תרבות Organotypic בהיפוקמפוס Slice דגם לבחינת פגיעה עצבית
Summary
תרבות organoptypic בהיפוקמפוס מודל פרוסה היא<em> במבחנה</emמודל> בעבר לבחון פגיעה עצבית במגוון של פרדיגמות. במאמר זה, אנו מתארים את שיטות להפקת תרבויות פרוסה וכימות הפגיעה העצבית.
Abstract
פרוסה Organotypic תרבות בהיפוקמפוס היא שיטה חוץ גופית כדי לבחון את המנגנונים של פגיעה עצבית שבו הארכיטקטורה הבסיסית והרכב של ההיפוקמפוס נשמר יחסית 1. מערכת תרבות organotypic מאפשר בדיקה של השפעות עצביות, astrocytic ו microglial, אבל כהכנה vivo לשעבר, אינו מתייחס להשפעות של זרימת הדם, או גיוס של תאים דלקתיים היקפי. לשם כך, שיטה זו התרבות משמש לעתים קרובות כדי לבחון פגיעה excitotoxic ו hypoxic לנוירונים פירמידה של ההיפוקמפוס, אך שימש גם כדי לבחון את התגובה הדלקתית. בזאת אנו מתארים את שיטות להפקת תרבויות פרוסה בהיפוקמפוס מהמוח מכרסם לאחר הלידה, מתן גירויים רעילים כדי לגרום פגיעה עצבית, ו assaying וכימות מוות נוירונים בהיפוקמפוס.
Protocol
Discussion
ישנן שתי נקודות חשובות לעקוב כדי להבטיח תוצאות לשחזור ועקבית כאשר משכפלים ניסויים. ראשית, חשוב לתת את גיל פרוסות בהיפוקמפוס עבור 12-14 ימים לפני ניסויים. עם בידוד פרוסה, יש תגובה microglial משמעותית, microglia להישאר פעיל במשך זמן מה, עם חזרה למצב מנוחה ענפה מתרחשת ביום 10 במבחנ?…
Disclosures
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
הממומן על ידי NINDS, איגוד הלב האמריקני, איגוד אמריקאי לחקר הזדקנות, מצעד הפרוטות
References
- Stoppin, L., Buchs, P. A., Muller, D. A simple method for organotypic cultures of nervous tissue. J Neurosci Methods. 37 (2), 173-173 (1991).
- McCullough, L., Wu, L., Haughey, N. Neuroprotective Function of the PGE2 EP2 Receptor in Cerebral Ischemia. J Neurosci. 24 (1), 257-257 (2004).
- Czapiga, M., Colton, C. A. Function of microglia in organotypic slice cultures. J Neurosci Res. 56, 644-644 (1999).
- Newell, D. W., Barth, A., Papermaster, V. Glutamate and non-glutamate receptor mediated toxicity caused by oxygen and glucose deprivation in organotypic hippocampal cultures. J Neurosci. 15, 7702-7702 (1995).
- Wu, L., Wang, Q., Liang, X. Divergent Effects of prostaglandin recetor signaling on neuronal survival. Neuroscience letter. 421, 253-253 (2007).
- Hailer, N. P., Jarhult, J. D., Nitsch, R., R, . Resting microglial cells in vitro: Analysis of morphology and adhesion molecule expression in organotypic hippocampal slice cultures. Glia. 18, 319-319 (1996).
