Summary

Een vereenvoudigde methode voor het produceren van een ischemische Wound Model

Published: May 02, 2012
doi:

Summary

We hebben een minimaal invasieve techniek om een ​​konijn ischemische oor wond model te creëren door het verdelen van de centrale ader en zenuw-en de craniale neurovasculaire bundel. Een subcutane tunnel snijdt dan alle onderhuidse weefsels. Deze procedure zorgt ervoor dat een minimale verstoring van de huid en kan veilig gebruikt worden bij diabetische dieren.

Abstract

Een groot obstakel in de huidige diabetische wond onderzoek is een gebrek aan een ischemische wond model dat veilig kan worden gebruikt bij diabetische dieren. Geneesmiddelen die goed werken in niet-ischemische wonden werken mogelijk niet in de menselijke diabetische wonden, omdat vasculopathie is een belangrijke factor die de genezing van deze wonden de weg staat. We publiceerden een artikel in 2007 het beschrijven van een konijn oor ischemische wond model gemaakt door een minimaal invasieve chirurgische techniek. Sindsdien hebben we verder een vereenvoudiging van de procedure voor een lichtere bediening. Op een oor, werden drie kleine incisies gemaakt op de vasculaire steeltjes, 1-2 cm van het oor basis. De centrale ader werd geligeerd en snijd samen met de zenuw. De hele craniale bundel werd gesneden en geligeerd, waardoor alleen de staart tak intact. Een rondlopende subcutane tunnel werd gemaakt door de incisies, om onderhuidse weefsels, spieren, zenuwen en kleine vaartuigen te snijden. De andere oor werd gebruikt als een niet-ischemische controle. Vier wonden werden gemaakt op de ventrale zijde of elk oor. Deze techniek produceert het 4 ischemische wonden en 4 niet-ischemische wonden in een dier voor gepaarde vergelijking. Na de operatie, de ischemische oor was koel en cyanotisch, en toonde verminderde beweeglijkheid en een gebrek aan impuls in het oor slagader. Huid temperatuur van de ischemische oor was 1-10 ° C lager dan de normale oor en dit verschil werd gedurende meer dan een maand. Ear weefsel hoog-energetische fosfaten wordt aanzienlijk lager in de ischemische oor dan de controle oor. Wondheling tijden waren meer in het ischemische oor dan in de niet-ischemische oor wanneer dezelfde behandeling gebruikt. De techniek is nu op meer dan 80 konijnen waarbij 23 had diabetes (diabetes tijd variërend van 2 weken tot 2 jaar). Geen enkel konijn heeft elke chirurgische complicaties, zoals bloedingen, infecties, of scheuren in de huid incisies. Het model heeft veel voordelen, zoals weinig huid verstoring, langere ischemische tijd, en hoger slagingspercentage in vergelijking met veel andere modellen. Het ú on veilig bij dieren met een verminderde weerstand, en kan ook worden aangepast aan verschillende eisen voldoen.

Protocol

1. Anatomic Basis Het konijn oor is een geliefde studie materiaal voor wondverzorging sinds het begin van de 20e eeuw. Het oor wordt geleverd door drie vaatbundels (CV, craniale en caudale), de centrale bundel is de grootste, terwijl de schepen in de craniale en caudale bundels variëren in grootte. Af en toe kan de caudale slagader afwezig. 1 Al deze schepen zijn gemakkelijk te herkennen aan de dorsale zijde na het oor wordt geschoren (fig. 1). Aan de ve…

Discussion

Diabetes treft 23,6 miljoen mensen in de VS, 2,3 en 15-20% van deze patiënten ontwikkelen voetulcera in hun leven, 4,5 tegen een jaarlijkse behandeling kost van meer dan $ 25 miljard. 3,6 Maar zelfs de beste beschikbare behandelingen hebben slechts een 50% genezing en dit is vaak tijdelijk, 7 met een recidief tarieven zo hoog als 66% bij diabetici. 3,6 Bij zweren optreden bij patiënten met diabetes, ernstige complicaties zoals infectie en amputatie drastisch toene…

Disclosures

The authors have nothing to disclose.

Acknowledgements

Deze studie werd mede ondersteund door NIH subsidies 1RO1DK74566 en 1RO1AM52984. De auteurs willen graag mevrouw Jacqueline McCarty in RRC bedanken voor haar hulp tijdens de operatie, Drs. Jianpu Wang en Harshini Sarojini voor hun hulp bij chirurgie en postoperatieve zorg bij een aantal konijnen, dr. Rong Wan voor haar histologie werk, en mevrouw Ming Li voor haar HPLC metingen van hoog-energetische fosfaten.

Materials

For monitoring during surgery

  1. A heating pad to maintain normal temperature.
  2. A transcutaneous oxygen monitor.
  3. A temperature monitor.

For surgery

  1. A #3 knife with #15 blade.
  2. Two pairs of forceps (one for skin and another for other soft tissues).
  3. 2-3 pairs of small clamps.
  4. One or two pairs of micro scissors (for tissue cutting).
  5. One pair of small scissors (for cutting sutures).
  6. A needle holder.
  7. A few stainless steel punches (for making wounds).

References

  1. Ninomiya, H. The vascular bed in the rabbit ear: microangiography and scanning electron microscopy of vascular corrosion casts. Anat. Histol. Embryol. 29, 301-305 (2000).
  2. Sen, C. K., Gordillo, G. M., Roy, S., Kirsner, R., Lambert, L., Hunt, T. K., Gottrup, F., Gurtner, G. C., Longaker, M. T. Human skin wounds: a major and snowballing threat to public health and the economy. Wound Repair. 17, 763-771 (2009).
  3. Boulton, A. J., Vileikyte, L., Ragnarson-Tennvall, G., Apelqvist, J. The global burden of diabetic foot disease. Lancet. 366, 1719-1724 (2005).
  4. Edwards, J., Stapley, S. Debridement of diabetic foot ulcers. Cochrane Database Syst. Rev. 1, 1-40 (2010).
  5. Werdin, F., Tennenhaus, M., Schaller, H. E., Rennekampff, H. O. Evidence-based Management Strategies for Treatment of Chronic Wounds. Eplasty. 9, 169-179 (2009).
  6. Wu, Y., Chen, L., Scott, P. G., Tredget, E. E. Mesenchymal stem cells enhance wound healing through differentiation and angiogenesis. Stem Cells. 25, 2648-2659 (2007).
  7. Bennett, J. P., Matthews, R., Faulk, W. P. Treatment of chronic ulceration of the legs with human amnion. Lancet. 1, 1153-1156 (1980).
  8. Gottrup, F., Agren, M. S., Karlsmark, T. Models for use in wound healing research: a survey focusing on in vitro and in vivo adult soft tissue. Wound Repair. 8, 83-96 (2000).
  9. Lindblad, W. J. Animal models in wound healing research: do we need more. Wound Repair. 8, 81-82 (2000).
  10. LoGerfo, F. W., Gibbons, G. W. Vascular disease of the lower extremities in diabetes mellitus. Endocrinol. Metab. Clin. North Am. 25, 439-445 (1996).
  11. Gottrup, F. Oxygen, wound healing and the development of infection. Present status. Eur. J. Surg. 168, 260-263 (2002).
  12. Niinikoski, J. The effect of blood and oxygen supply on the biochemistry of repair. , 56-71 (2002).
  13. Schaffer, M., Witte, M., Becker, H. D. Models to study ischemia in chronic wounds. Int. J. Low Extrem. Wounds. 1, 104-111 (2002).
  14. Niinikoski, J., Gottrup, F., Hunt, T. K. The role of oxygen in wound repair. , 165-174 (1991).
  15. Harding, K. G., Morris, H. L., Patel, G. K. Science, medicine and the future: healing chronic wounds. BMJ. 324, 160-163 (2002).
  16. Lindblad, W. J. Editorial: How should one study wound healing. Wound Repair. 14, 515-515 (2007).
  17. Chien, S. Ischemic rabbit ear model created by minimally invasive surgery. Wound Repair Regen. 15, 928-935 (2007).
  18. Joseph, J., Townsend, F. J. The healing of defects in immobile skin in rabbits. Br. J. Surg. 48, 557-564 (1961).
  19. James, G. A., Swogger, E., Wolcott, R., Pulcini, E., Secor, P., Sestrich, J., Costerton, J. W., Stewart, P. S. Biofilms in chronic wounds. Wound Repair Regen. 16, 37-44 (2008).
  20. Niitsuma, J., Yano, H., Togawa, T. Experimental study of decubitus ulcer formation in the rabbit ear lobe. J. Rehabil. Res. Dev. 40, (2003).
  21. Salcido, R., Popescu, A., Ahn, C. Animal models in pressure ulcer research. J. Spinal Cord Med. 30, 107-116 (2007).
check_url/kr/3341?article_type=t

Play Video

Cite This Article
Chien, S., Wilhelmi, B. J. A Simplified Technique for Producing an Ischemic Wound Model. J. Vis. Exp. (63), e3341, doi:10.3791/3341 (2012).

View Video