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In vitro Charakterisierung von Histon-Chaperonen mittels analytischer, Pull-Down- und Chaperoning-Assays
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Capitoli
- 00:05Introduction
- 01:04Competitive Pull-Down Assay
- 02:06Analytical Ultracentrifugation-Sedimentation Velocity (AUC-SV) Experiments
- 04:29Plasmid Supercoiling Assay to Confirm Histone Chaperoning Function
- 06:11Results: Characterization of Histone Chaperones Using Analytical, Pull-Down, and Chaperoning Assays
- 07:41Conclusion
Dieses Protokoll beschreibt eine Reihe von Methoden, die eine analytische Größenausschlusschromatographie zur Untersuchung der Histon-Chaperon-Oligomerisierung und -stabilität, den Pull-Down-Assay zur Entschlüsselung von Histon-Chaperon-Histon-Interaktionen, die AUC zur Analyse der Stöchiometrie der Proteinkomplexe und den Histon-Chaperoning-Assay zur funktionellen Charakterisierung eines mutmaßlichen Histon-Chaperons in vitro umfassen.
