大人のゼブラフィッシュの生化学的解析のための採血
Summary
本論文では、ゼブラフィッシュの背側大動脈から採血するためのテクニックを紹介します。それはまた、コレステロールとトリグリセリドのレベルを決定するためのテストとして生化学的解析に使用するための血清を得る方法について説明します。
Abstract
ゼブラフィッシュは、いくつかのヒト疾患の研究のための動物モデルとして使用されています。それは分子事象の研究と治療戦略のためにだけでなく、いくつかの病態1の生理学的メカニズムを評価するための強力な前臨床試験のプラットフォームとして機能することができます。
研究者は、ゼブラフィッシュ系の探査を可能にするために必要な基本的なテクニックは3欠けていることを推測する可能性がある臓器やシステム2の成人のゼブラフィッシュの生理機能に関連した比較的少数の出版物があります。ゼブラフィッシュの血液生化学値は、最初1999年に初めてJagadeeswaranらによって記述された採血技術を採用したマーサと同僚4で2003年に報告されました。簡単に言うと、血液は背大動脈5の領域では、長さ約0.3センチ、横方向の切開口からマイクロピペットチップを介して収集されました。関与分寸法、これのために熟練した医師を必要とする高精度な技術である。同じ手法は同年6の別のパブリケーションで同じグループによって使用されていました。 2010年、イームズらは、ゼブラフィッシュ7の全血ブドウ糖のレベルを評価した。彼らは、はさみでdecapitationsを実行して、胸の関節にヘパリンマイクロキャピラリーコレクションチューブを挿入することにより、血液へのアクセスを獲得しました。彼らは労働キルパトリックらに基づいて、適切な保存温度で解決された溶血の困難に言及8。我々の研究室でJagadeeswaranのテクニックを使用しようとすると、我々は、コレクションが開始される前に失われる血液かなりの量のを許可しないように、それが正確に適切な場所に切開を行うことが困難であることがわかった。
最近、グプタら9大人ゼブラフィッシュの臓器、もつれらを分析する方法を説明しました。10 intraperitonを実行する方法を説明しましたEAL注射、Pugachら11は、眼窩の注入を実行する方法について説明します。しかし、より多くの作業がより完全にゼブラフィッシュの研究のための基本的な技術を探求するために必要です。
ゼブラフィッシュのサイズが小さい実験モデルとして使用する研究者のための課題を提示します。さらに、規模の小ささ、この与えられた、それは単純な手法が研究者は、ゼブラフィッシュモデルの利点を探求できるようにするために開発されていることが重要です。
Protocol
Discussion
本論文では、ゼブラフィッシュの実験ではさらに、血液や血清分析を可能にする単純な手法を提示します。この手法では、血液パラメータのデータを必要とする将来のゼブラフィッシュ血液の研究に貢献する可能性を秘めています。また、実験モデルとしてのゼブラフィッシュの大きいアプリケーションを許可する必要があります。
この手法は、特別なスキルや正確な?…
Disclosures
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
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Materials
| Name of the reagent | Company | Catalogue number | Comments |
| Low retention tips | Applied Biosystems | 022493020 | |
| Eppendorf Centrifuge 5415D | Eppendorf | Discontinued |
References
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