Preparación de inmunógeno ratón hipófisis para la inducción de la hipofisitis autoinmune experimental
Summary
Hipofisitis autoinmune se puede reproducir en ratones mediante la inyección de un extracto de proteínas de ratón pituitaria.
Abstract
Hipofisitis autoinmune es una inflamación crónica de la glándula pituitaria causado o acompañado por una autoinmunidad. Tradicionalmente se ha considerado una enfermedad rara, pero la información se ha incrementado notablemente en los últimos años. Hipofisitis, de hecho, no es raro desarrolla como un "efecto secundario" en pacientes con cáncer tratados con anticuerpos que bloquean los receptores inhibitorios expresa en los linfocitos T, tales como CTLA-4 2 y los receptores de PD-1. Hipofisitis autoinmune puede ser inducida experimentalmente mediante la inyección de ratones con las proteínas de la hipófisis se mezcla con un adyuvante 3. En este artículo de vídeo que muestra cómo extraer las proteínas de ratón glándulas pituitaria y la forma de prepararlos de forma adecuada para la inducción de hipofisitis autoinmune en ratones SJL.
Protocol
Discussion
A pesar de que el primer paciente con hipofisitis autoinmune se informó en 1962 4, los autoantígenos patógenos hipófisis aún no se han identificado 5. Los modelos animales pueden ser muy útiles para identificar a estos autoantígenos, ayudar al descubrimiento de biomarcadores que son traducibles al cuidado del paciente. Este artículo ha demostrado un procedimiento sencillo para la preparación de proteínas de la hipófisis en una forma que es adecuada para la inducción de hipofisitis autoi…
Disclosures
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
Este trabajo fue apoyado por el NIH subvención DK080351 para PC.
Materials
| Material Name | Type | Company | Catalogue Number | Comment |
|---|---|---|---|---|
| 15-ml Falcon tubes | ||||
| homogenization buffer | ||||
| phosphate buffered saline | ||||
| protease inhibitor cocktail | ||||
| Polytron homogenizer | ||||
| BCA assay | Pierce | 23225 | ||
| Complete Freund’s Adjuvant (CFA) | Sigma | F-5881 | ||
| Mycobacterium tuberculosis | Becton Dickinson | 231141 | ||
| 2.5 mL Hamilton gastight syringe | ||||
| 22-gauge micro-emulsifying needle |
References
- Caturegli, P., Newschaffer, C., Olivi, A., Pomper, M. G., Burger, P. C., Rose, N. R. . Autoimmune Hypophysitis Endocr Rev. 26, 599-614 (2005).
- Blansfield, J. A., Beck, K. E., Tran, K., Yang, J. C., Hughes, M. S., Kammula, U. S., Royal, R. E., Topalian, S. L., Haworth, L. R., Levy, C., Rosenberg, S. A., Sherry, R. M. Cytotoxic T-lymphocyte-associated antigen-4 blockage can induce autoimmune hypophysitis in patients with metastatic melanoma and renal cancer. J Immunother. 28, 593-598 (2005).
- Tzou, S. C., Lupi, I., Landek, M., Gutenberg, A., Tzou, Y. M., Kimura, H., Pinna, G., Rose, N. R., Caturegli, P. Autoimmune Hypophysitis of SJL mice: Clinical Insights from a New Animal Model. Endocrinology. 149, 3461-3469 (2008).
- Goudie, R. B., Pinkerton, P. H. Anterior hypophysitis and Hashimoto’s disease in a woman. J Pathol Bacteriol. 83, 584-585 (1962).
- Caturegli, P. Autoimmune hypophysitis: an underestimated disease in search of its autoantigen(s). J Clin Endocrinol Metab. 92, 2038-2040 (2007).
