Este protocolo apresenta o estabelecimento e a confirmação de um modelo de sobrecarga de volume (VO) do ventrículo direito pós-natal em camundongos com fístula arteriovenosa (FAV) abdominal, que pode ser aplicado para investigar como a VO contribui para o desenvolvimento cardíaco pós-natal.
A sobrecarga de volume (VO) do ventrículo direito (VD) é comum em crianças com cardiopatia congênita. Tendo em vista os distintos estágios de desenvolvimento, o miocárdio do VD pode responder diferentemente à VO em crianças em comparação com adultos. O presente estudo tem como objetivo estabelecer um modelo de VO do VD pós-natal em camundongos utilizando uma fístula arteriovenosa abdominal modificada. Para confirmar a confecção da VO e as seguintes alterações morfológicas e hemodinâmicas do VD, foram realizadas ultrassonografia abdominal, ecocardiograma e coloração histoquímica durante 3 meses. Como resultado, o procedimento em camundongos pós-natais mostrou uma taxa aceitável de sobrevivência e sucesso da fístula. Em camundongos VO, a cavidade do VD foi aumentada com uma parede livre espessada, e o volume sistólico foi aumentado em cerca de 30%-40% dentro de 2 meses após a cirurgia. A partir daí, a pressão sistólica do VD aumentou, observou-se regurgitação valvar pulmonar correspondente e surgiu pequeno remodelamento da artéria pulmonar. Em conclusão, a cirurgia de fístula arteriovenosa (FAV) modificada é viável para estabelecer o modelo de VO do VD em camundongos pós-natais. Considerando a probabilidade de fechamento da fístula e elevação da resistência da artéria pulmonar, a ultrassonografia abdominal e o ecocardiograma devem ser realizados para confirmar o status do modelo antes da aplicação.
A sobrecarga de volume (VO) do ventrículo direito (VD) é comum em crianças com cardiopatia congênita (CC), o que leva a remodelamento miocárdico patológico e mau prognóstico em longo prazo 1,2,3. Uma compreensão profunda do remodelamento do VR e das intervenções direcionadas precoces relacionadas é essencial para um bom desfecho em crianças com CC. Existem várias diferenças nas estruturas moleculares, funções fisiológicas e respostas a estímulos no coração de adultos e crianças 1,4,5,6. Por exemplo, sob a influência da sobrecarga pressórica, a proliferação de cardiomiócitos é a principal resposta em corações neonatais, enquanto a fibrose ocorre em corações adultos 5,6. Além disso, muitas drogas eficazes no tratamento da insuficiência cardíaca em adultos não têm efeito terapêutico sobre a insuficiência cardíaca em crianças, podendo até causar danos adicionais 7,8. Por conseguinte, as conclusões retiradas de animais adultos não podem ser aplicadas directamente a animais jovens.
O modelo de fístula arteriovenosa (FAV) tem sido utilizado para induzir VO cardíaco crônico e disfunção cardíaca correspondente há décadas em animais adultos de diferentes espécies9,10,11,12,13. No entanto, pouco se sabe sobre o modelo em camundongos pós-natais. Em nossos estudos anteriores, um modelo de VO pós-natal em camundongos foi gerado com sucesso pela criação de uma FAV abdominal. A alteração do trajeto do desenvolvimento do VD no coração pós-natal também foi demonstrada14,15,16,17.
Para explorar o processo cirúrgico modificado subjacente e as características do presente modelo, um protocolo detalhado é apresentado; O modelo é avaliado por 3 meses neste estudo.
Anteriormente, o modelo clássico VO do VD foi criado utilizando regurgitação valvar21; no entanto, em comparação com a FAV, a cirurgia valvar cardíaca aberta pode exigir técnicas mais sofisticadas e pode estar associada a mortalidade significativamente maior, particularmente em camundongos pós-parto. Como estudos em animais demonstraram que o mesmo efeito da VO foi alcançado pela FAV22, a cirurgia de fístula abdominal modificada com menos trauma foi utilizada nest…
The authors have nothing to disclose.
Este trabalho foi apoiado pela Fundação Nacional de Ciência da China (nº 82200309) e pelo Projeto de Inovação da Distinguished Medical Team em Ningbo (nº 2022020405)
70% Ethanol | Tiandz,Chia | ||
ACETAMINOPHEN Oral Solution | VistaPharm, Inc. Largo, FL 33771, USA | NDC 66689-054-01 | |
Anesthesia machine | RWD Life Science,China | R550IP | |
Anesthesia mask | RWD Life Science,China | 68680 | |
C57BL/6 mice | Xipu’er-bikai Experimental Animal Co., Ltd (Shanghai, China) | ||
Hair removal cream | Veet, France | VT-200 | |
Hematoxylin and eosin Kit | Beyotime biotech | C0105M | |
Isoflurane | RWD Life Science,China | R510-22-10 | |
Microscope | Yuyan Instruments, China | SM-301 | |
Surgical suture needles | NINGBO MEDICAL NEEDLE CO.,LTD, China | ||
Thermostatic heating platform | Qingdao Juchuang Environmental Protection Group Co., Ltd, China | ||
Ultrasound device | FUJIFILM VisualSonics, Inc. | Vevo 2100 | Image modes includes B-Mode, Color Doppler Mode and Pulsed Wave Doppler Mode |
Ultrasound gel | Parker Laboratories,United States | REF 01-08 | |
Ultrasound transducer | FUJIFILM VisualSonics, Inc. | MS 400 |