هنا ، نقدم بروتوكولا يوضح التقنية والضوابط اللازمة لتصوير التشوه بالليزر Doppler لقياس تدفق الدم في الجزء الخلفي من الماوس.
انتعاش تدفق الدم هو مقياس النتيجة الحاسمة بعد نقص التروية الخلفية التجريبية أو نقص التروية. الليزر دوبلر التصوير التشوه (LDPI) هو شائع، غير باضع، طريقة متكررة لتقييم استعادة تدفق الدم. تقوم هذه التقنية بحساب تدفق الدم بشكل عام في الأنسجة التي تم أخذ عينات منها من تحول دوبلر في التردد الذي يحدث عندما يضرب الليزر خلايا الدم الحمراء المتحركة. يتم التعبير عن القياسات في وحدات التشويش التعسفي ، لذلك عادة ما يتم استخدام عدم التدخل في الساق للمساعدة في التحكم في القياسات. عمق القياس في نطاق 0.3-1 مم؛ لإقفارية الأطراف الخلفية ، وهذا يعني أن يتم تقييم التشوه الجلدي. يعتمد التشوه الجلدي على عدة عوامل – أهمها درجة حرارة الجلد وعامل التخدير ، والتي يجب التحكم فيها بعناية لتؤدي إلى قراءات موثوقة. علاوة على ذلك ، يمكن أن يغير تصبغ الشعر والجلد قدرة الليزر على الوصول إلى الأدمة أو اختراقها. توضح هذه المقالة تقنية LDPI في الجانب الخلفي الماوس.
تقرح الجلد مع عدم كفاية التئام الجروح هو السبب الرئيسي لعمليات البتر في المرضى الإنسان1. يتطلب التئام الجروح الكافي مستويات أعلى من التشوه الشرياني مما هو مطلوب للحفاظ على الجلد السليم ، والذي يتعرض للخطر في المرضى الذين يعانون من مرض الشريان المحيطي2،3،4. العديد من الحالات الروماتويدية الأخرى ومرض السكري يمكن أن يؤدي أيضا إلى اضطراب وعدم كفاية دوران الأوعية الدقيقة الجلد لتضميد الجروح5،6. يعاني العديد من مرضى السكري من مرض الشريان المحيطي المصاحب، مما يعرضهم لخطر كبير بشكل خاص للبتر. الليزر دوبلر تصوير التخثر (LDPI) يستخدم في الحالات السريرية لتقييم دوران الأوعية الدقيقة الجلد، وكذلك في حالات البحوث لتقييم تدفق الدم وانتعاش تدفق الدم بعد نقص التروية الخلفية التجريبية، نقص التروية- reperfusion، واللوحات الجراحية الدقيقة7.
يعرض نظام LDPI شعاع ليزر منخفض الطاقة ينحرف بواسطة مرآة المسح الضوئي للتحرك فوق منطقة الاهتمام. وهذا يختلف عن قياس التدفق ليزر دوبلر، الذي يوفر قياس التغلغل لمنطقة صغيرة من الأنسجة في اتصال مباشر مع مسبار قياس التدفق8. عندما يتفاعل شعاع الليزر مع الدم المتحرك في الأوعية الدقيقة ، فإنه يخضع لتحول تردد دوبلر ، والذي يتم مسحه ضوئيا بواسطة الماسح الضوئي وتحويله إلى وحدات تغلغل تعسفية. لأن LDPI هو تقنية خفيفة ، فهي محدودة من حيث عمق الاختراق إلى 0.3-1 مم ، مما يعني أنه بالنسبة للجزء الأكبر يتم تقييم التشويش الجلدي7. يمكن تغيير تدفق الجلد عن طريق درجة حرارة الجلد والجهاز العصبي المتعاطف ، والتي قد تتأثر بعوامل مخدرة مختلفة9. تتأثر القياسات من الليزر البصري أيضا بظروف الإضاءة المحيطة وتصبغ الجلد ، ويمكن حظرها عن طريق الفراء أو الشعرالزائد 7.
LDPI هي تقنية البحث الأكثر استخداما لمراقبة التعافي من التشوه بعد نقص التروية لأنها غير باضعة ، ولا تتطلب إدارة التباين ، ولها أوقات مسح سريعة تسمح بجمع البيانات عن متعددة. وهذا يجعل من المثالي للمساعدة في تحديد ما إذا كانت العلاجات التي تهدف إلى تكوين الشرايين العلاجية أو تولد الأوعية فعالة في النماذج الحيوانية الصغيرة. انتعاش تدفق الدم بعد نقص التروية الخلفية كما تقاس LDPI يرتبط بشكل جيد مع تطور الشريان الجانبية عند تقييمها بوسائل أخرى مثل الصب Microfil أو الصغرى CT10،11. والهدف من هذا البروتوكول هو إظهار تقييم التغلغل في الأطراف الخلفية باستخدام LDPI.
تقنية متناسقة أمر بالغ الأهمية للحصول على نتائج موثوق بها مع LDPI. يجب استخدام نفس التخدير وإعدادات درجة الحرارة وموقع الماوس ومنطقة الاهتمام طوال الدورة الزمنية بأكملها. عوامل مخدرة مختلفة سوف يؤدي إلى قيم التغلغل أعلى أو أقل9. التخدير Isoflurane مريحة بسبب ظهورها السريع والظهور، ?…
The authors have nothing to disclose.
وقد تم تنفيذ هذا العمل باستخدام المرافق والموارد في مركز الرعاية الصحية VA Puget Sound. والعمل هو عمل المؤلف ولا يعكس بالضرورة موقف أو سياسة وزارة شؤون المحاربين القدماء أو حكومة الولايات المتحدة. يتم تمويل الدكتور تانغ حاليا عن طريق VA (الجدارة 5 I01 BX004975-02).
Black nonreflective material | Fabric store, black neoprene recommended by company | ||
F/air cannister | A.M. Bickford Inc | 80120 | |
Homeothermic blanket with rigid metal probe | Harvard Apparatus | Also comes with flexible probe, but this is less durable | |
Isoflurane Anesthesia machine | Drager | Multiple manufacturers | |
Isoflurane induction chamber | VetEquip | 941444 | 2 L chamber |
Moor laser Doppler perfusion imager | Moor Instruments | MoorLDI2-IR | Higher resolution imager (MoorLDI2-HIR) |
Mouse Anesthesia nose cone | Multiple manufacturers | ||
Nair | Nair | ||
Oxygen tank | Multiple manufacturers | ||
Surgilube | Multiple distributors |