Clonación molecular

Clonación molecular es un conjunto de métodos que se utilizan para introducir ADN recombinante en un vector – un portador de las moléculas de ADN que se replican fragmentos de ADN recombinante en los organismos huésped. El fragmento de ADN, que puede ser un gen, puede ser aislado de un espécimen de procariota o eucariota. Tras aislamiento del fragmento de interés, o insertar, el vector y el inserto deben ser corte con enzimas de restricción y purificados. Las piezas purificadas se unen entre sí, aunque una técnica llamada ligadura. La enzima que cataliza la reacción de la ligadura es conocida como ligasa.

Este video explica los principales métodos que se combinan, en tándem, por el procedimiento de clonación molecular en general. Se discuten los aspectos críticos de la clonación molecular, como la necesidad de la estrategia de clonación molecular y cómo hacer un seguimiento de colonias de bacterias transformadas. También se mencionan los pasos de verificación, como comprobación de plásmido purificado para la presencia del inserto con resúmenes de la restricción y la secuenciación.