マウスの消化管吻合の作成
Summary
吻合部リークまたは手術後の内訳は、術後合併症と死亡率の主要な原因です。結腸吻合を作成するための手術は、吻合部の治癒のメカニズムを研究するため信頼性が高く、再現性のある方法です。
Abstract
腸管吻合は、一般科目と創発的操作に実行されます。それでも、吻合部リークは大腸手術の非常に恐れられていた合併症、外科的吻合の 26% までの死亡率 39% まで患者このようなリークをされていると発生する可能性が。現在、吻合部治癒の分子機構の詳細データの少なさが残っています。予防戦略と吻合部リークのための治療法を工夫することは、適切な吻合部の治癒のよりよい理解によって大幅増強する。
マウスモデルはマウスの吻合が他の動物と比較して人間のケースに臨床的に最も似ている以前の研究が示したように最適です。我々 は結腸吻合術吻合部治癒のさらなるイラストは、マウスで簡単に再現できるマウスモデルを提供しています。
Introduction
腸の外科的吻合の高い恐ろしい合併症は吻合部の内訳や漏れです。腹腔内に管腔内内容の流出を引き起こす、腹部敗血症; に迅速につながる生命脅かすとすることができますは、吻合部のリーク衝撃率 0.3% から 5.5% 次の小腸吻合に変わるや結腸吻合1,226% と 0.5% の間に上昇します。次のリークの死亡率は、敗血症と腹腔内汚染3の死に急速な進行の迅速な発症のための 39% と高いことができます。予防戦略と治療現在、十分に理解されていない病態に基づいています。
現在、吻合部の治癒は、しばしば比較より広く研究皮膚創傷治癒には比較的貧しいファクシミリをあると証明します。癒しに一連の lag phase で始まる重複のフェーズで発生します。腸吻合の作成後 0-4 日間遅れ相は細胞の残骸の傷を消去する急性炎症反応によって定義されます。次に、3-4 日間で、線維芽増殖とコラーゲンの産生が fibrophasia 相を象徴します。最後に、10 日後コラーゲンリモデ リングの長期間は成熟フェーズと呼ばれます。コラーゲンが堆積4まで縫合吻合部の強度は非常に低く、外科的に置かれたステープルの外因性のサポートに依存することが重要です。役割を理解し、タイミング各吻合部創傷治癒および吻合部の故障を予知する解明のサロゲート マーカーと同様に、マクロファージなどによる炎症性細胞型の関与に果たしている腸の壁の層または成功の可能性があります。罹患率、死亡率、およびコロンの操作5医療費を大幅に削減します。
マウスのモデルは模倣人間吻合6で役に立つ以前の研究で示されています。マウスの結腸吻合モデル、特にコーメンらによって記述方法の例は人気、実績のある、よく研究しながら7、これらのモデルを支持する盲または昇順 colocolonic 吻合技術8。人間の患者の以前の研究では、回盲部、colocolonic、解剖学的位置の変化でさらに実験モデルの必要性を強調、大腸吻合間リーク率に有意差を示しています。通常の吻合部創傷治癒の9に必要な細胞メカニズムを解明するのではなく、意図的に吻合部のリークを作成するモデルの開発を目指しているを追加、一般に使用されるメソッド。ラット モデルは過去に試行されているが、吻合部裂開の料金やリーク (すなわち、膿瘍形成) 人間およびマウス6,7有意の兆候があります。さらに、ラットよりマウスより遺伝子組み換え実験線があります。これはラットのモデルを吻合部モデルのより少なく有用になります。さらに、ブタとイヌのモデルは、マウスモデル6,7よりも少ない臨床調査があった。
吻合部の創傷治癒10 の過少申告の機構をさらに調査する必要があります促進するマウスモデルにおける大腸吻合の作成のため安全、技術的に簡単な簡単かつ迅速に再現可能な手順を提案します。.
Protocol
Representative Results
Discussion
確実に成功し、この手順に関連する罹患率/死亡率を最小限に抑えるいくつか主要な手順があります。まず、腸組織の慎重な取扱いの確保し、コロンを公開する内臓を回転させるときに牽引損傷に気をつけましょう。腸や腸間膜に過度の緊張は、吻合部から腸や血管原因腸壊死の損傷をことができます。また、シャープな鉗子または歯の鉗子をいない使用腸を処理します。
<p class="jove_content…Disclosures
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
どれも
Materials
| C57BL6/J mice | Jackson Labs | #00664 | |
| Fisherbrand Absorbent Underpads, 20" x 24" | Fisher Scientific | 14-206-62 | |
| Polylined Sterile Field, 18" x 24" | Busse Hospital Disposables | 696 | Cut a rectangular hole |
| Isothesia isoflurane | Henry Schein | 50033 | |
| Fisherbrand Sterile cotton gauze pad, 4" x 4" | Fisher Scientific | 22-415-469 | |
| Puralube petrolatum ophthalmic ointment, 1/8 oz. tube | Dechra Veterinary Products | NDC 17033-211-38 | |
| Nair depilatory cream | Church & Dwight Co. | 22339-05 | |
| Buprenex buprenorphine 0.3 mg/ml | Reckitt Benckiser Pharma Inc | NDC 12496-0757-5 | |
| 1 cc insulin syringe, 27 G | Becton Dickinson | 329412 | |
| Chloraprep Shampoo | Medline | APL82287 | |
| Webcol alcohol prep swabs | Covidien | 6818 | |
| BioGel PI surgical gloves | Mölnlycke Health Care | ALA42675Z | |
| Micro Forceps with teeth | Roboz | RS-5150 | |
| Fine scissors- sharp | Fine Science Tools | 14060-09 | |
| Straight serrated forceps | Fine Science Tools | 11050-10 | |
| Castro-Viejo needle driver | Fine Science Tools | 12565-14 | |
| 0.9% Sodium Chloride Irrigation | Baxter | BHL2F7121 | Warm to 37 °C prior to use |
| 10 ml syringe | Becton Dickinson | 309604 | |
| 4-0 Vicryl absorbable braided suture, 18", PS-2 needle | Henry Schein | 6546037 | |
| Blue monofilament suture 24” BV-1 needle | Henry Schein | 8305H | Usually comes double-armed. Cut the suture at the midway point to generate two usable sutures. |
| Cole-Parmer Microscissors, Standard Grade, Straight, 4". | Cole- Parmer | EW-10818-06 | |
| Medline Sterile lubricating jelly | Medline | MDS032273H |
References
- Murrell, Z. A., Stamos, M. J. Reoperation for anastomotic failure. Clinics in colon and rectal surgery. 19, 213-216 (2006).
- Shaban, F., Carney, K., McGarry, K., Holtham, S. Perforated Diverticulitis: To Anastomose or Not to Anastomose? A Systematic Review and Meta-Analysis. International journal of surgery (London, England). , (2018).
- Chambers, W. M., Mortensen, N. J. Postoperative leakage and abscess formation after colorectal surgery. Best practice, research. Clinical gastroenterology. 18, 865-880 (2004).
- Ashkanani, F., Krukowski, Z. H. Surgery – Oxford International Edition. Intestinal Anastomosis. 20, 104-107 (2002).
- Raptis, D., Pramateftakis, M. G., Kanellos, I. Our 20-year experience with experimental colonic anastomotic healing. Journal of medicine and life. 11, 5-14 (2018).
- Pommergaard, H. C., Rosenberg, J., Schumacher-Petersen, C., Achiam, M. P. Choosing the best animal species to mimic clinical colon anastomotic leakage in humans: a qualitative systematic review. European surgical research. Europaische chirurgische Forschung. Recherches chirurgicales europeennes. 47, 173-181 (2011).
- Komen, N., et al. Colorectal anastomotic leakage: a new experimental model. The Journal of surgical research. 155, 7-12 (2009).
- Perry, T., Borowiec, A., Dicken, B., Fedorak, R., Madsen, K. Murine ileocolic bowel resection with primary anastomosis. Journal of visualized experiments : JoVE. , e52106 (2014).
- Pommergaard, H. C., Achiam, M. P., Rosenberg, J. Colon anastomotic leakage: improving the mouse model. Surgery today. 44, 933-939 (2014).
- Bosmans, J. W. A. M., Jongen, A. C. H. M., Bouvy, N. D., Derikx, J. P. M. Colorectal anastomotic healing: why the biological processes that lead to anastomotic leakage should be revealed prior to conducting intervention studies. BMC Gastroenterology. 15, 180 (2015).
