局所脳虚血への早期虚血耐性を誘導するために適切な前処理刺激として二国間の総頚動脈閉塞
Summary
証拠が蓄積され、その虚血プレコンディショニング（PC） – 脳の非損傷虚課題は – その後の損傷虚血への過渡保護を与える。我々はC57BL6 / Jマウスで一過性局所脳虚血（中大脳動脈閉塞、MCAOによって誘発）に早期に虚血耐性を（IT）を誘導するためのプレコンディショニング刺激として二国間の総頸動脈閉塞（BCCAO）を設立。
Abstract
証拠が蓄積され、その虚血プレコンディショニング – 脳への非損傷虚課題は – その後の損傷虚血への過渡保護を与える。我々はC57BL6 / Jマウスにおける一過局所脳虚血への早期虚血耐性を誘導するコンディショニング刺激として二国間の総頸動脈の動脈閉塞を確立しています。このビデオでは、我々はこの研究のために使用される方法のデモンストレーションを行います。
Introduction
虚血性脳卒中は、高い死亡率と莫大な社会経済的負担を1と疾患である。最近の数十年間を通して集中的な実験や臨床科学の努力にもかかわらず、急性虚血性脳卒中患者のための治療の選択肢は、2つは非常に限られたまま。それとは対照的に、先進国の高齢者の割合の増加は劇的に今後数十年間3で虚血性脳卒中患者の発生率と有病率が増加します。したがって、虚血性脳卒中患者における新たな治療戦略のための差し迫った必要性がある。
一つのアプローチは、有害な刺激に対処するために、脳の内因性の適応のメカニズムの更なる理解を得ることである。この脳由来神経も虚血プレコンディショニング（PC）または虚血耐性（IT）として知られており、脳に適用非損傷侵害刺激は、一時的な耐性を誘導する現象について説明しているその後の有害虚血4に対して。 IT早い、PC数時間後に数分以内に発生し、4を発生する数時間の待ち時間を必要とする、ITを遅らせ：ITは、2つの異なる時間ウィンドウで発生します。
これまでのところ、脳内のITの研究は、ITが遅れに焦点を当てている。ましては、ITの早期のメカニズムに知られています。本研究の目的は、適切なPCの刺激として、ITを遅らせ誘導する確立刺激誘導することで二国間の総頸動脈閉塞（BCCAO）を確立することである一過性局所脳虚血（中大脳動脈閉塞によって誘発される、MCAO）に対するITの早期C57BL6で/ Jマウス。
外科的処置（BCCAOとMCAO）の両方で、レーザードップラーフローメトリー（LDF）による脳血流のモニタリング（CBF）を行なった。
BCCAOを麻酔し、自発的に呼吸したマウスで行った。両方の総頸動脈（CCA）が暴露されたおよび60のために閉塞秒灌流の5分が続く。このBCCAO /再配列を2回繰り返した。手術後、マウスはすぐに回復し、機能障害の兆候を示さなかった。排除するために、上記のBCCAOプロトコルは、脳内の遅延細胞死には至らなかった、我々はBCCAO後TdTを媒介たdUTP-ビオチンニック末端標識（TUNEL）染色72時間（または偽手術）を実行した別のグループ。
MCAO 5-7げっ歯類では局所脳虚血の誘導のために広く確立されたモデルです。外科的処置は、標準操作手順（SOP）8を用いて行った。左CCAを露出させた後、シリコンで覆われたモノフィラメントことにより、前大脳動脈（ACA）までウィリスの円内に内頸動脈（ICA）を介して前進および遠位CCA、中大脳動脈の原点（に導入したMCA）が定義された期間のために閉塞していた。本研究では、我々通常、線条体及び大脳皮質の脳領域が関与するMCA領域における虚血性病変をもたらすMCAOの使用45分、。
我々の研究では、早期にITは、PCの刺激としてBCCAOを使用することの時間プロファイルを分析した。我々のデータは、BCCAO MCAOとの間の最適な時間遅延は、ITが30分であることを早期に誘導するために、示された。
このビデオでは、我々は両方の外科手術、 すなわち BCCAOとMCAOのデモンストレーションを行います。
Protocol
Representative Results
Discussion
我々の研究では、BCCAOの3つのシーケンスは、それぞれ1分間持続し、5分間の再灌流に続いて、IT早いを誘導するのに十分な虚血PCの刺激であることが示されている。
さらに、我々は、使用される前処理プロトコルは、特筆すべき術後合併症、脳、無死亡におけるアポトーシスの徴候で安全とマイナー侵襲的な処置であることを実証した。いくつかの異なった前処理プロト?…
Disclosures
The authors have nothing to disclose.
Materials
| Name of the instrument | Company | Catalogue number/model |
| Binocular surgical microscope | Zeiss | Stemi 2000 C |
| Light source for microscope | Zeiss | SteREO CL 1500 ECO |
| Heating pad with rectal probe | FST | 21061-10 |
| Stereotactic frame | David Kopf | Model 930 |
| Scissors | FST | 91460-11 |
| Dumont forceps #5 | FST | 11251-10 |
| Dumont forceps #7 | FST | 11271-30 |
| Mircovascular clamp | FST | 00398-02 |
| Clamp applicator | FST | 00072-14 |
| Springscissors | FST | 15372-62 |
| Needle holder | FST | 12010-14 |
| Needles | Feuerstein, Suprama | BER 562-20 |
| 5-0 silk suture | Feuerstein, Suprama | |
| 7-0 silk suture | Feuerstein,Suprama | |
| 8-0 silk suture | Feuerstein, Suprama |
References
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