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방법 논문

상처 치유의 생쥐 모델

68K 조회수

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DOI:

10.3791/50265

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2013년 5월 28일

이 논문에서

요약

생리와 병리 설정에서 치료 화합물을 평가하는 데 사용할 수있는 피부 상처 치유의 쥐 모델.

초록

상처 치유 및 복구는 인간의 삶에서 발생하는 가장 복잡한 생물학적 과정이다. 부상 후, 여러 생물 학적 경로가 활성화됩니다. 예를 들어, 당뇨병 환자에서 발생하는 손상 상처 치유, 같은 절단 등의 심각한 불리한 결과를 초래할 수 있습니다. 상처 복구를 촉진 새로운 에이전트를 개발하기 위해 증가 자극 그러므로 있습니다. 이러한 테스트는 이러한 종종 비실용적 돼지와 같은 큰 동물 모델에 국한되어 있습니다. 그들은 경제적 인 기계적인 조사를 허용 유전자 조작, 의무이기 때문에 쥐, 이상적인 전임상 모델을 나타냅니다. 그러나, 그것은 주로 수축을 통해 발생할 때 마우스 치유가 인간의 근본적으로 다른 상처. 우리의 생쥐 모델은 상처 주위에 부목을 통합하여이를 극복한다. 상처를 부목으로 복구 프로세스가 긴밀를 반영 상피, 세포 증식 및 혈관 신생, 그때 의존인간의 상처 치유의 생물학적 처리합니다. 일관성과 치료를 필요로하는 반면,이 쥐 모델은 복잡한 수술 기법을 포함, 예를 들어, 혈관 신생을 촉진하거나 염증을 억제 할 수 유망한 에이전트의 강력한 테스트를 할 수 없습니다. 두 개의 상처가 준비되어 더욱이, 각각의 마우스 시험 화합물과 같은 동물에 차량 제어 모두의 응용 프로그램을 사용, 자신의 제어 역할을합니다. 결론적으로, 우리는 인간의 그것과 비교할 상처 치유의 실제, 배우기 쉬운, 강력한 모델을 보여줍니다.

서론

손상된 상처 치유 중요한 병적 상태와 세계적으로 사망에 대한 책임이며, 이는 당뇨병 1,2의 환자에 특히 사실이다. 인간, 상처 치유는 3 중복 의미가있는 프로세스의 연속이다. 직후에 남긴 상처, 염증 프로세스가 시작됩니다. 염증 세포는 세포 증식, 이동 및 혈관 신생 과정을 촉진 인자를 놓습니다. 재 상피화 및 새로운 조직의 형성 이후에 같은 콜라겐 매트릭스 단백질의 세포 사멸하고 다시 조직을 모두 수반 개조의 단계가있다.

상처 치유의 복잡성은 현재 체외에서 복제 된이 동물 모델의 사용을 필요로 할 수 없습니다. 지금까지, 상처 치유 연구는 치료 과정은 동일하고 인간에게 비교를 보장하기 위해, 같은 돼지 같은 큰 동물 모델에 한정되어있다. 그러나 큰 애니을 사용하여이러한 연구를위한 LS 집에 어려울 항상 실제 4 수 없습니다 수 있습니다. 실험실 쥐 쉽게 유전자 5-7 역학적 조사 조작 할 수있는 경제적 인 동물 모델을 나타냅니다. 그러나 생쥐 상처 수축 8의 과정 차적으로 인해 인간의 다르게 치료. 이것은 부분적으로 인간에서 크게 결석 panniculus carnosus라는 광범위한 피하 횡문근 층 때문입니다. 마우스,이 ....

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프로토콜

1. 부목​​ 및 폐색 드레싱의 준비

  1. 0.5 mm 두께의 실리콘 시트 및 사용 가위 나 실리콘 디스크를 만들 수있는 생검 펀치에 10mm 원을 설명합니다.
  2. 센터 10 밀리미터 원의 중간에 5mm 생검 펀치 부목으로 사용되는 디스크처럼 - "도넛"을 형성하는 구멍을 만들기 위해 단단히 누르십시오.
  3. 이러한 Opsite 및 원형 드레싱을 만들 때 사용하는 가위로 투명 폐색 드레싱에 10mm 원을 설명합니다.

2. 실험 동물

  1. 수행 할 모든 실험 동물 윤리위원회의 승인을 얻습니다.
  2. 상업 개종 (예를 들어, 잭슨 연구소)에서 8 주 이전 (22~26g) 남성 C57BL/6J 마우스를 사용합니다.
  3. 21의 표준 조건에서 쥐를 유지 ° C와 음식과 물을 무료로 액세스 할 수있는 12 시간 빛 어두운주기.
  4. (선택 사항) : 당뇨병은 알약 복강 인제로 6~7주 오래된 마우스에서 유도 될 수정기적으로 혈당 모니터링 (AccuChek glucometer에)에 의해 확인 된 고혈당과 165 ㎎ / ㎏ 스트렙토 조 토신 (구연산 버퍼, 산도 4.5)의 ction의. 당뇨병 쥐 다뇨가있을 수 있습니다 그래서 그들의....

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결과

(주 0 직경 / 일 X 지름) - 상처 폐쇄 곡선은 상처의 평균 직경을 계산하여 백분율, 즉 100로 결과를 표현 의해 결정됩니다. 이 실험에서 치료 화합물 (또는 차량 제어)는 상처에 매일 적용되었다. 치료 화합물을 크게 가속 상처 봉합 (그림 3). 그것은 부목의 제거가 빠른 상처의 수축 (그림 2R)으로 이어질 인간의 관찰 상처 치유의 패턴에서 분기되므로 부목은 실험 기간 동안 유지해야하는 것이 중요하다.

figure-results-1
그림 1. 쥐 상처 치유 모델의 도식 표현.이

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토론

이 피부 상처 치유의 실험 쥐 모델입니다. 이 모델의 중요한 특징은 인간의 발생 과정이 유사하고, 재 상피화 및 새로운 조직의 형성이 발생할 수 있도록 상처 수축을 방지하는 실리콘 부목의 사용이다. 이 모델은 다목적 생리적 및 병리 모두 (예를 들면 당뇨병) 설정에서 상처 치유를 평가하는 데 사용할 수 있습니다. 모델은 경제적 인 환경에서 잠재적 인 상처 치유 나 혈관 치료를 평가하는 데 사용할 수 있습니다. 자신의 컨트롤로 작동하는 각각의 마우스로, 동물의 수는 최소화됩니다. 이 모델에 필요한 수술 기법 따라서이 모델은 널리 비교적 적은 수술 경험을 가진 사람들에 의해 사용될 수 있습니다, 매우 정교한하지 않습니다.

그것은 부목이 적절하게 준수하고 봉합과 피부에 정박하는 것이 필수적이며, t 그 재현성과 정확한 정량을 보장하기 위해여기에 두 개의 상처를 만드는 사이의 지연을 최소화입니다. 쥐 상처의 성향이 빠르게 때문에 마우스 부목을 매일 모니터링을 필요로 .......

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공개 사항

저자는 공개 아무것도 없어.

감사의 글

저자는 국민 건강과 호주의 의학 연구위원회 (NHMRC) (: 632512 프로젝트 부여 ID)의 자금 지원을 인정하고 싶습니다. 루이스 던은 국립 심장 재단 경력 개발 원정대에 의해 NHMRC 초기 경력 친목과 크리스티나 Bursill에 의해 지원되었다.

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재료

이 논문에 사용된 재료 목록
이름회사카탈로그 번호댓글
프레스 투 씰(Press-to-seal) 실리콘 시트 0.5mm 두께InvitrogenP18178외경 1cm, 내경 0.5cm의 "도넛"으로 절단
생검 펀치 5mmSteifelBC-B1-0500절제할 상처 부위의 윤곽을 그리려면
Vannas 가위 8.5cm 곡선세계 정밀 기기 501232상처 절개 및 절제용
Dumonte #7b 펑크, 11cmWorld Precision Instruments501302절개 및 절개 시 피부를 잡기 위해
Graefe 집게, 톱니 모양 10cmWorld Precision Instruments14142피부에 실리콘 스플린트 부착을 돕기 위해
바늘 홀더, 부드러운 턱, 곡선형, 12.5cmWorld Precision Instruments14132
Malis 집게, 매끄럽고 직선, 12cmCodman and Shurtleff, Inc (J& 앰프; J)80-1500실리콘 링을 피부에 봉합하기 위해
통치자, 0.5mm 그라데이션n/a
캘리퍼스 0.25mm 그라데이션Duckworth and Kent9-653상처 부위
측정 Opsite FlexiFix 투명 접착 필름. 10cm x 1mSmith & 조카66030570
Rimadyl (Carprofen)Pfizer462986

참고문헌

  1. Sen, C. K., et al. Human skin wounds: a major and snowballing threat to public health and the economy. Wound Repair. 17, 763-771 (2009).
  2. Sen, C. K. Wound healing essentials: let there be oxygen. Wound Repair Regen. 17, 1-18 (2009).
  3. ....

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재인쇄 및 허가

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