Summary

성인 마우스 정맥 ​​고혈압 모델 : 외부 경정맥 정맥 문합에 경동맥.

Published: January 27, 2015
doi:

Summary

우리는 성인 마우스에서 대뇌 정맥 고혈압 안정적인 모델을 생성하는 방법을 설명한다. 이 모델은 광범위 래트에서 설명되고 시험되었다. 마우스에서이 새로운 상대 유전자 변형 동물을 사용할 수있는 가능성을 열어하여 모델의 애플리케이션을 넓게.

Abstract

뇌 동정맥 기형 동정맥 루의 병태 생리의 이해는 동물 모델 덕분에 개선했다. 경동맥 (CCA)와 외부 경정맥 (EJV) 사이에 인공 루를 만드는 쥐 모델은 널리 설명하고 기술적으로 가능 입증되었다. 이 구조는 일관성있는 대뇌 정맥 고혈압 (CVH)을 유발, 따라서 형성, 임상 증상, 뇌 동정맥 기형 및 경막에서 avfs의 예후에 정맥 고혈압의 기여를 공부하고있었습니다. 등가 마우스 모델은 거의 설명하지 않았습니다 및 누공의 협착에 문제를 보여 주었다. 설립 쥐 모델은 이러한 뇌 혈관 질환에 대한뿐만 아니라 병태 생리의 연구뿐만 아니라 잠재적 인 유전자 치료를 허용합니다.

우리는 마우스의 내구성 두개 내 정맥 고혈압을 생산 동정맥루의 모델을 제시한다. 미세 수술 문합 오뮤린 및 f를 CCA EJV 인해 소형의 해부학하기 어려울 수 있고, 종종 비 특허 누관을 초래한다. 이 단계별 프로토콜에서 우리는이 과정 중에 발생하는 모든 중요한 문제를 해결. 대신 봉합 11-0 10-0을 이용 노광시의 과도한 혈관 수축을 방지하고 신중하게 계획 측 단문 합을 만드는 중요한 단계 중 일부이다. 이 방법은 미세 수술 기술 진보와 쥐 당량,이 지속적으로 개발 될 수있는 더 긴 학습 곡선이 필요하지만.

이 새로운 모델은 뇌 동정맥 기형 및 경막에서 avfs을 연구하는 데 유용 입증되었습니다 이전에 확립 된 실험 시스템과 유전자 변형 마우스 기술을 통합 할 수 있도록 설계되었습니다. 트랜스 제닉 마우스를 사용할 수있는 가능성을 열어, 유효한 모델의 광범위한 스펙트럼이 달성 될 수 있고, 유전자 치료는 또한 테스트 할 수있다. 실험 구조는 또한 상기 오티의 연구에 적용 할 수있다편두통과 같은 정맥 고혈압, 과도 글로벌 기억 상실, 과도 단안 실명 관련 그녀의 뇌 혈관 질환

Introduction

대뇌 정맥 고혈압 동물 모델은 뇌 동정맥 기형 동정맥 루 1-7의 병태 생리에 대한 이해의 핵심 도구로 증명했다. 가장 널리 사용은 총 경동맥 (CCA) 및 래트에서 일관된 1,8-10 대뇌 정맥 고혈압 (CVH)을 유발 외부 경정맥 (EJV) 사이 인공 누공 통해 생성 쥐 모델이다. 등가 생쥐 모델은 서로 다른 트랜스 제닉 마우스 균주를 사용할 수있는 가능성을 열어,뿐만 아니라 이러한 병태 생리 아니라 뇌 혈관 질환에 대한 유전자 치료에 잠재적 인 추가 연구를 허용한다. 또한, 실험은 상기 구조물이 마우스 모델을 구축 H 편두통과 같은 정맥 고혈압, 일시적인 글로벌 건망증, 과도 단안 실명 (11) 그러나, 이전의 시도와 관련된 기타 뇌 혈관 질환의 연구에 적용 할 수있다아베 인해 소형의 해부학 5,12-에 누공의 개통의 어려움을 보여 주었다. 여기서 우리는 장기적인 특허 루와 마우스의 내구성 정맥 고혈압으로 변환 쥐 CCA와 EJV의 성공적인 문합을위한 단계별 프로토콜을 설명합니다.

Protocol

1. 마우스를 준비 이소 플루 란 가스와 마우스에서 전신 마취를 유도한다. 통증 관리 복강 brupenorphine 0.15 ml를 주입한다. 마취 레벨이 마우스의 발 샤프트로 만족스러운 경우 계속하기 전에 확인합니다. 접착 테이프로 고정 사지와 지느러미 드러 누움에 마우스를 넣습니다. 목의 머리와 가위로 가슴 상부를 제거합니다. 피하 주사를 통해 수술 절차 동안 수화 마우스를 유지 0.9 % 식염…

Representative Results

모델의 성공적인 결과는 쥐의 뇌 정맥 고혈압을 유도하는 특허 동정맥루입니다. 모델을 검증하기 위해 우리는 처음 수술 후 2, 3, 4 주에 쥐의 sagital 동에있는 두개 내 정맥압을 측정 하였다. 6 다른 생쥐마다 투여군. 부비동 압력 군 8.8 ± 1.2 mmHg로는 수술 후 2 주 정도를 측정 하였다. 삼주 수술 후 측정 된 6 마우스에서, 부비동 압력은 4.7 ± 1.4 mmHg로했다. 수술은 3.9 ± 0.6 mmHg로 (도 6)의 동…

Discussion

지속적인 뇌 정맥 고혈압이 밀접하게 더 심한 임상 증상 및 경막에서 avfs 뇌 동정맥 기형 (3) 환자의 불량한 예후와 관련이있다. CVH의 이러한 효과는 널리 쥐 모델 1,2,8에서 연구되고있다. 마우스에 상당 모델 궁극적 정맥 고혈압의 병인 및 경막 AVF 뇌 AVM와의 관계에 관련된 분자 경로의 분석을 허용하는 유전자 변형 동물의 사용을 허용한다.

여기서, 우리는 엔…

Disclosures

The authors have nothing to disclose.

Acknowledgements

이 프로젝트는 부분적으로 윌리엄 L.Young, 윌리엄 L.Young과 후아 수, 후아 SU에 R21 NS070153에 P01의 NS44155에 에스 펜 워커 NIH T32 GM008440, R01 NS27713에 의해 후아 수에 미국 심장 협회 (American Heart Association) AHA 10GRNT3130004에 의해 지원됩니다. 박사 아나 로드리게스 – 에르난데스는 "Obra는 사회 La Caixa는"의 연구비 지원

Materials

10-0 Sterile Microsuture Arosurgical Ic. VT5A010Q10
11-0 Sterile Microsuture Arosurgical Ic VT4A00N07
DUROTIP Scissors Aesculap BC210R
Micro-Adson Tissue Forceps Aesculap BD510R
Microscissors Aesculap OC496R
Micro Forceps #5 Jewelers Aesculap BD331R
Angled Jewelers Forceps Aesculap BD329R
Micro Suture Forceps Aesculap BD338R
DUROGRIP Needle Holder Aesculap BM009R

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Yang, S., Rodriguez-Hernandez, A., Walker, E. J., Young, W. L., Su, H., Lawton, M. T. Adult Mouse Venous Hypertension Model: Common Carotid Artery to External Jugular Vein Anastomosis.. J. Vis. Exp. (95), e50472, doi:10.3791/50472 (2015).

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