Constriction chronique blessures de orbitaire du nerf de la Rat (ion-CCI) d'étudier trijumeau douleur neuropathique
Summary
This manuscript describes a rodent model to study trigeminal neuropathic pain. The methods described include surgical procedures to perform a chronic constriction injury of the rat’s infraorbital nerve and the post-surgical behavioral tests to measure the changes in spontaneous and evoked behavior that are indicative of persistent pain and allodynia.
Abstract
Les modèles animaux sont des outils importants pour étudier la physiopathologie et la pharmacologie de la douleur neuropathique. Ce manuscrit décrit les procédures chirurgicales et comportementales pour étudier la douleur neuropathique trijumeau chez les rats. Pour répondre à la spécificité des syndromes de douleur neuropathique trijumeau, le nerf sous-orbitaire (LOI) est soumis à une blessure constriction chronique (CCI) par ligature lâche le nerf. Une approche intra-orbitaire est présenté ici d'exposer et de ligaturer l'ion dans la cavité orbitaire. Après IoN ligature, les rats présentent des changements dans le comportement spontané et en réponse à la stimulation de cheveux de von Frey qui sont indicatifs de la douleur persistante et l'allodynie mécanique. Deux phases peuvent être définies dans le développement des changements de comportement. Au cours de la première semaine suivant ions CCI (phase 1), les rats montrent une activité de toilettage visage accrue et asymétrique, à savoir, avec lavage du visage coups en premier lieu au territoire IoN nerf blessé. Une distinction est faite entre la face grooming comportement qui fait partie d'un comportement corps toilettage plus général, qui reste largement affectée par ions CCI, et le visage de toilettage qui est suivie ni précédée par toilettage du corps, qui est significativement augmentée après ions CCI. Au cours de cette période, la réactivité à la stimulation mécanique du territoire ions est réduite. Cette hyporéactivité est brusquement remplacé par une hyperréactivité extrême selon laquelle, même très faibles intensités de relance provoquent comportement nocifensive (phase 2). Les similitudes phénoménologiques entre ces altérations du comportement et signalé des signes de douleur faciale (ie, les réponses à une stimulation nociceptive du visage) suggèrent la présence de dysesthésies / paresthésie et allodynie mécanique dans le territoire IoN ligaturé.
Introduction
Les dommages aux nerfs somato conduit le plus souvent à une perte de sensation. Il est pas très bien compris pourquoi et comment, dans certains cas, les dommages du nerf périphérique conduit à la douleur chronique. En conséquence, les neuropathies douloureuses demeurent une condition difficile à traiter 1 et se traduire par des réductions substantielles dans la qualité de vie des patients 2-3. Les modèles animaux sont un outil important pour examiner l'efficacité des médicaments existants et nouvellement développés et d'identifier les mécanismes physiopathologiques impliqués dans le développement et l'entretien de la douleur neuropathique. Parmi les principaux défis pour la recherche sur la douleur de la traduction est d'identifier et de mesurer la douleur spontanée chez les animaux (c.-à-physiologique, manifestations comportementales ou d'autres qui indiquent la présence de la douleur chez les animaux qui ne sont pas remis en question avec de sondage stimulations qui sont gravement superposent à la condition basale du sujet ). L'objectif global de cette procédure est d'induire chirurgicalement unelésion du nerf sous-orbitaire chez un rat qui mène au développement à la fois spontanée et évoqué le comportement nocifensive qui peut être utilisé pour étudier les mécanismes impliqués dans la douleur neuropathique trijumeau et de son traitement.
Réalisé, isolé visage toilettage est une mesure unique de la douleur neuropathique spontanée chez les rats. Après une lésion constriction chronique (CCI) du nerf sous-orbitaire (Ion), les rats présentent des changements dans le comportement spontané et en réponse à la stimulation tactile qui sont indicatifs de la douleur persistante et l'allodynie mécanique 4. Après ions CCI, les rats montrent une activité de toilettage visage accrue et asymétrique, à savoir, avec lavage du visage coups en premier lieu au territoire IoN nerf blessé. Contrairement à la stimulation nocive du visage (par exemple, l'injection de formol) 5, non douloureuse des troubles sensoriels (ie, unilatérale coupure de vibrisses, anesthésie sous-orbitaire blocage nerveux, application d'huile minérale sur vibriSSAE) ne l'ont pas ou seulement très brièvement (à savoir, les premières minutes après le début) induisent un changement significatif dans le comportement face à 6 toilettage. Il a été conclu que ce toilettage anormale après ions CCI est une manifestation comportementale des sensations spontanées, très agressives dans le territoire du nerf blessé. Ce comportement chez le rat ions CCI porte forte ressemblance à la douleur spontanée observée chez les patients. D'autres études ont identifié une différence importante entre le comportement de toilettage pour le visage qui fait partie d'un comportement de toilettage du corps plus général (par exemple, «toilettage de visage pendant corps grooming»), qui reste largement affectée par ions CCI, et le visage nocifensive toilettage qui ne soit ni précédée ni suivi par le corps de toilettage (ie, "visage isolé grooming»), qui est significativement augmentée après ions CCI 7-9. Pharmacologiquement, toilettage de visage pendant corps toilettage constitue une excellente mesure de contrôle pour les effets non spécifiques drogue ( <em> par exemple, la sédation) qui peuvent altérer la fonction du moteur. Les mouvements des membres antérieurs au cours des deux types de visage toilettage sont exactement les mêmes.
Après ions CCI, les rats présentent également des changements en réponse à la stimulation tactile qui sont indicatifs de l'allodynie mécanique 4, 10. Pendant la première semaine (s) après ions CCI, les rats ne répondent plus aux tactile légère ou modérée (c.-à-von Frey stimuli). Cette hyporéactivité est ensuite brusquement remplacée par une hyperréactivité extrême lequel même de très faibles intensités de relance provoquent comportement nocifensive. Le début de l'hyperréactivité peut varier entre les rats, mais la plupart des rats sont devenus hyperréactives après trois à quatre semaines après l'intervention.
Protocol
Representative Results
Discussion
L'aspect le plus intéressant du modèle ions CCI est qu'il fournit une mesure unique de, (neuropathique) douleur spontanée non-évoquée. La plupart des études sur les animaux de la douleur neuropathique, en utilisant des modèles de nerfs rachidiens, adresse exclusivement comportements nocifensives (par ex., La vocalisation et les réponses de sevrage), reflétant une hypersensibilité aux stimulations mécaniques ou thermiques 12. Cependant, la plainte clinique chef chez les patients est…
Disclosures
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
The authors acknowledge the work that was done by the first author of the IoN-CCI model, Bart Vos†.
Materials
| Chromic catgut | Dynek | CG504 | |
| Nembutal (pentobarbital) | Pharmacy | ||
| Atropine | Pharmacy | ||
| Clippers for small animals – Favorita II | Aesculap | GT104 | |
| Stereotaxic instrument | Stoelting | 51600 | |
| Ophthalmic ointment (Liposic) | Pharmacy | ||
| Homeothermic monitor system | Harvard Apparatus | PY8 50-7221-F | |
| Cotton applicator | Pharmacy | ||
| Precision cotton swab | Qosina | 10225 | |
| Operation microscope | Kaps | SOM 62 | |
| Dumont #5 forceps | Fine Science Tools | 11251-10 | |
| Dumont forceps – Micro-blunted tips (#5/45) | Fine Science Tools | 11253-25 | |
| Scissors – blunt tips | Fine Science Tools | 14574-09 | |
| Polyester sutures – Mersilene (4-0) | Ethicon | R871H | |
| Digital video camera | Sony | HDR-CX330E | |
| Semmes-Weinstein Von Frey Aesthesiometer kit | Stoelting | 58011 |
References
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