Summary

قياس آلام جلدية اللمس في نموذج الفئران التهاب البروستاتا الجرثومي

Published: January 16, 2013
doi:

Summary

قد عدوى في البروستاتا يكون عاملا مساعدا في التوسط في آلام الحوض التهاب البروستات المزمن. وصفنا الإجراء لإعداد اللقاح البكتيري موحدة، تقطير من البكتيريا في مجرى البول من الفئران الذكور ومنهجية لقياس آلام جلدية في الفئران عن طريق اللمس مع مرور الوقت.

Abstract

Uropathogenic الإشريكية القولونية (UPEC) هي مسببات الأمراض التي تلعب دورا هاما في التهابات المسالك البولية والتهاب البروستاتا الجرثومي 1. لقد أظهرنا مؤخرا أن UPEC دورا هاما في بدء الألم الحوضي المزمن سمة من سمات التهاب البروستاتا المزمن / متلازمة آلام الحوض المزمنة (CP / CPPS) 3،4. يمكن للعدوى في البروستاتا بواسطة UPEC ذات الصلة سريريا بدء وتأسيس الألم المزمن من خلال آليات التي قد تنطوي على تلف الأنسجة والشروع في آليات المناعة الذاتية 5.

وثمة تحد لفهم الآلية المرضية لUPEC في البروستاتا هو عدم إمكانية الوصول النسبي للغدة البروستاتا للتلاعب. تستخدم لدينا سبق وصفها طريقة العدوى داخل الاحليل 6 إلى تقديم سلالة من UPEC السريرية في الفئران الذكور تؤسس عدوى الصاعد من البروستاتا. هنا، نحن تصف بروتوكولات لدينا لتوحيد باcterial اللقاح 7 فضلا عن إجراء القسطرة لتخدير الفئران الذكور تقطير من البكتيريا.

ويتميز في المقام الأول CP / CPPS عن وجود آلام جلدية اللمس 4. واستند اختبار السلوك على مفهوم فرط التألم الجلدية الناجمة عن الألم الحشوي المشار 8-10. التركيز في الأنسجة الحشوية العصبي يقلل الألم الجلدي عتبات السماح للاستجابة للمؤثرات مبالغ فيها غير مؤلمة عادة (آلام جلدية). استخدام القوة الطبيعي أن الجلد نتيجة في الاستجابات الشاذة التي تميل إلى الزيادة مع شدة الألم الحشوي الأساسي. وصفنا المنهجية في NOD / ShiLtJ الفئران التي تستخدم الألياف فري فون لقياس آلام جلدية مع مرور الوقت عن طريق اللمس استجابة لعدوى البكتيريا واحدة مع UPEC.

Protocol

1. البكتيريا التحضير للتلقيح ماوس يجب القيام بما يلي في ظل ظروف معقمة. تأخذ واحدة 17 × 100 ملم أنابيب البولي بروبلين مع قبعات وإضافة 3 مل من وسائل الإعلام لوريا الطازجة (LB) مرق. نصائح با…

Representative Results

درسنا NOD / ShiLtj وC57BL/6J ذكور الفئران لوجود الألم المزمن على عدوى بكتيرية. وتغرس الفئران الذكور (5 إلى 7 أسابيع من العمر) بمحلول ملحي أو البكتيريا في مجرى البول (الشكل 1). أدى التحفيز الميكانيكي للمنطقة الحوض مع خيوط فري فون من الفئران C57BL/6J المالحة وغرست UPEC الفئر?…

Discussion

التهاب في البروستاتا مع الماوس UPEC يسمح للفي النمذجة الجسم الحي من الأحداث التي قد تكون لهم علاقة في التسبب في التهاب البروستاتا الجرثومي، CP / CPPS أو كحدث المهيئة في الالتهابات المزمنة. الأساليب المذكورة لإعداد البكتيرية وتقطير التعادل على مجموعة كبيرة من ال…

Disclosures

The authors have nothing to disclose.

Acknowledgements

وأيد هذا البحث من قبل منحة 1K01DK079019A2 (PT) من المعاهد الوطنية للصحة / NIDDK.

Materials

Name of the reagent Company Catalogue number
Culture tubes BD Falcon 352059
LB Broth Miller EMD EM1.10285.0500
Nalgene Centrifuge Tubes Thermo 3118-0050
Isoflurane Butler Schein NDC 11695-6776-1
Catheter needle 30G Hamilton 91030
PE10 tubing BD intramedic 427400
Von Frey Filaments Stoelting 58025-31

References

  1. Yamamoto, S. Molecular epidemiology of uropathogenic Escherichia coli. Journal of infection and chemotherapy official journal of the Japan Society of Chemotherapy. 13, 68-73 (2007).
  2. Rudick, C. N., et al. Uropathogenic Escherichia coli induces chronic pelvic pain. Infect. Immun. 79, 628-635 (2011).
  3. Pontari, M. A., Ruggieri, M. R. Mechanisms in prostatitis/chronic pelvic pain syndrome. The Journal of urology. 172, 839-845 (2004).
  4. Schaeffer, A. J. Clinical practice. Chronic prostatitis and the chronic pelvic pain syndrome. The New England journal of medicine. 355, 1690-1698 (2006).
  5. Rudick, C. N., Schaeffer, A. J., Thumbikat, P. Experimental autoimmune prostatitis induces chronic pelvic pain. American journal of physiology. Regulatory, integrative and comparative physiology. 294, R1268-R1275 (2008).
  6. Elkahwaji, J. E., Ott, C. J., Janda, L. M., Hopkins, W. J. Mouse model for acute bacterial prostatitis in genetically distinct inbred strains. Urology. 66, 883-887 (2005).
  7. Hultgren, S. J., Porter, T. N., Schaeffer, A. J., Duncan, J. L. Role of type 1 pili and effects of phase variation on lower urinary tract infections produced by Escherichia coli. Infect. Immun. 50, 370-377 (1985).
  8. Jarrell, J., Giamberardino, M. A., Robert, M., Nasr-Esfahani, M. Bedside testing for chronic pelvic pain: discriminating visceral from somatic pain. Pain research and treatment. 2011, 692102 (2011).
  9. Jarrell, J. Demonstration of Cutaneous Allodynia in Association with Chronic Pelvic Pain. J. Vis. Exp. (28), e1232 (2009).
  10. Giamberardino, M. A., et al. Viscero-visceral hyperalgesia: characterization in different clinical models. Pain. 151, 307-322 (2010).
  11. Laird, J. M., Martinez-Caro, L., Garcia-Nicas, E., Cervero, F. A new model of visceral pain and referred hyperalgesia in the mouse. Pain. 92, 335-342 (2001).
  12. Laird, J. M., Souslova, V., Wood, J. N., Cervero, F. Deficits in visceral pain and referred hyperalgesia in Nav1.8 (SNS/PN3)-null mice. J. Neurosci. 22, 8352-8356 (2002).
  13. Chaplan, S. R., Bach, F. W., Pogrel, J. W., Chung, J. M., Yaksh, T. L. Quantitative assessment of tactile allodynia in the rat paw. Journal of neuroscience. 53, 55-63 (1994).
  14. Schaeffer, A. J., Schwan, W. R., Hultgren, S. J., Duncan, J. L. Relationship of type 1 pilus expression in Escherichia coli to ascending urinary tract infections in mice. Infect. Immun. 55, 373-380 (1987).
  15. Boehm, B. J., Colopy, S. A., Jerde, T. J., Loftus, C. J., Bushman, W. Acute bacterial inflammation of the mouse prostate. The Prostate. 72, 307-317 (2012).
  16. Rivero, V. E., Cailleau, C., Depiante-Depaoli, M., Riera, C. M., Carnaud, C. Non-obese diabetic (NOD) mice are genetically susceptible to experimental autoimmune prostatitis (EAP). Journal of autoimmunity. 11, 603-610 (1998).
  17. Pakarainen, T., Zhang, F. P., Makela, S., Poutanen, M., Huhtaniemi, I. Testosterone replacement therapy induces spermatogenesis and partially restores fertility in luteinizing hormone receptor knockout mice. Endocrinology. 146, 596-606 (2005).
  18. Taguchi, O., Kojima, A., Nishizuka, Y. Experimental autoimmune prostatitis after neonatal thymectomy in the mouse. Clinical and experimental immunology. 60, 123-129 (1985).

Play Video

Cite This Article
Quick, M. L., Done, J. D., Thumbikat, P. Measurement of Tactile Allodynia in a Murine Model of Bacterial Prostatitis. J. Vis. Exp. (71), e50158, doi:10.3791/50158 (2013).

View Video