चूहों और चूहों में Circumlimbal सीवन द्वारा प्रेरित मोतियाबिंद का एक मॉडल
Summary
पुरानी आंख का उच्च रक्तचाप चूहों और चूहों में एक circumlimbal सीवन लागू करने, रेटिना नाड़ीग्रंथि मोतियाबिंद के अनुरूप कोशिकाओं के कार्यात्मक और संरचनात्मक गिरावट के लिए अग्रणी द्वारा प्रेरित है ।
Abstract
circumlimbal टांका लंबे रूप से intraocular दबाव (IOP), मोतियाबिंद के लिए एक अच्छी तरह से ज्ञात जोखिम कारक द्वारा कुतर में प्रयोगात्मक मोतियाबिंद उत्प्रेरण के लिए एक तकनीक है । यह प्रोटोकॉल लंबे इवांस चूहों और C57BL/6 चूहों में इस तकनीक पर कदम दर कदम गाइड दर्शाता है. सामान्य संज्ञाहरण के तहत, एक “पर्स-स्ट्रिंग” सीवन कंजाक्तिवा पर लागू किया जाता है, भूमध्य रेखा के आसपास और आंख के limbus के पीछे. साथी आंख एक अनुपचारित नियंत्रण के रूप में कार्य करता है । हमारे अध्ययन, जो चूहों और चूहों के लिए 12 सप्ताह के लिए 8 सप्ताह की अवधि थी की अवधि के दौरान, IOP बुलंद बने रहे, के रूप में सामयिक संज्ञाहरण के बिना होश में जानवरों में tonometry खुशहाली लौटने लगी द्वारा नियमित रूप से मापा । दोनों प्रजातियों में, टांका आंखों electroretinogram अधिमानी भीतरी रेटिना रोग के अनुरूप सुविधाओं को दिखाया । ऑप्टिकल जुटना टोमोग्राफी रेटिना तंत्रिका फाइबर परत के चयनात्मक thinning दिखाया । प्रोटोकॉल पार में चूहे रेटिना की धारा नाड़ीग्रंथि सेल परत में कम सेल घनत्व पाया, लेकिन अंय सेलुलर परतों में कोई परिवर्तन नहीं । एक नाड़ीग्रंथि सेल विशिष्ट मार्कर (RBPMS) के साथ फ्लैट घुड़सवार माउस रेटिना के दाग नाड़ीग्रंथि कोशिका हानि की पुष्टि की । circumlimbal सीवन एक सरल, ंयूनतम इनवेसिव और लागत प्रभावी करने के लिए नेत्र उच्च रक्तचाप है कि दोनों चूहों और चूहों में नाड़ीग्रंथि कोशिका चोट की ओर जाता है प्रेरित तरीका है ।
Introduction
पशु मॉडल सेलुलर मोतियाबिंद रोगजनन प्रक्रियाओं की प्रयोगशाला जांच के लिए एक महत्वपूर्ण मंच प्रदान करते हैं, साथ ही साथ संभावित चिकित्सीय हस्तक्षेप का मूल्यांकन करने के लिए । कई inducible मॉडल निरंतर intraocular दबाव उत्पादन करने के लिए विकसित किया गया है (IOP) ऊंचाई, मोतियाबिंद के लिए सबसे महत्वपूर्ण जोखिम कारक । तरीकों कि तरक्की के लिए लागू किया गया है IOP में शामिल हैं: episcleral नसों में hypertonic खारा इंजेक्शन1, लेजर फोटोकोगुलेशन trabecular meshwork2 या अंगों की नसों के3, और intracameral इंजेक्शन जैसे पदार्थों के भूत लाल रक्त कोशिकाओं4, microbeads5,6 और viscoelastic एजेंटों7. प्रत्येक दृष्टिकोण अपने फायदे और सीमाएं हैं ।
मोतियाबिंद के लिए एक अच्छा मॉडल रोग प्रक्रिया की नकल करना चाहिए, जैसे आघात, सूजन और मीडिया opacities के रूप में ंयूनतम जटिलता के साथ । इन जटिलताओं अक्सर IOP उंनयन प्रेरित करने के लिए इस्तेमाल किया प्रक्रियाओं के साथ जुड़े रहे हैं, और परिणामों की व्याख्या पाया जा सकता है । उदाहरण के लिए, पूर्वकाल चैंबर के पैरासेन्टेसिस, यहां तक कि जब विदेशी पदार्थों शुरू नहीं कर रहे हैं, आघात और सूजन है कि ठेठ glaucomatous परिवर्तन8,9का प्रतिनिधि नहीं है कारण दिखाया गया है । सूजन से बचने के महत्व के अलावा, ऑप्टिकल स्पष्टता बनाए रखने के लिए vivo इमेजिंग और इलेक्ट्रोफिजियोलॉजी में रोग प्रगति की निगरानी की सुविधा । हालांकि यह किस हद तक इन जटिलताओं रोग की जांच को प्रभावित कर सकता है स्पष्ट नहीं है, यह मॉडल प्रेरण के दौरान आंख मर्मज्ञ से बचने के लिए बेहतर हो सकता है । circumlimbal सीवन दृष्टिकोण दुनिया के प्रवेश से बचा जाता है और vivo अनुदैर्ध्य आकलन रेटिना संरचना और समारोह में सुविधा । इससे भी महत्वपूर्ण बात, इस मॉडल को अपनी क्षमता में पिछले वाले से अलग है जब आवश्यक सीवन के हटाने के द्वारा आधारभूत मूल्यों को IOP वापस । IOP सामांयीकरण सेलुलर और आणविक और अपरिवर्तनीय नाड़ीग्रंथि कोशिका चोट के10,11, 12,13,14की आण्विक संबद्धताओं का अध्ययन करने के लिए उपयोगी हो सकता है ।
यह लेख मॉडल प्रेरण के लिए तकनीक पर केंद्रित है । रेटिना की चोट चूहों और चूहों में इस मॉडल से प्रेरित के लक्षण वर्णन कहीं अधिक विस्तार में पाया जा सकता है15,16,17,18,19.
Protocol
Representative Results
Discussion
circumlimbal सीवन जीर्ण नेत्र उच्च रक्तचाप का एक नया मॉडल है । अध्ययन से जो प्रतिनिधि परिणाम16,18स्रोत रहे है के अलावा, इस पशु मॉडल हाल ही में अध्ययन की संख्या में उपयोग किया गया है15<s…
Disclosures
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
यह काम राष्ट्रीय स्वास्थ्य और चिकित्सा अनुसंधान परिषद ऑस्ट्रेलिया परियोजना अनुदान (१०४६२०३), ऑस्ट्रेलियाई अनुसंधान परिषद भविष्य फैलोशिप (FT130100338) द्वारा वित्त पोषित है ।
Materials
| normal saline | Baxter International Inc | AHB1323 | Maintain corneal hydration during surgery |
| Chlorhexadine 0.5% | Orion Laboratories | 27411, 80085 | Disinfection of surgical instrument |
| Isoflurane 99.9% | Abbott Australasia Pty Ltd | CAS 26675-46-7 | Proprietory Name: Isoflo(TM) Inhalation anaaesthetic. Pharmaceutical-grade inhalation anesthetic mixed with oxygen gas for suture procedure |
| ocular lubricant | Alcon Laboratories | 1618611 | Proprietory Name: Genteal, ocular lubricant to keep the other eye moist |
| Needle holder (microsurgery) | World Precision Instruments | 555419NT | To hold needle during ocular surgery |
| Proxymetacaine 0.5% | Alcon Laboratories | CAS 5875-06-9 | Topical ocular analgesia |
| Scissors (microsurgery) | World Precision Instruments | 501232 | To cut excessive suture stump during ligation |
| Surgical drape | Vital Medical Supplies | GM29-612EE | Ensure sterile enviornment during surgery |
| Suture needle for rats (microsurgery) | Ninbo medical needles | 151109 | 8-0 nylon suture attached with round needle, cutting edge 3/8, dual-needle, suture length 30cm |
| Suture needle for mice (microsurgery) | Ninbo medical needles | 160905 | 10-0 nylon suture attached with round needle, cutting edge 3/8, dual-needle, suture length 30cm |
| Tweezers (microsurgery) | World Precision Instruments | 500342 | Manipulate tissues during ocular surgery |
| rebound tonometer | TONOLAB, iCare, Helsinki, Finland | TV02 | for intraocular pressure monitoring |
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