Dissection of Enhancer Function Using Multiplex CRISPR-based Enhancer Interference in Cell Lines

00:05Title
00:37Guide RNA Design
03:37Guide RNA Cloning
06:27Transfection of Enhancer-I, Cell Harvest, and RNA Extraction
08:21Results: Guide RNA Design/Cloning and Evaluation of Gene Expression in Response to Enhancer-i
09:23Conclusion

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Este protocolo describe los pasos necesarios para diseñar y realizar targeting multiplexados de potenciadores con la desactivación proteína de fusión SID4X-dCas9-Cascarudo, también conocido como interferencia de enhancer (potenciador-i). Este protocolo permite la identificación de los reforzadores que regulan la expresión génica y facilita la disección de las relaciones entre los potenciadores de regulación de un gen de destino común.

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basado en la interferencia de ARN Investigación de la Función de la proteína de choque térmico 27 durante la curación de la herida corneal epitelial

Una sola célula de la expresión génica utilizando multiplex RT-qPCR para caracterizar heterogeneidad de las poblaciones linfoides Raras

Detección del número de copias alteraciones Uso de Secuenciación de los organismos unicelulares

Inmunoprecipitación de cromatina (ChIP) en líneas de células T de ratón

Uso de ovocitos de ratón para evaluar la función humana del Gene durante la Meiosis I

Edición del genoma en las líneas celulares de mamíferos utilizando CRISPR-Cas

Manipulación de la función del Gene en mexicano Cavefish

Purificación y trasplante de células progenitoras miógena derivan exosomas para mejorar la función cardiaca en ratones distróficos musculares de Duchenne

Análisis de proteómica basada en espectrometría de masa usando la base de datos OpenProt para develar nuevas proteínas traducción de marcos de lectura abierto no-canónico

Disección de la función del reforzador mediante Multiplex basados en CRISPR potenciador de interferencia en líneas celulares

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Diseño automatizado, de alto rendimiento, experimentos de crecimiento de células continuas utilizando eVOLVER

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