Dissection of Enhancer Function Using Multiplex CRISPR-based Enhancer Interference in Cell Lines

00:05Title
00:37Guide RNA Design
03:37Guide RNA Cloning
06:27Transfection of Enhancer-I, Cell Harvest, and RNA Extraction
08:21Results: Guide RNA Design/Cloning and Evaluation of Gene Expression in Response to Enhancer-i
09:23Conclusion

Summary

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Ce protocole décrit les étapes nécessaires pour concevoir et effectuer le ciblage multiplexé des rehausseurs avec la protéine de fusion désactivant SID4X-dCas9-KRAB, également connu sous le nom des interférences enhancer (Enhancer-i). Ce protocole permet l’identification des activateurs qui régulent l’expression des gènes et facilite la dissection des relations entre les exhausteurs de réglementer un gène cible commun.

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