Medição da alodinia táctil em um modelo murino de prostatite bacteriana
Summary
Infecção da próstata pode ser um fator que contribui na mediação dor pélvica na prostatite crônica. Descreve-se o processo para a preparação do inoculo bacteriano padronizado, a instilação de bactérias para dentro da uretra de ratos machos e metodologia para medir a alodinia táctil em ratos ao longo do tempo.
Abstract
Escherichia coli uropatogênica (UPEC) são patógenos que desempenham um papel importante em infecções do trato urinário e prostatite bacteriana 1. Temos mostrado recentemente que UPEC têm um papel importante na iniciação da dor pélvica crônica 2, uma característica de prostatite crônica / síndrome de dor pélvica crônica (CP / CPPS) 3,4. Infecção da próstata por UPEC clinicamente relevante pode iniciar e estabelecer a dor crónica, através de mecanismos que podem envolver danos nos tecidos e a abertura dos mecanismos de auto-imunidade 5.
Um desafio para a compreensão da patogénese de UPEC na próstata é a relativa inacessibilidade da glândula da próstata a manipulação. Utilizamos um método previamente descrito infecção intra-uretral 6 para proporcionar uma estirpe clínica de UPEC em ratinhos macho estabelecendo assim uma infecção ascendente da próstata. Aqui, descrevemos nossos protocolos para padronizar a bacterial inoculo 7, bem como o procedimento para a cateterização anestesiados ratos machos por instilação de bactéria.
CP / CPPS é essencialmente caracterizada pela presença de alodinia táctil 4. Testes de comportamento foi baseada no conceito de hiperalgesia cutânea resultante referidas 8-10 dores viscerais. Um foco irritável em tecidos viscerais reduz o limiar da dor cutâneas permitindo uma resposta exagerada a normalmente não estímulos dolorosos (alodinia). Aplicação de uma força normal para a pele, em resultado respostas anormais que tendem a aumentar com a intensidade da dor visceral subjacente. Descrevemos metodologia em NOD / ShiLtJ ratos que utilizam fibras de von Frey para quantificar alodinia táctil ao longo do tempo em resposta a uma única infecção com bactérias UPEC.
Protocol
Representative Results
Discussion
Infecção da próstata do rato com UPEC permite a modelagem em vivo de eventos que podem estar envolvidos na patogénese da prostatite bacteriana, CP / CPPS ou como um evento de predisposição em inflamação crónica. Os métodos descritos para a preparação bacteriana e empate instilação em cima de um grande corpo de literatura sobre modelos UPEC em infecção do trato urinário feminino 7,14. O modelo tem grande aplicabilidade para o estudo da patogênese, testando vacinas candidatas potencia…
Disclosures
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
Esta pesquisa foi apoiada pela concessão 1K01DK079019A2 (PT) do NIH / NIDDK.
Materials
| Name of the reagent | Company | Catalogue number |
| Culture tubes | BD Falcon | 352059 |
| LB Broth Miller | EMD | EM1.10285.0500 |
| Nalgene Centrifuge Tubes | Thermo | 3118-0050 |
| Isoflurane | Butler Schein | NDC 11695-6776-1 |
| Catheter needle 30G | Hamilton | 91030 |
| PE10 tubing | BD intramedic | 427400 |
| Von Frey Filaments | Stoelting | 58025-31 |
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