Summary

Usando Espalhamento Múltiplo de Luz para Examinar a Estabilidade de Extratos de Phyllanthus emblica L. Obtidos com Diferentes Métodos de Extração

Published: April 14, 2023
doi:

Summary

Aqui, apresentamos um método de avaliação da estabilidade baseado na tecnologia de espalhamento múltiplo de luz para avaliar a estabilidade de extratos da medicina tradicional chinesa.

Abstract

O intermediário de extração da medicina tradicional chinesa é o intermediário chave no processo de preparação, e sua estabilidade tem um impacto importante na eficácia e qualidade do produto final. No entanto, os métodos de avaliação de estabilidade existentes são frequentemente demorados e trabalhosos, exigindo observação de longo prazo e a operação de equipamentos complexos (como cromatografia líquida de alta eficiência), e é difícil obter mais informações físicas sobre a instabilidade do sistema. Portanto, há uma necessidade urgente de estabelecer uma tecnologia de análise de estabilidade rápida e precisa para a medicina tradicional chinesa. O espalhamento múltiplo de luz é um método analítico de ponta que pode avaliar com precisão e rapidez a estabilidade de medicamentos tradicionais chineses de uma maneira ambientalmente amigável sem alterar a natureza ou o estado da amostra ou usar reagentes orgânicos.

Neste trabalho, usando dados precisos de varredura de espalhamento múltiplo de luz, o presente protocolo adquiriu rapidamente as curvas de variação para espessura de camada, velocidade de migração de partículas e tamanho médio de partícula ao longo do tempo. Isso permitiu a identificação precisa do mecanismo e das características cruciais que causam a instabilidade do sistema em seus estágios iniciais. É importante ressaltar que o período de pesquisa para o processo de extração pode ser consideravelmente encurtado pela quantificação detalhada da estabilidade do sistema, o que também permite uma análise rápida, precisa e aprofundada dos efeitos de vários processos de extração na estabilidade de Phyllanthus emblica L.

Introduction

Na fabricação da medicina tradicional chinesa (MTC), a estabilidade dos intermediários de extração de MTC e preparações líquidas relacionadas sempre foi o foco da inspeção1. A eficácia clínica dos medicamentos, especialmente com polifenóis como princípio ativo primário, sofre devido a problemas significativos de estabilidade 2,3. Sanajon líquido oral e Nuodikang líquido oral são exemplos de casos típicos desta questão4. Portanto, é crucial aprender a usar ferramentas eficientes para avaliar e otimizar de forma rápida e precisa a estabilidade de intermediários líquidos no processo de produção de MTC. Acredita-se que Phyllanthus emblica L. (PE), uma planta medicinal amplamente difundida no Sudeste Asiático, tenha boas propriedades antioxidantes5, bem como ações anti-inflamatórias6, antibacterianas7 e antitumorais8. Durante o procedimento de extração térmica, os taninos em PE transformam-se violentamente9. Sob catálise com altas temperaturas, esses taninos hidrolisam-se rapidamente para produzir moléculas como o ácido gálico e o ácido elágico, que levam à instabilidade ou precipitação devido à sua baixa solubilidade1. Os métodos atuais para avaliar a estabilidade da MTC, como testes acelerados ou centrifugação, são geralmente complicados 4, o que limita o desenvolvimento de processos de preparaçãopertinentes.

Com base no princípio do espalhamento múltiplo de luz (MLS), estabelecemos um método rápido de avaliação da estabilidade de extratos de PFE e analisamos o mecanismo de instabilidade. MLS é um método de medição baseado na varredura de fontes de luz infravermelha próxima. Qualquer mudança no sistema de solução resulta em uma mudança na intensidade da luz. A luz incidente é espalhada quando é absorvida ou penetrada pelas partículas da amostra. O sistema registra o sinal luminoso de transmissão quando ele passa pela amostra; Se a transmitância da luz da amostra for fraca, o sistema regista o sinal luminoso de retroespalhamento. Em comparação com a observação visual, isso pode economizar muito tempo1 e pode analisar o fenômeno de instabilidade de forma rápida e precisa em detalhes, fornecendo assim informações mais úteis para orientar a otimização do processo de extração.

Protocol

1. Preparação do extrato Pese com precisão uma quantidade adequada de PE e adicione 10x (peso) de água deionizada para extração de refluxo. Colocar cinco amostras para extração do refluxo por 0 h (E1), 0,5 h (E2), 1 h (E3), 1,5 h (E4) e 2 h (E5) após a pesagem. Após a extração, resfriar as amostras à temperatura ambiente e pesar para compensar o peso perdido para garantir a consistência com os pesos pré-extração. Centrifugar as amostras a 8.581 × …

Representative Results

A Figura 1 mostra o princípio da medida da luz múltipla e o significado dos resultados coletados. Nos resultados dos espectros de MLS (Figura 2), a abscissa foi a altura da célula da amostra, e a ordenada foi a intensidade de transmissão (T%) e retroespalhamento (BS%). Através do cálculo dos resultados dos espectros MLS, o sistema pode obter as mudanças nos principais parâmetros físicos da amostra durante o período de medição, inclu…

Discussion

A avaliação rápida e precisa da estabilidade da MTC sempre foi um foco da pesquisa da MTC. Para fornecer mais informações úteis para direcionar a melhoria do processo de extração, este estudo analisou os mecanismos de estabilidade e instabilidade de uma amostra usando uma tecnologia não destrutiva no infravermelho próximo.

Nesse protocolo, os parâmetros importantes de estabilidade são calculados com base em dados precisos da varredura da MLS. Os exames de MLS podem coletar a transm…

Divulgazioni

The authors have nothing to disclose.

Acknowledgements

Este estudo foi financiado por subsídios da Fundação Nacional de Ciências Naturais da China (81973493); Equipe Nacional Interdisciplinar de Inovação da Medicina Tradicional Chinesa (ZYYCXTD-D-202209); Sanajon Pharmaceutical Group Chengdu University of TCM produção, estudo e Projeto de Laboratório Conjunto de Pesquisa (2019-YF04-00086-JH); e Projeto Financiado pelo Plano de Ciência e Tecnologia da Província de Sichuan (2021YFN0100). Os autores agradecem ao Instituto Inovador de Medicina Chinesa e Farmácia da Universidade de Chengdu da MTC por seu apoio técnico no trabalho de espectrometria de massa.

Materials

Adjustable electric heating jacket Beijing Kewei Yongxing Instrument Co., Ltd MH-1000  www.keweiyq.com
Analytical balance(1/10000) Sartorious, Germany BSA224S  www.sartorius.com.cn
CNC ultrasonic instrument Kunshan Ultrasonic Instrument Co., Ltd KQ-500DE www.ks-csyq.com
GL-16 high-speed centrifuge  Sichuan Shuke Instrument Co., Ltd 18091403 www.sklxj.com
Phyllanthus emblica L. Hehuachi medicinal materials market  YJL2004 Produced in Yunnan
Turbisoft Lab multiple light scattering instrument French Formulaction Company Turbisoft Lab 2.3.1.125 Fanalyser 1.3.5 www.formulaction.com
UPR-II-5T ultra-pure water device Sichuan ULUPURE  Ultrapure Technology Co., Ltd Z16030559 www.ccdup.com

Riferimenti

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  2. Ran, F., et al. High or low temperature extraction, which is more conducive to Triphala against chronic pharyngitis. Biomedicine and Pharmacotherapy. 140, 111787 (2021).
  3. Wei, X., et al. Hepatoprotective effects of different extracts from Triphala against CCl(4)-induced acute liver injury in mice. Frontiers in Pharmacology. 12, 664607 (2021).
  4. Huang, H. Z., et al. Study on the stability control strategy of Triphala solution based on the balance of physical stability and chemical stabilities. Journal of Pharmaceutical and Biomedical Analysis. 158, 247-256 (2018).
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Citazione di questo articolo
Huang, H., Li, M., Luo, C., Fan, S., Mo, T., Han, L., Zhang, D., Lin, J. Using Multiple Light Scattering to Examine the Stability of Phyllanthus emblica L. Extracts Obtained with Different Extraction Methods. J. Vis. Exp. (194), e65130, doi:10.3791/65130 (2023).

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