Summary
Ventrículo direito (VD) disfunção é fundamental para a patogênese da doença cardiovascular, ainda metodologias limitados estão disponíveis para a sua avaliação. Recentes avanços em ultra-sonografia fornecer uma opção não invasiva e precisas para o estudo RV longitudinal. Aqui, temos um método ecocardiográfico passo-a-passo através de um modelo murino de sobrecarga de pressão RV detalhes.
Abstract
Emergentes dados clínicos suportam a noção de que a disfunção do VD é fundamental para a patogênese da doença cardiovascular e insuficiência cardíaca 1-3. Além disso, a RV é significativamente afectada em doenças pulmonares, como a hipertensão arterial pulmonar (HAP). Além disso, o RV é extremamente sensível a patologias cardíacas, incluindo do ventrículo esquerdo (LV) disfunção, doença valvular ou RV enfarte 4. Para compreender o papel da RV na patogênese de doenças cardíacas, um método confiável e não invasivo para acessar o RV estrutural e funcionalmente é essencial.
A metodologia ecocardiografia transtorácica não-invasiva (TTE) com base foi estabelecido e validado para monitorar mudanças dinâmicas na estrutura e função do VD em ratos adultos. Para impor estresse RV, empregamos um modelo cirúrgico de constrição da artéria pulmonar (PAC) e mediram a resposta RV ao longo de um período de 7 dias usando uma microfilmagem de ultra-som de alta freqüênciasistema. Sham operados ratinhos foram usados como controlos. As imagens foram adquiridas em ratos levemente anestesiados na linha de base (antes da cirurgia), dia 0 (imediatamente após a cirurgia), dia 3, e no dia 7 (pós-cirurgia). Os dados foram analisados off-line utilizando software.
Várias janelas acústicas (B, M e modos de cor de Doppler), que podem ser obtidos de forma consistente em camundongos, permitiram a medição confiável e reprodutível da estrutura RV (incluindo a espessura da parede do VD, diastólica final e dimensões sistólico final) e de função ( mudança fracionária área, fração de encurtamento, PA pico de velocidade e gradiente de pressão de pico) em ratos normais e seguindo PAC.
Usando este método, o gradiente de pressão resultante do CAP foi medido com precisão, em tempo real, utilizando o modo de Doppler a cores e é comparável com as medições de pressão directos realizados com um Millar de alta fidelidade microponta cateter. Tomados em conjunto, estes dados demonstram que as medições obtidas a partir de vários RV complvisualizações imentary usando ecocardiografia são confiáveis, reprodutíveis e pode fornecer informações sobre a estrutura e função do VD. Este método permitirá uma melhor compreensão do papel da disfunção cardíaca RV.
Introduction
Historicamente, a avaliação prognóstica da insuficiência cardíaca tem incidido sobre a LV, que é fácil de imagem através da ecocardiografia. Numerosos estudos sobre a estrutura e função de VE por ecocardiografia levaram ao estabelecimento dos valores normais para a estrutura e função LV 1,5,6. Medidas do tamanho do VE e função sistólica obtidos a partir de imagens bidimensionais e Doppler a cores são de grande importância, pois permitem delimitação visual de compartimentos e geometria em grande detalhe para o LV 7. M-Mode é muitas vezes usado para medir dimensões do VE e fração de encurtamento (FS) em camundongos. Inter-observador ea variabilidade intra-observador são baixas para medições de diâmetro que utilizam este modo, mas medições de espessura de parede tendem a ser bastante variável 7. Doppler pulsado com a cor (ou PW Doppler colorido) tem sido utilizado para avaliar a regurgitação valvular 8,9.
Semelhante ao LV, a RV tem um papel importante e é um p significativoredictor de morbidade e mortalidade em pacientes que sofrem com 1,7,10 doença cardiopulmonar. No entanto, a avaliação ecocardiográfica da RV é inerentemente difícil devido à sua forma complexa 5,11 e sua posição retroesternal que bloqueia as ondas de ultra-som 8,9. RV é uma estrutura em forma de crescente envolvimento em torno da LV e tem uma anatomia complexa, com paredes finas, que estão acostumados a baixa pressão e resistência a vasculatura pulmonar 6. Para vencer a resistência vascular elevada (PVR), a RV aumenta pela primeira vez em tamanho e sofre hipertrofias. Em doenças crônicas, como hipertensão pulmonar ou doença vascular pulmonar, RV sofre dilatação progressiva, acabou resultando na deterioração da função sistólica e diastólica 4,5,10.
A ecocardiografia desempenha um papel importante na triagem e diagnóstico de HAP, apesar de algumas limitações presentes em sua capacidade de diagnóstico clínico. A principal vantagem deTTE reside em que é não-invasiva e de que ela pode ser realizada em sedados, ou até mesmo os animais conscientes 9. TTE também fornece uma estimativa razoável de pressões PA, bem como uma avaliação contínua de mudanças na estrutura e função 12,13 RV. Devido aos avanços técnicos na TTE, que incluem o desenvolvimento de sondas mecânicas de alta freqüência, permitindo resolução axial de cerca de 50 mm a uma profundidade de 5-12 mm, altas taxas de quadros (mais de 300 quadros / seg), e altas taxas de amostragem , o ecocardiograma é uma ferramenta de escolha para a imagem da rápida contratação de pequeno porte rato coração 8,11.
Monitoramento longitudinal da função do VD utilizando vários pontos de vista, incluindo 2-dimensional (2D) eixo curto e longo prazo, modo M e janelas acústicas Doppler fornecer informações complementares de anatomia e função do VD. Coletivamente, essa metodologia permite a avaliação longitudinal completa de hemodinâmica RV na fisiologia e na definição patológica Aqui, nós fornecemos uma metodologia detalhada passo-a-passo de usar TTE não-invasivo para a caracterização anatômica RV e alterações funcionais secundárias ao PAC em camundongos.
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Protocol
Procedimento Cirúrgico
- Obter oito semanas de idade, machos C57BL / 6 e aclimatar por uma semana antes de quaisquer procedimentos experimentais são realizados.
- Antes da imagiologia, oclusão da artéria pulmonar é realizada como descrito anteriormente 14, em conformidade com as directrizes AVMA e aprovados protocolos IACUC.
Imagens ecocardiográficas Aquisição e Medidas
Todas as abreviaturas utilizadas encontram-se resumidos na Tabela 1.
1. Paraesternal eixo longo (Plax) M Modo de Ver obter RV Câmara Dimension, Fractional encurtamento (FS) e RV Espessura da parede
- Use configuração Modo B para obter uma LV vista eixo longo paraesternal completo. Com o animal deitado em decúbito dorsal sobre a plataforma (ver Nota 6.1. E 6.2.), Posicione a sonda de ultra-som de 40 MHz (MS550D) sobre o animal com cerca de 30 ° de ângulo anti-horário para a linha paraesternal esquerda com o entalhe apontando direção caudal (
- Uma vez que os marcos próprios (RV, LV, MT, Ao, LA) como ilustrado nas Figuras 2A e 2B são claramente visualizadas, mude para M Mode. Uma linha do indicador irá aparecer na tela na configuração M Mode. A linha deve ser posicionada para passar a maior parte da câmara de RV utilizando Ao como marco (Figuras 2A e B).
- Neste ponto de vista, a parede da RV e IVS deve ser claramente visível. Certifique-se que a profundidade de foco fica no centro da câmara de RV. Registre os dados com armazenamento de cine para medição dimensão câmara RV, FS e espessura da parede do VD fora de linha. Exemplos de imagens Modo M são mostradas nas Figuras 2C e 2D. (Ver Nota 6.3.)
2. Paraesternal eixo curto Vista em MidNível papilar obter Fractional Mudanças Área (FAC)
- A partir da posição descrita acima (Figura 1A), mudar para o modo B e vire a sonda de 90 ° no sentido horário para obter a visão paraesternal eixo menor (Figura 1B). Dica da sonda ligeiramente ao longo do eixo-x da sonda para evitar a vista obstrutiva do esterno.
- Mover ligeiramente para cima e para baixo ao longo do eixo-y da sonda para obter o nível médio papilar (Veja Nota 6.4.)
- Nesta visão, os músculos papilares estão normalmente localizados na posição 2 e 5 horas (Figura 3).
3. Paraesternal eixo curto Vista em Valva Aórtica Nível (RV aórtica PSAX Nível) para obter RV Espessura da parede e PA pico de velocidade
- A partir da posição descrita acima (Figura 1B), mover a sonda no eixo-y para crânio até que a secção transversal da válvula aórtica mostra no centro da janela.
- De saída do ventrículo direito tract (VSVD) deve ser visível na parte superior como uma estrutura em forma de crescente com válvula tricúspide separa a RV de RA como ilustrado nas Figuras 4A e B 2. Grave os dados usando loja cine para a medição da espessura da parede do VD fora de linha. (Ver Nota 6.5.)
- Permanecer na mesma posição. (Ver Nota 6.6.)
- Mude para o modo Doppler a cores e posicionar o amarelo PW-frustradas linha paralela à direção do fluxo no vaso. Note-se que as cores azul e vermelho indicam fluxo de distância de e para a sonda, respectivamente (Figuras 4C e 4 D).
- Coloque o cursor PW na ponta dos folhetos da válvula pulmonar. (Ver Nota 6.7.) Gravar dados usando loja cine. Medir PA velocidade de pico fora de linha.
4. Modificado paraesternal longo eixo Vista da RV e PA obter PA pico de velocidade
- Continue na configuração Modo B, posicionar a sonda (MS550D ou MS250) À linha paraesternal direita (Figura 1C) e, lentamente, título da sonda cerca de 30-45 ° de ângulo sobre o eixo-y da sonda (Figura 1D) em direção ao peito dos ratos para visualizar claramente a travessia PA sobre aorta como ilustrado nas Figuras 5A e B 5.
- Mude para o modo Doppler a cores e posicionar o amarelo PW-frustradas linha paralela à direção do fluxo no vaso (Figuras 5C e 5 D). Coloque o cursor PW na ponta dos folhetos da válvula pulmonar. (Ver Nota 6.6.) Gravar dados usando loja cine e medir PA velocidade de pico fora de linha.
5. Cálculo e Análise de Dados
- Espessura da parede do VD pode ser calculado a partir dos dados obtidos a partir de modo B nível da aorta RV PSAX como descrito acima (Protocolo 3). Selecione a ferramenta de rastreamento área 2D para rastrear a área da parede do VD na diástole (como mostrado na área de rosa na Figura 6). Em seguida, utilizar a ferramenta de rastreio para detectar a distância as circunferências internas e exteriores da parede da TFVD (como mostrado em linhas azuis na Figura 6). Pegue a média de circunferências interiores e exteriores. Usando a equação
, Calculamos RV Recados (PVD) de espessura. (Ver Nota 6.8.) - Para outros parâmetros padrão, por favor, consulte os manuais do respectivo fabrica para realizar a análise de dados.
, Calculamos RV Recados (PVD) de espessura. (Ver Nota 6.8.) 6. Notas
- Todas as imagens são obtidas por meio do sistema de Vevo 2100. Imagens similares podem ser obtidas usando sistemas de imagem de ultra-som de outros fabricantes, e os prós e contras relativos de diversos instrumentos de ultra-som foram previamente comparado 8,12,15. Recomenda-se que todas as imagens devem ser obtidos e analisados de um modo cego, sempre que possível.
- A escolha adequada da anestesia, tal como um curto-dguração do isoflurano inalado (2-3% para induzir, e 1,0% para manter) é crucial para a manutenção dos batimentos cardíacos em taxas fisiológicas normais (acima de 500 batimentos / minuto), o que nos permite detectar basal reprodutível e consistente e arterial pulmonar elevada pressão sistólica no estudo.
- Certifique-se de coletar os dados, ao mais alto taxa de quadros possível possível (> 200 frames / seg.)
- Procure o ponto de vista com a maior dimensão da câmara.
- Obstrução devido a costelas e do esterno, em grande parte devido à posição retroesternal da RV é o maior impedimento para a obtenção de excelentes imagens em este método de imagem da RV. Ao se virar o animal ou a sonda, um operador pode superar o bloco esternal e obter vistas necessárias do VD. Isto pode levar 5-15 minutos, dependendo da fisiologia do animal.
- Você pode precisar mudar a sonda MS250 desde sonda MS550D pode ser usado em farsa e camundongos antes PAC ea sonda 40 MHz é capaz de gravarpico de velocidade de 300-1,500 m / seg, enquanto que MS250 é capaz de capturar a velocidade parque até 4.000 mm / seg.
- É aceitável ter um ângulo sonda menos de 20 ° para a medição precisa de PA velocidade de pico.
- Medidas consistentes de espessura da parede do VD e área / dimensões foram feitas usando várias janelas acústicas, tanto no eixo curto e longo. A escolha de uma destas janelas dependerá da experiência do operador, e pode explicar a variabilidade que pode ser positivo para diferentes resultados estatísticos.
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Representative Results
Neste estudo, a ecocardiografia de linha de base foi realizada 48 horas antes da cirurgia. Os ratinhos foram divididos aleatoriamente em dois grupos. Ratos recebeu oclusões das artérias pulmonares (PAC) e as operações de sham (Sham). Ecocardiografia foi realizada no dia 0, 3, e 7 do procedimento cirúrgico. Os animais foram sacrificados imediatamente após o último ecocardiograma e corações foram colhidas para avaliação histológica. Cateterismo foi realizado no subgrupo (n = 3 e 2 para o dia 0 e 7, respectivamente) de ratinhos de APA para medir PsVD via cateter de pressão.
Todos os dados de imagem obtidos foram analisados fora de linha. Importante, ultrassonografistas estavam cegos para os procedimentos que os animais foram submetidos. As imagens apresentadas neste estudo foram tiradas por duas câmaras independentes. A variabilidade inter-e intra-observador foi testado e verificou-se ser inferior a 6% e 11%, respectivamente. As medições foram obtidas usando todas as janelas acústicas disponíveis- Modo B, Modo M e Doppler imagens tiradas juntos foram utilizados na avaliação da estrutura e função do VD. Todas as medidas foram em média mais de 5 ciclos cardíacos. Para cada medição, o valor médio eo desvio padrão (SD) foi obtido. Muitas vezes, medidas semelhantes foram realizados a partir de diferentes janelas de imagem para obter informações complementares e vários pontos de dados para comparação de precisão e confiabilidade.
Como mostrado nas Figuras 7A e 7 B, a função sistólica de RV pode ser medido em vista Plax como% FS ou a meia vista músculo papilar como FAC%, respectivamente. Embora a redução no FAC era já significativa no dia 0, a diminuição na FS foi apenas significativo no dia 7 (n = 6, P <0,01). Uma ressalva importante deste ponto de vista é que, devido à posição retroesternal de RV e, ocasionalmente, devido à obstrução representada pelas costelas, deve ser tomado muito cuidado para se obter a imagem de RV para demonstrar com precisãoo diâmetro máximo do ventrículo direito, sem foreshortening a imagem. Pequenas variações de diâmetro RV pode mascarar mudanças pequenas, mas significativas na função. Em contraste, a% FAC diminui acentuadamente a seguir PAC, mesmo no dia 0 imediatamente após a oclusão PA (n = 6, P <0,05) e reduziu progressivamente tempo (n = 6, P <0,001). Assim,% FAC deve ser usado como uma medida da função primária e RV% FS como uma medida secundária. Vale ressaltar que% FAC tem demonstrado ser um indicador confiável de insuficiência cardíaca, morte súbita, acidente vascular cerebral e / ou mortalidade 3,4,10,16.
A dilatação do VD pode ser medido no eixo curto e longo como dimensão câmara RV (RVIDd) e área de RV na diástole (Figuras 7C e 7 D). A confiabilidade de eco derivado RVIDd em pequenos roedores não é de fato tão confiáveis quanto as medidas em seres humanos. Isso representa uma ressalva importante para medir RVID em camundongos. Na pequena animals, o RVID é mais claramente visualizado na visão de longo eixo, ao invés do corte apical de quatro câmaras, como é comumente feito em seres humanos. É importante ressaltar, no entanto, a definição do endocárdio da parede anterior é muitas vezes abaixo do ideal sob o ponto de vista do eixo longo e imagem oblíqua podem subestimar as medidas de tamanho. Nós achamos que medida área RV na visualização muscular meados papilar é um substituto mais reprodutível e confiável para a dimensão da câmara RV e dilatação do VD em camundongos.
RV espessura da parede livre, como um marcador de hipertrofia do VD, pode ser determinada com precisão, quer usar o Modo M ou o método de área-trace (Figuras 7E e 7 F). Da mesma forma, a velocidade de pico PA também podem ser obtidas com ou em Plax ou modo SAX (Figuras 7G e 7H, respectivamente). Medições fiáveis da velocidade de pico do PA e assim, o gradiente de pico da pressão dentro do PA pode ser obtido utilizando Doppler colorido em both janelas acústicas eixos curto e longo (Figuras 7G e 7H). Deve notar-se que estas medições de velocidade são ângulo dependente e por isso, recomenda-se obter velocidades usando vários pontos de vista e com a velocidade de varrimento semelhante para todos os traçados (superior a 100 mm / seg).
Por fim, a Figura 8 mostra que em ecocardiografia não invasiva é uma alternativa viável para o método de cateterismo cardíaco direito terminal utilizado como padrão-ouro para a medida RVSP 9. Para os 5 animais, a cateterização para a comparação de métodos de medição de RVSP foi realizado, e os cálculos de pressão eram altamente semelhantes (coeficiente de correlação de Pearson r = 0,943, P> 0,05). No ecocardiograma, a velocidade de pico PA é medida de maneira confiável, e segue-se que o cálculo da velocidade de pico PA também é reproduzível. Além disso, este método permite a medição da pressão de série g pulmonarradient ao longo do tempo.
Em resumo, a imagem baseado em eco não invasivo pode ser uma ferramenta útil para acompanhar a remodelação estrutural e funcional RV longitudinalmente semelhante ao que tem sido comumente usado em LV.
Figura 1. Ilustrações gráficas da posição sonda de imagem. Linha Vermelha que indica a posição da sonda para a obtenção de A, paraesternal eixo longo B, eixo curto paraesternal, C, modificado eixo maior esternal e D, a direção xy da sonda. Clique aqui para ver imagem ampliada.
Figura 2. Paraesternal eixo longo (Plax). Ilustração gráfica e imagens representativas Plax de A, sham e B, coração PAC mouse. Marcos chave visto nas áreas vista segue. 1: ventrículo direito (VD), 2: ventrículo esquerdo (VE), 3: Aorta (Ao), 4: válvula mitral (VM), 5: átrio esquerdo (AE), 6: dimensão diastólica do ventrículo direito (D), 7: dimensão sistólica do ventrículo direito (S), 8: parede do ventrículo direito (PVD), 9:. septo interventricular (SIV) Clique aqui para ver imagem ampliada.
Figura 3. Vista paraesternal eixo menor (PSAX) ao nível do meio-pap do ventrículo direito (VD) ilustração. Gráfico, imagem representativa em PSAX a nível muscular do papilar e H & E coloração de A, sham e B, coração PAC mouse. Marcos principais vistos na exibição são as seguintes. 1: ventrículo direito (VD), 2: septo interventricular (SIV), 3: ventrículo esquerdo (VE), e 4 e 5:. Músculos papilares Clique aqui para ver imagem ampliada.
Figura 4. Paraesternal eixo curto view (PSAX) a nível da aorta. Ilustração gráfica e imagens do modo B representativasde A, sham e B, coração PAC mouse. A ilustração gráfica e imagens a cores de Doppler de C, sham e D, coração PAC mouse. Marcos principais vistos na exibição são as seguintes. 1: Direito de saída do ventrículo (VSVD), 2: válvula tricúspide (TV), 3: átrio direito (AD), 4: átrio esquerdo (AE), 5: válvula aórtica (AV), 6: válvula pulmonar (PV), e 7:. artéria pulmonar (AP) Clique aqui para ver imagem ampliada.
Figura 5. Modificado paraesternal eixo longo (Plax) do ventrículo direito (VD) ea artéria pulmonar (AP). Ilustração gráfica, representante modificado imagens Plax, e H & E de histologia
Figura 6. RV Espessura de vista paraesternal eixo curto (PSAX) em vista nível da aorta. Ilustração gráfica PSAX-imagem da seção de coração ao nível da aorta de. A medição da espessura da parede de RV pode ser derivada a partir da área / comprimento. Indicando sombra rosaárea es de parede livre de VD e linha azul indica circunferências internas e externas da RV.
Figura 7. Avaliações estruturais e funcionais do ventrículo direito (VD). A, Fração de encurtamento (FS) obtido usando o modo M em Plax. B, alterações área fracional (FAC) obtido usando PSAX em nível médio pap. C, dimensão da câmara ventricular direita em diástole (RVIDd) obtido usando o modo M em Plax. D, Fim diastólica área do ventrículo direito obtidos utilizando PSAX em nível médio pap. E, a espessura da parede do ventrículo direito na diástole obtido usando o modo M em Plax e F, PSAX a nível da aorta. Velocidade de pico da artéria pulmonar obtidas no G, modificado Plaxem RV e vista PA e H, PSAX a nível da aorta. Sham, n = 6 e PAC, n = 6, * p <0,05. Clique aqui para ver imagem ampliada.
Figura 8. Correlação da artéria pulmonar (AP) pressão medida por ecocardiografia (ECO) e Millar cateter de pressão microtip (cateter). Para ecocardiografia, gradiente de pico pressão foram calculados a partir de PA velocidades de pico usando a equação modificada de Bernoulli. Os gradientes de pressão de pico (medido no local da constrição) foram consistentes com PsVD através de cateterização com um coeficiente de correlação de 0,943 (n = 5).
| Nome completo | Abreviatura |
| O átrio esquerdo | LA |
| Ventrículo esquerdo | LV |
| Átrio direito | RA |
| Ventrículo direito | RV |
| Aorta | Ao |
| Da artéria pulmonar | PA |
| Valva aórtica | AV |
| Valvar mitral | MV |
| TV | |
| Válvula pulmonar | PV |
| Septo interventricular | IVS |
| Músculo papilar | PM |
| Fração de encurtamento | FS |
| Mudança de área Fractional | FAC |
| Paraesternal vista eixo longo | Plax |
| Paraesternal eixo curto | PSAX |
| A ecocardiografia transtorácica | TTE | </ Tr>
| Constrição da artéria pulmonar | PAC |
| Pressão sistólica do ventrículo direito | RVSP |
| A hipertensão arterial pulmonar | PAH |
| Direito de saída do ventrículo | TFVD |
| Dimensão interna do ventrículo direito na diástole | RVIDd |
Tabela 1.
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Discussion
Nós demonstramos que TTE fornece uma metodologia sensível e reprodutível para avaliação de rotina da estrutura e função do VD em camundongos. Antes do advento da TTE, estudos da RV amplamente focada na medição RVSP via cateterismo cardíaco direito, um terminal e procedimento invasivo 6,9,11,17.
Relatórios anteriores descreveram uma variedade de técnicas para a realização de medições do coração direito 3,4,11,17-19. No entanto, a maioria dos estudos anteriores relataram tamanho RV e dados estruturais em um predominantemente qualitativa do que quantitativa moda 5. A padronização da avaliação RV é, portanto, ainda nos estágios iniciais, apesar de recente interesse em função do VD, no contexto da HAP e outros modelos de doenças 9,19.
Tomados em conjunto, estes dados fornecem evidências de que o método não invasivo de imagem pode ser uma ferramenta confiável e valiosa para avaliação precoce da disfunção do VD. Nós estabelançar uma metodologia de imagem para visualizar de forma não invasiva alterações estruturais e funcionais RV em tempo real usando um número de janelas de imagens complementares, e aferido o nosso método baseado em eco de pressão gradientes contra a medida RVSP padrão ouro convencional por cateterismo.
Quando fotografada longitudinalmente, após uma lesão aguda, como o PAC, o RV sofre remodelação rápida e as mudanças dinâmicas podem ser capturados reproduzível através de imagens. Os dados de imagem em conjunto com as etapas descritas nesta metodologia, além de novos progressos na tecnologia, tais como imagens 2D tensão, ecocardiografia 3D e uso de manchas de treinamento de 20 vai melhorar a avaliação ecocardiográfica sistemática de RV 12,15. Isto pode levar a um aumento da intervenção terapêutica na patologia de doenças cardiopulmonares, permitindo a detecção precoce da doença.
Em resumo, a TTE pode fornecer uma primeira etapa essencial para um compreheavaliação nsive do estado cardíaco e pode servir como uma ferramenta de descoberta e avaliação eficaz de alterações fisiológicas na estrutura e função. Porque TTE é uma modalidade de imagem não invasivo e amplamente acessível, oferece o potencial para auxiliar as investigações de doenças cardíacas que necessitam de alto rendimento e de coleta de dados rápida.
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Disclosures
Não há nada a divulgar.
Acknowledgments
Agradecemos Fred Roberts e Chris White para suporte técnico exemplar. Agradecemos de Brigham Women Hospital Fisiologia Cardiovascular Núcleo para a prestação com a instrumentação e os fundos para este trabalho. Este trabalho foi financiado em parte pelo NHLBI concede HL093148, HL086967 e HL 088.533 (RL), K99HL107642 ea Fundação Ellison (SC).
Materials
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| High Frequency Ultrasound | FUJIFILM VisualSonics, Inc. | Vevo 2100 | |
| High-frequency Mechanical Transducer | FUJIFILM VisualSonics, Inc. | MS250, MS550D, MS400 | |
| Millar Mikro Pressure Catheter | Millar | SPR-1000 |
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