Summary

Verwendung von Mehrfachlichtstreuung zur Untersuchung der Stabilität von Phyllanthus emblica L. Extrakte, die mit verschiedenen Extraktionsmethoden gewonnen wurden

Published: April 14, 2023
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Summary

Hier stellen wir eine Stabilitätsbewertungsmethode vor, die auf der Mehrfachlichtstreuungstechnologie basiert, um die Stabilität von Extrakten aus der Traditionellen Chinesischen Medizin zu bewerten.

Abstract

Das Extraktionsintermediat der Traditionellen Chinesischen Medizin ist das wichtigste Zwischenprodukt im Zubereitungsprozess, und seine Stabilität hat einen wichtigen Einfluss auf die Wirksamkeit und Qualität des Endprodukts. Bestehende Methoden zur Bewertung der Stabilität sind jedoch oft zeit- und arbeitsintensiv, erfordern eine Langzeitbeobachtung und den Betrieb komplexer Geräte (z. B. Hochleistungsflüssigkeitschromatographie), und es ist schwierig, mehr physikalische Informationen über die Instabilität des Systems zu erhalten. Daher ist es dringend notwendig, eine schnelle und genaue Stabilitätsanalysetechnologie für die Traditionelle Chinesische Medizin zu etablieren. Die Mehrfachlichtstreuung ist eine hochmoderne Analysemethode, mit der die Stabilität traditioneller chinesischer Arzneimittel auf umweltfreundliche Weise genau und schnell bewertet werden kann, ohne die Art oder den Zustand der Probe zu verändern oder organische Reagenzien zu verwenden.

In dieser Arbeit konnte das vorliegende Protokoll unter Verwendung der präzisen Scandaten der Mehrfachlichtstreuung schnell die Variationskurven für die Schichtdicke, die Partikelmigrationsgeschwindigkeit und die durchschnittliche Partikelgröße über die Zeit erfassen. Dies ermöglichte die genaue Identifizierung des Mechanismus und der entscheidenden Merkmale, die die Instabilität des Systems in seinen frühen Stadien verursachen. Bemerkenswert ist, dass der Untersuchungszeitraum für den Extraktionsprozess durch die detaillierte Quantifizierung der Systemstabilität erheblich verkürzt werden kann, was auch eine schnelle, genaue und tiefgehende Analyse der Auswirkungen verschiedener Extraktionsprozesse auf die Stabilität von Phyllanthus emblica L ermöglicht.

Introduction

Bei der Herstellung der Traditionellen Chinesischen Medizin (TCM) steht seit jeher die Stabilität der TCM-Extraktionsintermediate und verwandter flüssiger Zubereitungen im Fokus der Inspektion1. Die klinische Wirksamkeit von Arzneimitteln, insbesondere mit Polyphenolen als primärem Wirkstoff, leidet unter erheblichen Stabilitätsproblemen 2,3. Sanajon Flüssigkeit zum Einnehmen und Nuodikang Flüssigkeit zum Einnehmen sind Beispiele für typische Fälle dieser Ausgabe4. Daher ist es wichtig zu lernen, wie man effiziente Werkzeuge einsetzt, um die Stabilität von flüssigen Zwischenprodukten im TCM-Produktionsprozess schnell und genau zu bewerten und zu optimieren. Phyllanthus emblica L. (PE), eine in Südostasien weit verbreitete Heilpflanze, wird angenommen, dass sie gute antioxidative Eigenschaften5 sowie entzündungshemmende6, antibakterielle7 und antitumorale Wirkungen8 hat. Während des thermischen Extraktionsverfahrens wandeln sich die Tannine in PE heftig um9. Bei der Katalyse mit hohen Temperaturen hydrolysieren diese Tannine schnell zu Molekülen wie Gallussäure und Ellagsäure, die aufgrund ihrer schlechten Löslichkeit zu Instabilität oder Ausfällung führen1. Aktuelle Methoden zur Bewertung der TCM-Stabilität, wie z.B. beschleunigte Tests oder Zentrifugation, sind in der Regel umständlich4, was die Weiterentwicklung entsprechender Präparationsprozesse einschränkt.

Basierend auf dem Prinzip der Mehrfachlichtstreuung (MLS) haben wir eine schnelle Stabilitätsbewertungsmethode für PEF-Extrakte etabliert und den Instabilitätsmechanismus analysiert. MLS ist ein Messverfahren, das auf der Abtastung von Nahinfrarot-Lichtquellen basiert. Jeder Wechsel des Lösungssystems führt zu einer Änderung der Lichtintensität. Das einfallende Licht wird gestreut, wenn es von den Partikeln der Probe absorbiert oder durchdrungen wird. Das System zeichnet das Sendelichtsignal auf, wenn es die Probe durchläuft. Ist die Lichtdurchlässigkeit der Probe schlecht, zeichnet das System das rückstreuende Lichtsignal auf. Im Vergleich zur visuellen Beobachtung kann dies viel Zeit sparen1 und kann das Instabilitätsphänomen schnell und genau im Detail analysiert werden, wodurch nützlichere Informationen für die Optimierung des Extraktionsprozesses bereitgestellt werden.

Protocol

1. Zubereitung des Extrakts Wiegen Sie eine angemessene Menge PE genau ab und fügen Sie 10x (Gewicht) deionisiertes Wasser für die Rückflussextraktion hinzu. Fünf Proben für die Rückflussextraktion für 0 h (E1), 0,5 h (E2), 1 h (E3), 1,5 h (E4) und 2 h (E5) nach dem Wiegen einstellen. Kühlen Sie die Proben nach der Extraktion auf Raumtemperatur ab und wiegen Sie, um das verlorene Gewicht auszugleichen und die Konsistenz mit den Gewichten vor der Extraktion zu gewähr…

Representative Results

Abbildung 1 zeigt das Prinzip der Mehrfachlichtmessung und die Bedeutung der gesammelten Ergebnisse. In den MLS-Spektrenergebnissen (Abbildung 2) war die Abszisse die Höhe der Probenzelle, und die Ordinate war die Intensität der Transmission (T%) und Rückstreuung (BS%). Durch die Berechnung der MLS-Spektrenergebnisse kann das System die Änderungen der wichtigsten physikalischen Parameter der Probe während des Messzeitraums ermitteln, einsc…

Discussion

Die schnelle und genaue Beurteilung der TCM-Stabilität ist seit jeher ein Schwerpunkt der TCM-Forschung. Um weitere nützliche Informationen für die Verbesserung des Extraktionsprozesses zu erhalten, analysierte diese Studie die Stabilitäts- und Instabilitätsmechanismen einer Probe mit einer zerstörungsfreien Nahinfrarot-Technologie.

In diesem Protokoll werden die wichtigen Stabilitätsparameter auf der Grundlage genauer MLS-Scandaten berechnet. MLS-Scans können die Transmission (T</…

Divulgazioni

The authors have nothing to disclose.

Acknowledgements

Diese Studie wurde durch Zuschüsse der National Natural Science Foundation of China (81973493) unterstützt; Nationales interdisziplinäres Innovationsteam für Traditionelle Chinesische Medizin (ZYYCXTD-D-202209); Gemeinsames Laborprojekt der Sanajon Pharmaceutical Group der Chengdu University of TCM (2019-YF04-00086-JH); und das vom Wissenschafts- und Technologieplan der Provinz Sichuan finanzierte Projekt (2021YFN0100). Die Autoren danken dem Innovativen Institut für Chinesische Medizin und Pharmazie der TCM-Universität Chengdu für die technische Unterstützung bei der Massenspektrometrie.

Materials

Adjustable electric heating jacket Beijing Kewei Yongxing Instrument Co., Ltd MH-1000  www.keweiyq.com
Analytical balance(1/10000) Sartorious, Germany BSA224S  www.sartorius.com.cn
CNC ultrasonic instrument Kunshan Ultrasonic Instrument Co., Ltd KQ-500DE www.ks-csyq.com
GL-16 high-speed centrifuge  Sichuan Shuke Instrument Co., Ltd 18091403 www.sklxj.com
Phyllanthus emblica L. Hehuachi medicinal materials market  YJL2004 Produced in Yunnan
Turbisoft Lab multiple light scattering instrument French Formulaction Company Turbisoft Lab 2.3.1.125 Fanalyser 1.3.5 www.formulaction.com
UPR-II-5T ultra-pure water device Sichuan ULUPURE  Ultrapure Technology Co., Ltd Z16030559 www.ccdup.com

Riferimenti

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  2. Ran, F., et al. High or low temperature extraction, which is more conducive to Triphala against chronic pharyngitis. Biomedicine and Pharmacotherapy. 140, 111787 (2021).
  3. Wei, X., et al. Hepatoprotective effects of different extracts from Triphala against CCl(4)-induced acute liver injury in mice. Frontiers in Pharmacology. 12, 664607 (2021).
  4. Huang, H. Z., et al. Study on the stability control strategy of Triphala solution based on the balance of physical stability and chemical stabilities. Journal of Pharmaceutical and Biomedical Analysis. 158, 247-256 (2018).
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Citazione di questo articolo
Huang, H., Li, M., Luo, C., Fan, S., Mo, T., Han, L., Zhang, D., Lin, J. Using Multiple Light Scattering to Examine the Stability of Phyllanthus emblica L. Extracts Obtained with Different Extraction Methods. J. Vis. Exp. (194), e65130, doi:10.3791/65130 (2023).

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