<em>In Vitro</em> Characterization of Histone Chaperones using Analytical, Pull-Down and Chaperoning Assays

Ruchir C. Bobde; Ketul Saharan; Somanath Baral; Surajit Gandhi; Archana Samal; Rajivgandhi Sundaram; Ashish Kumar; Ajit K. Singh; Aritreyee Datta; Dileep Vasudevan

doi:10.3791/63218

Rivista

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Biochimica

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In vitro Caractérisation des chaperons de histones à l’aide d’essais analytiques, de rabattement et de chaperoning

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In Vitro Characterization of Histone Chaperones using Analytical, Pull-Down and Chaperoning Assays

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In vitro Caractérisation des chaperons de histones à l’aide d’essais analytiques, de rabattement et de chaperoning

DOI:

10.3791/63218-v

•

08:16 min

•

December 29, 2021

•

Ruchir C. Bobde*^1,2, Ketul Saharan*^1,2, Somanath Baral³, Surajit Gandhi², Archana Samal², Rajivgandhi Sundaram, Ashish Kumar⁴, Ajit K. Singh⁵, Aritreyee Datta, Dileep Vasudevan

¹Institute of Life Sciences, ²Regional Centre for Biotechnology, ³School of Biotechnology,KIIT University, ⁴Department of Molecular Biophysics and Biochemistry,Yale University, ⁵Department of Pharmacology,University of Vermont College of Medicine

Capitoli

00:05Introduction
01:04Competitive Pull-Down Assay
02:06Analytical Ultracentrifugation-Sedimentation Velocity (AUC-SV) Experiments
04:29Plasmid Supercoiling Assay to Confirm Histone Chaperoning Function
06:11Results: Characterization of Histone Chaperones Using Analytical, Pull-Down, and Chaperoning Assays
07:41Conclusion

Summary

Traduzione automatica

Ce protocole décrit une batterie de méthodes qui comprend la chromatographie analytique taille-exclusion pour étudier l’oligomérisation et la stabilité des histones chaperones, le test pull-down pour démêler les interactions hiperon-histone, l’ASC pour analyser la stœchiométrie des complexes protéiques et le test de chaperonnage des histones pour caractériser fonctionnellement un chaperon histones putatif in vitro.

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