02) aracılığıyla finanse ediliyor.
Black nonreflective material | Fabric store, black neoprene recommended by company | ||
F/air cannister | A.M. Bickford Inc | 80120 | |
Homeothermic blanket with rigid metal probe | Harvard Apparatus | Also comes with flexible probe, but this is less durable | |
Isoflurane Anesthesia machine | Drager | Multiple manufacturers | |
Isoflurane induction chamber | VetEquip | 941444 | 2 L chamber |
Moor laser Doppler perfusion imager | Moor Instruments | MoorLDI2-IR | Higher resolution imager (MoorLDI2-HIR) |
Mouse Anesthesia nose cone | Multiple manufacturers | ||
Nair | Nair | ||
Oxygen tank | Multiple manufacturers | ||
Surgilube | Multiple distributors |