Summary

יצירה של השקה שטיפת המעי הגס בעכברים

Published: January 17, 2019
doi:

Summary

דליפה anastomotic או התמוטטות לאחר הניתוח היא הגורם העיקרי לזיהום לאחר הניתוח. הניתוח ליצירת השקה של המעי הגס הוא שיטה לשחזור ואמין ללמוד את מנגנוני הריפוי של חיבור.

Abstract

. חיבור מעיים מבוצעים בדרך כלל בפעולות בחירה והן מתהווה. למרות זאת, דליפות anastomotic סיבוכים המפחידים ביותר של ניתוחי המעי הגס והוא יכול להתרחש עד 26%. חיבור כירורגי, עם תמותה להיות עד 39% עבור חולים עם דליפה כזאת. כעת, נותר במחסור של נתונים המפרט את המנגנונים התאיים של ריפוי anastomotic. להמציא אסטרטגיות מניעה ואופני הטיפול עבור הנזילה anastomotic יכול להיות מאוד potentiated על ידי הבנה טובה יותר של ריפוי anastomotic המתאים.

מודל מאתר אידיאלי כפי שמחקרים קודמים הראו כי ההשקה מאתר המקרה האנושי לעומת דגמים אחרים בעלי חיים דומה ביותר מבחינה רפואית. אנו מציעים מודל מאתר בקלות לשחזור של השקה שטיפת המעי הגס בעכברים אשר יאפשרו להמחשה נוספת של ריפוי anastomotic.

Introduction

סיבוך המפחידים ביותר של ניתוחי השקה של המעי היא התמוטטות anastomotic או דליפה. דליפה anastomotic, אשר גורמת זליגת התכנים intraluminal לתוך חלל הבטן, היא סכנת והוא יכול להוביל במהירות אלח דם אינטרה-בטן; הלם המחירים משתנים בין 0.3% ל- 5.5% בעקבות חיבור המעי הגס קטן, לעלות בין 0.5% ל- 26% עבור חיבור חוקן1,2. שיעורי התמותה עקב דליפות יכול להיות גבוה ככל 39% בשל תחילתה מהירה של אלח דם והתקדמות מהירה למוות בעקבות זיהום intraabdominal3. אסטרטגיות מניעה ואופני הטיפול כיום מבוססות על פתופיזיולוגיה זה אינה מובנת במלואה.

כיום, ריפוי anastomotic מושווה לעתים קרובות למד באופן נרחב יותר עורית ריפוי הפצע, אשר היא להוכיח להיות עני יחסית פקסימיליה. ריפוי מתרחש בסדרה של שלבים חופפים, החל השלב הראשוני השהיה. במהלך ימים 0-4 לאחר היצירה של ההשקה מעיים, השלב השהיה מוגדר על-ידי לתגובה דלקתית חריפה שמנקה את הפצע של פסולת הסלולר. בשלב הבא, בימים 3-4, התפשטות fibroblastic, ייצור של קולגן מאפיינת את שלב fibrophasia. לבסוף, אחרי 10 יום תקופה ממושכת של קולגן שיפוץ מכונה שלב ההבשלה. חשוב שימו לב כי הכוח anastomotic הוא נמוך למדי, תלוי תמיכה חיצונית של סיכות שמוקם בניתוח או תפר עד קולגן הופקדו4. להבין את התפקיד והעיתוי כל שכבה של הקיר מעי משחקת ריפוי הפצע anastomotic ומעורבות סוגי תאים דלקתיים בתיווך כגון מקרופאגים, כמו גם סמנים הפונדקאית שחקרתי לחזות כשל anastomotic או הצלחה במידה רבה להפחית תחלואה, תמותה, הוצאות בריאות בעקבות פעולות המעי הגס5.

המודל מאתר הוכח במחקרים קודמים כדי להיות שימושי מחקה השקה האנושי6. אמנם יש דוגמאות פופולרי, מוכחות, למד היטב של המודל מאתר anastomotic מעי, במיוחד השיטה המתוארת על ידי Komen. et al. 7, מודלים אלה מעדיפות ileocecal או בסדר עולה colocolonic טכניקות anastomotic8. מחקרים קודמים של בני אדם חולים הראו הבדל משמעותי בשיעורי דליפה בין ileocecal, colocolonic, חיבור המעי הגס, המדגיש את הצורך בהמשך ניסיוניות אנטומיים במקומות שונים. שיטות נוספות, בשימוש העממי מכוונים לפיתוח מודל אשר במכוון יוצר דליפת anastomotic במקום להבהיר את המנגנונים התאיים הדרושים עבור ריפוי9הפצע anastomotic רגילה. מודלים עכברוש נוסו בעבר אבל המחירים של התבקעות anastomotic ו/או סימנים של דליפה (קרי, היווצרות מורסה) נמוך משמעותית מאשר בני אדם ו עכברים6,7. בנוסף, קווים ניסיוני יותר מהונדסים זמינים בעכברים מחולדות. זה הופך את המודל עכברוש פחות שימושי עבור מודל anastomotic. בנוסף, חזירי דגמים הכלבים היו החקירה קליני פחות מ-6,המודל מאתר7.

אנו מציעים הליך בטוח מבחינה טכנית פשוטה, בקלות ובמהירות לשחזור להקמת חוקן. חיבור במודל מאתר זה אמור להקל על חקירה נוספת מנגנון underreported שלריפוי הפצע anastomotic 10 .

Protocol

להלן כללי התנהגות אושרה על ידי האוניברסיטה של אוקלהומה מדעי מרכז מוסדי חיות בריאות הוועדה להשתמש (IACUC), תואם כל המוסדיים הנחיות אתיות לגבי מחקר בבעלי החיים. בנוסף, כל הניסויים בוצעו על פי תקנות מוסדיים, מדיני ופדראלי לגבי מחקר בבעלי חיים ניסיוני. הערה: עבור פרוטוקול זה, השתמש?…

Representative Results

ב 7 ימים לאחר הניתוח, ההשקה צריך גם להירפא. ניתן לקצור ההשקה בנקודות זמן לפני ואחרי שבעה ימים טוב יותר להמחיש את שלבי ריפוי anastomotic. איור 9, הניתוח היסטולוגית מראה שהותירה (קולגן דמיינו ידי מכתימה trichrome) התגובה מתווכת על-ידי שריר חלק אלפא-אקטין myofibroblasts חיובי. ע…

Discussion

ישנם מספר שלבים מרכזיים כדי להבטיח ההצלחה של ולצמצם את התחלואה/התמותה הקשורים בהליך זה. ראשית, להבטיח טיפול זהיר של רקמת המעי, לטפל כדי למנוע פגיעה המתיחה כשהוא מסתובב את הקרביים לחשוף את המעי הגס. מתח מיותר על המעי או מצע המעי יכול פציעה לנמק המעי המעי או להערכת ולגרום מן האתר של ההשקה. בנו?…

Disclosures

The authors have nothing to disclose.

Acknowledgements

אף אחד

Materials

C57BL6/J mice Jackson Labs #00664 
Fisherbrand Absorbent Underpads, 20" x 24" Fisher Scientific 14-206-62
Polylined Sterile Field, 18" x 24" Busse Hospital Disposables 696 Cut a rectangular hole 
Isothesia isoflurane Henry Schein  50033
Fisherbrand Sterile cotton gauze pad, 4" x 4" Fisher Scientific 22-415-469
Puralube petrolatum ophthalmic ointment, 1/8 oz. tube Dechra Veterinary Products NDC 17033-211-38
Nair depilatory cream Church & Dwight Co. 22339-05
Buprenex buprenorphine  0.3 mg/ml Reckitt Benckiser Pharma Inc NDC 12496-0757-5
1 cc insulin syringe, 27 G Becton Dickinson 329412
Chloraprep Shampoo Medline APL82287
Webcol alcohol prep swabs Covidien 6818
BioGel PI surgical gloves Mölnlycke Health Care ALA42675Z
Micro Forceps with teeth Roboz RS-5150
Fine scissors- sharp Fine Science Tools 14060-09
Straight serrated forceps Fine Science Tools 11050-10
Castro-Viejo needle driver Fine Science Tools 12565-14
0.9% Sodium Chloride Irrigation Baxter BHL2F7121 Warm to 37 °C prior to use
10 ml syringe Becton Dickinson 309604
4-0 Vicryl absorbable braided suture, 18", PS-2 needle Henry Schein  6546037
Blue monofilament suture 24” BV-1 needle Henry Schein  8305H Usually comes double-armed. Cut the suture at the midway point to generate two usable sutures.
Cole-Parmer Microscissors, Standard Grade, Straight, 4". Cole- Parmer EW-10818-06
Medline Sterile lubricating jelly Medline MDS032273H

References

  1. Murrell, Z. A., Stamos, M. J. Reoperation for anastomotic failure. Clinics in colon and rectal surgery. 19, 213-216 (2006).
  2. Shaban, F., Carney, K., McGarry, K., Holtham, S. Perforated Diverticulitis: To Anastomose or Not to Anastomose? A Systematic Review and Meta-Analysis. International journal of surgery (London, England). , (2018).
  3. Chambers, W. M., Mortensen, N. J. Postoperative leakage and abscess formation after colorectal surgery. Best practice, research. Clinical gastroenterology. 18, 865-880 (2004).
  4. Ashkanani, F., Krukowski, Z. H. Surgery – Oxford International Edition. Intestinal Anastomosis. 20, 104-107 (2002).
  5. Raptis, D., Pramateftakis, M. G., Kanellos, I. Our 20-year experience with experimental colonic anastomotic healing. Journal of medicine and life. 11, 5-14 (2018).
  6. Pommergaard, H. C., Rosenberg, J., Schumacher-Petersen, C., Achiam, M. P. Choosing the best animal species to mimic clinical colon anastomotic leakage in humans: a qualitative systematic review. European surgical research. Europaische chirurgische Forschung. Recherches chirurgicales europeennes. 47, 173-181 (2011).
  7. Komen, N., et al. Colorectal anastomotic leakage: a new experimental model. The Journal of surgical research. 155, 7-12 (2009).
  8. Perry, T., Borowiec, A., Dicken, B., Fedorak, R., Madsen, K. Murine ileocolic bowel resection with primary anastomosis. Journal of visualized experiments : JoVE. , e52106 (2014).
  9. Pommergaard, H. C., Achiam, M. P., Rosenberg, J. Colon anastomotic leakage: improving the mouse model. Surgery today. 44, 933-939 (2014).
  10. Bosmans, J. W. A. M., Jongen, A. C. H. M., Bouvy, N. D., Derikx, J. P. M. Colorectal anastomotic healing: why the biological processes that lead to anastomotic leakage should be revealed prior to conducting intervention studies. BMC Gastroenterology. 15, 180 (2015).
check_url/kr/58742?article_type=t

Play Video

Cite This Article
McCarthy, C. K., McGaha, P. K., Rozich, N. S., Yokell, N. A., Lees, J. S., Berry, W. L. Creation of Colonic Anastomosis in Mice. J. Vis. Exp. (143), e58742, doi:10.3791/58742 (2019).

View Video