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Identifizierung von Transkriptionsfaktor-Regulierern mit Medium-Throughput-Screening von Arrayed Libraries und einem Dual-Luciferase-basierten Reporter
JoVE Journal
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JoVE Journal Ricerca sul cancro
Identification of Transcription Factor Regulators using Medium-Throughput Screening of Arrayed Libraries and a Dual-Luciferase-Based Reporter
DOI:

11:32 min

March 27, 2020

,

Capitoli

  • 00:04Introduction
  • 00:39Lentiviral Vector Library Preparation
  • 01:24Packaging of the Arrayed Lentiviral Library
  • 03:35Cell Infection for Screening
  • 04:48Cell Seeding for Transfection of Dual-Luciferase Reporter
  • 06:27Dual-Luciferase Reporter Transfection
  • 07:35Dual-Luciferase Activity Quantification
  • 09:02Results: Representative Arrayed Library Screening
  • 10:47Conclusion

Summary

Traduzione automatica

Um neue Regulatoren von Transkriptionsfaktoren zu identifizieren, entwickelten wir einen Ansatz für die Bildschirmanordnung von lentiviralen oder retroviralen RNAi-Bibliotheken unter Verwendung eines auf Dual-Luciferase basierenden Transkriptions-Reporter-Assays. Dieser Ansatz bietet eine schnelle und relativ kostengünstige Möglichkeit, Hunderte von Kandidaten in einem einzigen Experiment zu überprüfen.

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