Эндотелиальных клеток, образующих колонии (ECFCs) циркулируют эндотелиальных клетках с надежными клонального пролиферативный потенциал, которые отображают внутренние<em> В естественных условиях</em> Судно формирование способности. Фенотипические и функциональные характеристики результат эндотелиальных клеток, полученных от ЦБ имеют важное значение для выявления и изоляции<em> Добросовестных</em> ECFCs потенциального клинического применения в восстановлении поврежденных тканей.
Многолетние виды новых кровеносных сосудов через ангиогенез, васкулогенез и arteriogenesis были недавно рассмотрены 1. Наличие циркулирующих эндотелиальных клеток-предшественников (EPC), впервые были определены в взрослого человека периферической крови Асахара и соавт. В 1997 г. 2 чего приток новых гипотез и стратегий для регенерации сосудистой и ремонт. ЕРС редки, но нормальные компоненты циркулирующей крови, что дома на сайты кроветворения судна или сосудистого ремоделирования, а также содействовать или послеродовой васкулогенез, ангиогенез, или arteriogenesis основном через паракринной стимулирование существующих сосудистой стенки клеток, полученных из 3. Никаких конкретных маркеров для идентификации EPC был определен, и в настоящее время состояние поля, чтобы понять, что многие типы клеток, в том числе проангиогенных гемопоэтических стволовых и прогениторных клеток, циркулирующих ангиогенных клеток, Tie2 + моноцитов, предшественников миелоидного челLS, опухоли связано макрофагов и М2 активированными макрофагами участвовать в стимулировании процессов ангиогенеза в различных доклинических модельных систем животных и у человека в различных болезненных состояний, 4, 5. Эндотелиальных клеток, образующих колонии (ECFCs) встречаются редко циркулируют жизнеспособные клетки эндотелия характеризуется надежной клонального пролиферативный потенциал, вторичные и третичные колониеобразующих способность на replating и способность образовывать внутренние сосуды в естественных условиях при трансплантации в иммунодефицитных мышей 6-8. Хотя ECFCs были успешно изолированы от периферической крови здоровых взрослых, пуповинной крови (ЦБ) здоровых новорожденных, а стенки сосуда многочисленных человеческих артериальных и венозных сосудов 6-9 ЦБ обладает самой высокой частотой ECFCs 7, дисплей самый надежный клонального пролиферативный потенциал и прочный вид и функциональные кровеносные сосуды в 8 естественных, 10-13. В то время как при выводеECFC от взрослых периферической крови было представлено 14, 15, здесь мы описываем методологию для вывода, клонирования, расширение, и в пробирке, а также в естественных условиях характеристики ECFCs от человеческой пуповинной ЦБ.
Фенотипические и функциональные характеристики предполагаемого эндотелиальных клеток-предшественников, важно определить добросовестных ECFCs, которые способны клонировании и серийно повторное покрытие в области культуры и привести к прочным и функциональным имплантируемых кро…
The authors have nothing to disclose.
Доктор Yoder является консультантом EndGenitor Technologies, Inc и член совета Rimedion Technologies, Inc
Name of the reagent | Company | Catalogue number |
Heparin Sodium Injection, USP | APP Pharmaceuticals | 504031 |
Ficoll-Pague | Amersham Biosciences | 17-1440-03 |
Mixing cannula | Maersk Medical | 500.11.012 |
EGM-2 | Lonza | CC-3162 |
Defined FBS | Hyclone | SH30070.03 |
TrypLE express | Gibco | 12605 |
Rat type I collagen | BD Biosciences | 354236 |
Matrigel | BD Biosciences | 356234 |
FcR Block | Miltenyi Biotech | 130-059-901 |
hCD31, FITC conjugated | BD Pharmingen | 555445 |
hCD45, FITC conjugated | BD Pharmingen | 555482 |
hCD14, FITC conjugated | BD Pharmingen | 555397 |
hCD144, PE conjugated | eBioscience | 12-1449-80 |
hCD146, PE conjugated | BD Pharmingen | 550315 |
hCD105, PE conjugated | Invitrogen | MHCD10504 |
Ms IgG1,k antibody, FITC conjugated | BD Pharmingen | 555748 |
Ms IgG1,k antibody, PE conjugated | BD Pharmingen | 559320 |
Ms IgG2a,k antibody, FITC conjugated | BD Pharmingen | 555573 |
Anti-human CD31 | Dako | clone JC70/A |
Anti-mouse CD31 | BD Pharmingen | 553370 |
0.22-μm vacuum filtration system | Millipore | SCGPU05RE |
Glacial acetic acid, 17.4N | Fisher | A38-500 |
Antibiotic-Antimycotic | Invitrogen | 15240-062 |
Fetal bovine serum (FBS) | Hyclone | SH30070.03 |
IHC Zinc Fixative | BD Biosciences | 550523 |
Sytox green reagent | Invitrogen | S33025 |
Cloning cylinders, sterile | Fisher Scientific | 07-907-10 |