Summary

조직 공학을위한 Electrospun의 Fibres의 Postproduction 처리

Published: August 09, 2012
doi:

Summary

Electrospun의 공사장 공중 발판은 조직 공학 응용 프로그램을위한 포스트 프로덕션을 처리할 수 있습니다. 여기 불임 (무균 생산 또는 멸균 포스트 생산)을 달성하기 위해하고 적절한 biomechanical 속성을 달성위한 두꺼운 공사장 공중 발판을 (멀티 layering이 열을 사용하거나 증기가 풀림으로) 제작을 위해, 복잡한 공사장 공중 발판을 (연속 회전으로) 회전하는 방법을 설명합니다.

Abstract

Electrospinning는 3D 조직 공학을위한 공사장 공중 발판을 (종종 생분해성) 생산 일반적으로 사용하고 다양한 방법입니다. 1, 2, 생체내 3 대부분의 조직과 같은 피부, 방광, 골반 바닥, 심지어 어린이와 같은 하드 구개 등 extents를 변화에 biaxial 팽만을 받다 성장. 이러한 목적을 위해 공사장 공중 발판을 생산에 적절한 biomechanical 속성의 공사장 공중 발판을 개발 (세포없이 또는 함께 달성 여부) 및 임상 용도 멸균되어있는 할 필요가있다. 여기에 두께, 기계적 성질 및 살균 (필요 -이 논문의 초점은 기본 electrospinning 매개 변수 (electrospinning에 대한 광범위한 문학가로) 설립 있지만 그들이 조직 공학의 목적에 적합하도록 잣고 공사장 공중 발판 포스트 프로덕션을 수정하는 방법에 대한 방법 않습니다 임상 사용)으로 간주하고 우리는 또한 세포 공사장 공중 발판을 배양해 및 특정 애플 리케이션을위한 조건을에 biaxial 변형을 받다 수있는 방법에 대해 설명합니다.

Electrospinning는 얇은 시트를 생산하는 경향이; electrospinning 수집기는 섬유 절연 코팅되어 이건 정말 가난한 지휘자되면서 그 위에 섬유는 더 이상 보증금니다. 따라서 우리는 열 또는 증기가 필요하지 않게 탄력을 공사장 공중 발판의 강도를 증가 소둔 있지만하여 두꺼운 구조를 생성하기 위해 방법을 설명합니다. 복잡한 공사장 공중 발판을 달성하기 위해 다른 폴리머의 공사장 공중 발판의 연속적인 회전도 설명되어 있습니다. Sterilisation 방법론에 부정적인 강도와 공사장 공중 발판의 탄력에 영향을 미칠 수 있습니다. 우리는 폴리 락트 – 공동 glycolic 산 (PLGA)의 electrospun 공사장 공중 발판 biomechanical 특성에 미치는 영향에 대한 세 가지 방법을 비교합니다.

공사장 공중 발판 및 공사장 공중 발판 세포에 의해 세포외 매트릭스 (ECM) 단백질의 생산 평가에서 세포의 이미징이 설명되어 있습니다. 시험 관내에있는 공사장 공중 발판 Culturing 세포는 비계의 강도와 탄성하지만 조직 공학 literatu을 향상시킬 수다시는 세포가 종종 정적 조건에서 배양해 때 적절한 ECM을 생산하지 못하는 것을 보여줍니다. 몇 가지 상용 시스템은 동적 조절 정권 하에서 공사장 공중 발판 배양 세포에 한 수 있다고 사용할 수 있습니다 -. 한 가지 예를은 미디어 내에 채워진 챔버를 기계적 그립 사용하여 개최 공사장 공중 발판에있는 세포에 대한 컨디셔닝 프로그램을 발휘하는 데 사용할 수있는 Bose Electroforce 3,100입니다 4 2 차원에 제어된 왜곡에 대한 예산 세포 배양 생물 반응기에 대한 접근 방법이 설명되어 있습니다. 우리는 세포가 이러한 조건 하에서 엘라스틴을 생산하도록 유도 수 있도록 보여줍니다. 마지막으로 세포와 함께 또는없이 배양해 가공 공사장 공중 발판의 biomechanical 특성 평가가 설명되어 있습니다.

Protocol

1. 랜덤 정렬 Fibres의 Electrospinning Electrospinning는 earthed 수집기 향해 폴리머 솔루션을 그려 전위를 사용하여 미세 섬유 네트워크를 만듭니다. 수집은 매우 다양한 형태로 사용할 수 있으며 정적 또는 더 일반적으로, 회전이 될 수 있습니다. 솔루션 전에 용매 증발은 수집기에 도착하고 제트기가 섬유로 굳은. 각 고분자는 섬유의 주어진 유형을 생산 조건 자?…

Discussion

Electrospinning은 조직 공학을위한 공사장 공중 발판을 생산을위한 매우 인기있는 기술입니다. 14, 15, 16 그것이 기술은 또한 복잡하고 다양한 변수와 다각입니다 실험적 사용하기 위해 기본적인 electrospun의 공사장 공중 발판을 만들어 상대적으로 간단하지만. 6은 어떻게 설명하는 많은 연구가있다 매개 변수를 결정 electrospinning 발판이 생산. 본 연구에서는 초점은 적절한 아키텍쳐 및 …

Disclosures

The authors have nothing to disclose.

Acknowledgements

우리는 씨 Frazer의 안녕을 위해 박사 학위를위한 자금 BBSRC 감사합니다.

Materials

Name of the reagent Company Catalogue number Comments
Poly lactic-co-glycolic acid Sigma Aldrich    
Poly lactic acid Sigma Aldrich 81273 Inherent viscosity ~2.0dl/g
Poly ε-caprolactone Sigma Aldrich    
Poly hydroxybutyrate-co-hydroxyvalerate 12:1 Goodfellow 578-446-59 PHB88/PHV12
Dichloromethane Sigma Aldrich or Fisher 270997 or D/1850/17 >99.8% contains 50-150ppm amylene stabiliser
50 multi coloured balloons Wilkinson’s Hardware Stores Ltd. 0105790  
Goat anti-rabbit IgG (FC):FITC AbDserotec STAR121F  
Rabbit anti-human alpha elastin AbDserotec 4060-1060  
Screw Cap GL45 PP 2 Port, pk/2 SLS 1129750  
4′,6-Diamidino-2-phenylindole dihydrochloride Sigma Aldrich  32670  
CellTracker  green CMFDA Invitrogen C7025  
CellTracker  red CMTX Invitrogen C34552  

References

  1. Canton, I., McKean, R., Charnley, M., Blackwood, K., Fiorica, C., Ryan, A., MacNeil, S. Development of an Ibuprofen-releasing biodegradable PLA/PGA electrospun scaffold for tissue regeneration. Biotechnology and bioengineering. 105, 396-408 (2010).
  2. Blackwood, K., McKean, R., Canton, I., Freeman, C., Franklin, K., Cole, A., Brook, I., Farthing, P., Rimmer, S., Haycock, J., Ryan, A., MacNeil, S. Development of biodegradable electrospun scaffolds for dermal replacement. Biomaterials. 29, 3091-3104 (2008).
  3. Yang, F., Maurugan, R., Wang, S., Ramakrishna, S. Electrospinning of nano/micro scale poly(L-lactic acid) aligned fibers and their potential in neural tissue engineering. Biomaterials. 26, 2603-2610 (2005).
  4. Sittichokechaiwut, A., Edwards, J. H., Scutt, A. M., Reilly, G. C. Short bouts of mechanical loading are as effective as dexamethasone at inducing matrix production by human bone marrow mesenchymal stem cell. Eur. Cell Mater. 20, 45-57 (2010).
  5. Sill, T. J., von Recum, H. A. Electrospinning: applications in drug delivery and tissue engineering. Biomaterials. 29 (13), 1989-2006 (2008).
  6. Deitzel, J., Kleinmeyer, J., Harris, D., Beck Tan, N. C. The effect of processing variables on the morphology of electrospun nanofibers and textiles. Polymer. 42, 261-272 (2001).
  7. Fridrikh, S., Yu, J., Brenner, M., Rutledge, G. Controlling the fiber diameter during electrospinning. Physical review letters. 90, 1-4 (2003).
  8. Fong, H., Chun, I., Reneker, D. Beaded nanofibers formed during electrospinning. Polymer. 40 (16), 4585-4592 (1999).
  9. Selim, M., Bullock, A. J., Blackwood, K. A., Chapple, C. R., MacNeil, S. Developing biodegradable scaffolds for tissue engineering of the urethra. BJU Int. 107 (2), 296-302 (2010).
  10. Tong, H. -. W., Wang, M. An investigation into the influence of electrospinning parameters on the diameter and alignment of poly(hydroxybutyrate-co-hydroxyvalerate) fibers. Journal of Applied Polymer Science. 120 (3), 1694-1706 (2011).
  11. Tong, H. -. W., Wang, M. Electrospinning of poly(hydroxybutyrate-co-hydroxyvalerate) fibrous tissue engineering scaffolds in two different electric fields. Polymer Engineering & Science. 51 (7), 1325-1338 (2011).
  12. Retzepi, M., Donos, N. Guided Bone Regeneration: biological principle and therapeutic applications. Clinical oral implants research. 21, 567-576 (2010).
  13. Moreau, J., Caccamese, J., Coletti, D., Sauk, J., Fisher, J. Tissue engineering solutions for cleft palates. Journal of oral maxillofacial. 65, 2503-2511 (2007).
  14. Yang, F., Both, S., Yang, X., Walboomers, X., Jansen, J. Development of an electrospun nano-apatite/PCL composite membrane for GTR/GBR application. Acta biomaterialia. 5, 3295-3304 (2009).
  15. Yoshimoto, H., Shin, Y., Terai, H., Vacanti, J. A biodegradable nanofiber scaffold by electrospinning and its potential for bone tissue engineering. Biomaterials. 24, 2077-2082 (2003).
  16. Telemeco, T., Ayres, C., Bowlin, G., Wnek, G., Boland, E., Cohen, N., Baumgarten, C., Mathews, J., Simpson, D. Regulation of cellular infiltration into tissue engineering scaffolds composed of submicron diameter fibrils produced by electrospinning. Acta biomaterialia. 1, 377-385 (2005).
check_url/kr/4172?article_type=t

Play Video

Cite This Article
Bye, F. J., Wang, L., Bullock, A. J., Blackwood, K. A., Ryan, A. J., MacNeil, S. Postproduction Processing of Electrospun Fibres for Tissue Engineering. J. Vis. Exp. (66), e4172, doi:10.3791/4172 (2012).

View Video