Le modèle organotypiques d'hippocampe Culture Slice d'examen des lésions neuronales
Summary
Le modèle de l'hippocampe organoptypic la culture tranche est une<em> In vitro</em> Modèle utilisé pour examiner les lésions neuronales dans une variété de paradigmes. Dans cet article, nous décrivons les méthodes pour générer des cultures tranche et la quantification des lésions neuronales.
Abstract
Organotypiques la culture tranche de l'hippocampe est une méthode in vitro pour examiner les mécanismes de lésions neuronales dans laquelle l'architecture de base et la composition de l'hippocampe est relativement préservée 1. Le système de culture organotypique permet pour l'examen des effets neuronaux, astrocytaire et microgliale, mais comme une préparation ex vivo, ne tient pas compte des effets de la circulation sanguine, ou le recrutement de cellules inflammatoires périphériques. À cette fin, cette méthode de culture est souvent utilisé pour examiner des blessures hypoxiques excitotoxique et aux neurones pyramidaux de l'hippocampe, mais a également été utilisée pour examiner la réponse inflammatoire. Ici nous décrivons les méthodes pour générer des cultures tranche de l'hippocampe du cerveau de rongeur postnatale, l'administration de stimuli toxiques pour induire des lésions neuronales, et en dosant et en quantifiant la mort neuronale hippocampique.
Protocol
Discussion
Il ya deux points importants à suivre pour assurer des résultats reproductibles et cohérents lors de la réplication des expériences. Premièrement, il est important de laisser l'âge hippocampique tranches pendant 12-14 jours avant l'expérimentation. Avec l'isolement tranche, il ya une réponse significative microgliales, et les microglies activées restent pendant un certain temps, avec un retour à un état de repos ramifiées survenant au jour 10 in vitro de 3,6. Deuxièmem…
Disclosures
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
Financé par le NINDS, l'American Heart Association, l'American Federation for Aging Research, Mars of Dimes
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