Nöronal Sakatlık incelenmesi için Organotipik Hipokampal Dilim Kültür Modeli
Summary
Organoptypic hipokampal kesit kültürü modeli<em> In vitro</em> Model paradigmaların çeşitli nöronal hasarı incelemek için kullanılır. Bu makalede, biz dilim kültürler oluşturma ve nöronal yaralanma miktarının belirlenmesi için yöntemler açıklanmaktadır.
Abstract
Organotipik hipokampal kesit kültürü, temel mimari ve hipokampus bileşimi nispeten 1 korunduğu nöronal yaralanma mekanizmaları incelemek için bir in vitro yöntemdir . Organotipik kültür sistemi, nöronal astrositik ve mikroglia etkilerinin incelenmesi için izin verir, ama bir ex vivo hazırlama olarak, periferik inflamatuar hücrelerin kan akışı, ya da işe etkileri hitap etmez . Bu amaçla, bu kültür yöntemi hipokampus piramidal nöronlar eksitotoksik ve hipoksik hasarı incelemek için sık sık kullanılır, ama aynı zamanda inflamatuvar yanıt incelemek için kullanılan olmuştur. Bu yazıda, doğum sonrası kemirgen beyin hipokampal dilim kültürleri, nöronal hasara yol toksik uyaranlara yönetmek ve assaying hipokampal nöron ölümü ve miktarının belirlenmesi için yöntemler açıklanmaktadır.
Protocol
Discussion
Deneyler kopyalayan tekrarlanabilir ve tutarlı sonuçları elde etmek için izlemeniz gereken iki önemli nokta vardır. İlk olarak, 12-14 gün önce deney için hipokampal dilim yaş izin vermek önemlidir. Dilim yalıtımı sayesinde, önemli bir mikrogliyal yanıt vardır ve mikroglia in vitro 3,6 10 günde meydana gelen bir dinlenme dallanmış devlet bir dönüş, bir süre aktif kalır . İkincisi, PI floresan yoğunluğu, yaralı hücrelerinin sayısı 4 ile orantılıdır anlamı…
Disclosures
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
NINDS tarafından finanse edilen, Amerikan Kalp Derneği, Amerikan Yaşlanma Araştırma Federasyonu, March of Dimes
References
- Stoppin, L., Buchs, P. A., Muller, D. A simple method for organotypic cultures of nervous tissue. J Neurosci Methods. 37 (2), 173-173 (1991).
- McCullough, L., Wu, L., Haughey, N. Neuroprotective Function of the PGE2 EP2 Receptor in Cerebral Ischemia. J Neurosci. 24 (1), 257-257 (2004).
- Czapiga, M., Colton, C. A. Function of microglia in organotypic slice cultures. J Neurosci Res. 56, 644-644 (1999).
- Newell, D. W., Barth, A., Papermaster, V. Glutamate and non-glutamate receptor mediated toxicity caused by oxygen and glucose deprivation in organotypic hippocampal cultures. J Neurosci. 15, 7702-7702 (1995).
- Wu, L., Wang, Q., Liang, X. Divergent Effects of prostaglandin recetor signaling on neuronal survival. Neuroscience letter. 421, 253-253 (2007).
- Hailer, N. P., Jarhult, J. D., Nitsch, R., R, . Resting microglial cells in vitro: Analysis of morphology and adhesion molecule expression in organotypic hippocampal slice cultures. Glia. 18, 319-319 (1996).
