Lesión crónica constricción del nervio infraorbitario de la Rata (Ion-CCI) para el Estudio del trigémino Dolor Neuropático
Summary
This manuscript describes a rodent model to study trigeminal neuropathic pain. The methods described include surgical procedures to perform a chronic constriction injury of the rat’s infraorbital nerve and the post-surgical behavioral tests to measure the changes in spontaneous and evoked behavior that are indicative of persistent pain and allodynia.
Abstract
Los modelos animales son herramientas importantes para el estudio de la fisiopatología y farmacología del dolor neuropático. Este manuscrito describe los procedimientos quirúrgicos y de comportamiento para estudiar el dolor neuropático trigeminal en ratas. Para satisfacer la especificidad del trigémino síndromes de dolor neuropático, el nervio infraorbital (ION) se somete a una lesión de constricción crónica (CCI) sin apretar por ligación del nervio. Un enfoque intra-orbital se presenta aquí para exponer y ligar el ION en la cavidad orbital. Después de la ligadura de iones, las ratas presentan cambios en el comportamiento espontáneo y en respuesta a la estimulación von Frey pelo que son indicativos de dolor persistente y la alodinia mecánica. Dos fases se pueden definir en el desarrollo de los cambios de comportamiento. Durante la primera semana después de Ion-CCI (fase 1), las ratas muestran un aumento de la actividad y asimétrica aseo cara, es decir, con lavado de cara trazos dirigida principalmente al territorio de iones nervio lesionado. Se hace una distinción entre la cara grooming comportamiento que es parte de un comportamiento corporal aseo más general, que sigue siendo en gran parte no afectada por Ion-CCI, y la cara de aseo que ni está precedido ni seguido por el aseo corporal, que se incrementó significativamente después de Ion-CCI. Durante este período, se reduce la capacidad de respuesta a la estimulación mecánica del territorio de iones. Esta respuesta menor es reemplazado abruptamente por una hiperreactividad extrema cual intensidades de estímulo aún muy débiles provocan el comportamiento nocifensive (fase 2). Las similitudes fenomenológicas entre estas alteraciones del comportamiento y informado de signos de dolor facial (es decir, las respuestas a la estimulación nociva de la cara) sugieren la presencia de disestesia / parestesia y la alodinia mecánica en el territorio de iones se ligó.
Introduction
El daño a los nervios somatosensoriales más a menudo conduce a la pérdida de la sensibilidad. No se entiende muy bien por qué y cómo, en algunos casos, el daño del nervio periférico conduce a dolor crónico. Como resultado, las neuropatías dolorosas siguen siendo una condición difícil de tratar 1 y dar lugar a reducciones sustanciales de la calidad de vida de los pacientes 2-3. Los modelos animales son una herramienta importante para examinar la eficacia de los fármacos existentes y de nuevo desarrollo e identificar los mecanismos fisiopatológicos involucrados en el desarrollo y mantenimiento del dolor neuropático. Entre los principales retos para la investigación del dolor de traslación es identificar y medir el dolor espontáneo en los animales (es decir, fisiológicos, manifestaciones conductuales u otros que indican la presencia de dolor en los animales que no están siendo desafiados con sondaje estímulos que están agudamente superponen con la condición basal del sujeto ). El objetivo general de este procedimiento es inducir quirúrgicamente unlesión del nervio infraorbital en una rata que conduce al desarrollo de tanto espontánea y evocada comportamiento nocifensive que pueden utilizarse para estudiar los mecanismos implicados en el dolor neuropático trigeminal y su tratamiento.
Dirigida, cara aislado aseo personal es una medida única de dolor neuropático espontáneo en ratas. Después de una lesión crónica constricción (CCI) del nervio infraorbitario (ION), las ratas muestran cambios en el comportamiento espontáneo y en respuesta a la estimulación táctil que son indicativos de dolor persistente y la alodinia mecánica 4. Después de Ion-CCI, las ratas muestran un aumento de la actividad y asimétrica aseo cara, es decir, con lavado de cara trazos dirigida principalmente al territorio de iones nervio lesionado. En contraste con la estimulación nociva de la cara (por ejemplo, la inyección de formalina) 5, no dolorosa alteraciones sensoriales (es decir, recorte vibrisas unilateral, bloqueo del nervio infraorbital anestésico, la aplicación de aceite mineral en vibriSSAE) no o sólo muy brevemente (es decir, los primeros minutos después del inicio) inducen un cambio significativo en la cara comportamiento de acicalamiento 6. Se concluyó que este acicalamiento anormal después de Ion-CCI es una manifestación conductual de sensaciones espontáneas, fuertemente aversivas en el territorio del nervio lesionado. Este comportamiento en ratas Ion-CCI tiene gran parecido con dolor espontáneo observado en los pacientes. Otros estudios han identificado una diferencia importante entre la cara comportamiento arreglo personal que forma parte de un comportamiento de aseo corporal más general (es decir, "cara de aseo durante cuerpo grooming"), que sigue siendo en gran parte no afectada por Ion-CCI, y la cara nocifensive aseo que no es ni precedido ni seguido de aseo corporal (es decir, "aislado cara grooming"), que se incrementó significativamente después de Ion-CCI 7-9. Farmacológicamente, cara aseo durante el aseo corporal constituye una medida de control excelente para efectos no específicos de drogas ( <em> por ejemplo, sedación) que pueden afectar la función motora. Los movimientos de las extremidades anteriores durante los dos tipos de cara aseo son exactamente los mismos.
Después de Ion-CCI, las ratas también muestran cambios en respuesta a la estimulación táctil que son indicativos de la alodinia mecánica 4, 10. Durante la primera semana (s) después de Ion-CCI, las ratas ya no responden al tacto leve o moderada (es decir, von Frey ) estímulos. Esta respuesta menor es entonces bruscamente reemplazada por una hiperreactividad extrema por lo que incluso las intensidades de estímulo muy débiles provocan el comportamiento nocifensive. El inicio de la hiperreactividad puede variar entre las ratas, pero la mayoría de las ratas se han convertido en hyperresponsive después de tres a cuatro semanas después de la operación.
Protocol
Representative Results
Discussion
El aspecto más interesante del modelo de Ion-CCI es que proporciona una medida única de (neuropático) dolor espontáneo, no provocado. La mayoría de los estudios en animales de dolor neuropático, utilizando modelos de los nervios espinales, abordan exclusivamente comportamientos nocifensive (ej., Vocalización y respuestas de abstinencia), lo que refleja la hipersensibilidad a estímulos mecánicos o térmicos 12. Sin embargo, la queja clínica principal en los pacientes es el dolor continuo, no…
Disclosures
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
The authors acknowledge the work that was done by the first author of the IoN-CCI model, Bart Vos†.
Materials
| Chromic catgut | Dynek | CG504 | |
| Nembutal (pentobarbital) | Pharmacy | ||
| Atropine | Pharmacy | ||
| Clippers for small animals – Favorita II | Aesculap | GT104 | |
| Stereotaxic instrument | Stoelting | 51600 | |
| Ophthalmic ointment (Liposic) | Pharmacy | ||
| Homeothermic monitor system | Harvard Apparatus | PY8 50-7221-F | |
| Cotton applicator | Pharmacy | ||
| Precision cotton swab | Qosina | 10225 | |
| Operation microscope | Kaps | SOM 62 | |
| Dumont #5 forceps | Fine Science Tools | 11251-10 | |
| Dumont forceps – Micro-blunted tips (#5/45) | Fine Science Tools | 11253-25 | |
| Scissors – blunt tips | Fine Science Tools | 14574-09 | |
| Polyester sutures – Mersilene (4-0) | Ethicon | R871H | |
| Digital video camera | Sony | HDR-CX330E | |
| Semmes-Weinstein Von Frey Aesthesiometer kit | Stoelting | 58011 |
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