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使用阵列库的中等通量筛选和基于双 Luciferase 的分录报告器识别转录因子稳压器
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Ricerca sul cancro
Identification of Transcription Factor Regulators using Medium-Throughput Screening of Arrayed Libraries and a Dual-Luciferase-Based Reporter
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Click here for the English version.
使用阵列库的中等通量筛选和基于双 Luciferase 的分录报告器识别转录因子稳压器
DOI:
10.3791/60582-v
•
11:32 min
•
March 27, 2020
•
Yuxuan Xiao
,
John M. Lamar
1
Department of Molecular & Cellular Physiology
,
Albany Medical College
Capitoli
00:04
Introduction
00:39
Lentiviral Vector Library Preparation
01:24
Packaging of the Arrayed Lentiviral Library
03:35
Cell Infection for Screening
04:48
Cell Seeding for Transfection of Dual-Luciferase Reporter
06:27
Dual-Luciferase Reporter Transfection
07:35
Dual-Luciferase Activity Quantification
09:02
Results: Representative Arrayed Library Screening
10:47
Conclusion
Summary
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为了识别新的转录因子调节器,我们开发了一种使用基于双透明酶的转录报告器测定筛选排列的慢病毒或逆转录病毒RNAi库的方法。这种方法提供了一种快速且相对便宜的方法,在单个实验中筛选数百名候选人。
Tags
Transcription Factor
Medium-throughput Screening
Arrayed Libraries
Dual-luciferase Reporter
Lentiviral Vector
Retroviral Assay
Bacterial Miniprep
293FT Cells
Transfection
PsPAX2
VSVG
Cell Culture
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