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Rilevazione di batteri utilizzando DNAzimi fluorogenici
JoVE Journal
Immunologia e infezioni
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JoVE Journal Immunologia e infezioni
Detection of Bacteria Using Fluorogenic DNAzymes
DOI:

13:20 min

May 28, 2012

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Capitoli

  • 00:05Titolo
  • 02:02Construction of RFD-EC1 and RFSS1 by Template Mediated Enzymatic Ligation
  • 04:38Detection using Fluorescence Spectrophotometer
  • 06:28Detection by Gel Electrophoresis
  • 08:04Single Cell Detection
  • 09:55Experimental Validation using E. coli Crude Extracellular Mixtures
  • 12:42Conclusion

Summary

Traduzione automatica

Abbiamo recentemente riportato un nuovo approccio per generare sonde DNAzyme fluorogenici che possono essere applicati per impostare un semplice, "mix-e-leggere" test di fluorescenza per la rilevazione batterica. Queste sonde di DNA specifiche catalizzare il clivaggio di un cromoforo-modificato DNA-RNA chimerico substrato in presenza della miscela grezza extracellulare (CEM) prodotta da un batterio specifico, così traducendo rilevamento batterica nella generazione del segnale di fluorescenza. In questa relazione si descrivono principali procedure sperimentali in cui è occupato di una sonda specifica indicata DNAzyme "RFD-EC1" per il rilevamento del batterio del modello,<em> Escherichia coli (E. coli)</em>.

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