Summary

Создание толстой кишки анастомоз мышей

Published: January 17, 2019
doi:

Summary

Анастомоза утечки или разбивка после операции является одной из основных причин послеоперационной заболеваемости и смертности. Наши операции для создания толстой кишки анастомоз — надежных и воспроизводимых метод для изучения лечебных механизмов анастомозов.

Abstract

Кишечных анастомозов обычно выполняются как факультативные, так и возникающих операций. Тем не менее анастомоза утечки являются очень боялись осложнения операций на ободочной кишки и может произойти в до 26% хирургических анастомозов, с смертности до 39% для пациентов с такой утечки. В настоящее время остается нехватка данных, детализируя клеточных механизмов анастомоза исцеления. Разработка превентивных стратегий и методов лечения для анастомоза утечки может значительно потенцированные по более глубокому пониманию соответствующих анастомоза исцеления.

Мышиных модель идеально, как предыдущие исследования показали, что мышиных анастомоза является наиболее клинически похож на человеческий случай по сравнению с другими животных моделей. Мы предлагаем легко воспроизводимые мышиных модель толстой анастомоза у мышей, которые позволят для дальнейшей иллюстрации анастомоза исцеления.

Introduction

Весьма опасным осложнением хирургических анастомозов кишечника является анастомоза пробоя или утечки. Анастомоза утечки, которая вызывает разлива внутрипросветная содержимого в брюшную полость, угрожающих жизни и может быстро привести к внутрибрюшной сепсис; шок ставки варьируются от 0,3% до 5,5%, после тонкого кишечника анастомозов и подняться до 0,5% и 26% для кишечных анастомозов1,2. Смертности после утечки может быть выше, чем 39% из-за быстрого наступления сепсиса и быстрой прогрессии к смерти внутрибрюшное загрязнения3. Превентивные стратегии и методов лечения в настоящее время основаны на Патофизиология, что не вполне понятно.

В настоящее время анастомоза исцеление часто сравнивают с более широко изучены кожный заживление ран, которая оказалась сравнительно бедных факсимиле. В серии перекрывающихся этапов, начиная с этапа первоначального ЛАГ происходит исцеление. Во время дней 0-4 после создания кишечного анастомоза запаздывание фазы определяется острой воспалительной реакции, которая очищает рану сотовой мусора. Далее через дня 3-4, фибробластический распространение и производство коллагена является типичным fibrophasia фазы. Наконец после 10 день, длительного периода коллагена Ремоделирование известен как на этапе созревания. Важно, что анастомоза сила является довольно низким и зависит от внешней поддержки хирургически размещены скобы или шовные пока Коллаген является хранение4. Понимание роли и времени каждого слоя стенок кишечника играет анастомоза заживление ран и участия в типах воспалительных опосредованной клеток как макрофаги, а также разъяснения суррогатных маркеров предсказать анастомоза провал или успех может значительно снизить заболеваемость, смертность и медицинских расходов после двоеточия операций5.

Чтобы быть полезным в имитируя человека анастомоза6в предыдущих исследованиях было показано мышиных модель. Хотя есть популярные, проверенные и хорошо изучены примеры мышиных толстой анастомоза модели, особенно с методом, описанным в Комен et al. Эти модели 7, в пользу илеоцекальной или возрастания colocolonic анастомоза методы8. Предыдущие исследования человека пациентов продемонстрировали значительную разницу в показателях утечки между илеоцекальной, colocolonic и прямой кишки анастомозов, подчеркнув необходимость дальнейших экспериментальных моделей на различных анатомических местах. Дополнительные, широко используемые методы направлены на разработку модели, которая намеренно создает анастомоза утечки вместо прояснения клеточных механизмов, необходимых для нормального анастомоза ранозаживляющее9. Крыса модели пытались в прошлом, но темпы анастомоза зияние и/или признаки утечки (например, формирование абсцесса) значительно ниже, чем людей и мышей6,7. Кроме того более генетически модифицированные экспериментальные линии доступны в мышей, чем крысы. Это делает модель крыса менее полезными для анастомоза модели. Кроме того свиней и собак модели имели менее клиническое исследование чем мышиных модель6,7.

Мы предлагаем безопасный, технически простых и быстро и легко воспроизводимые процедуры для создания кишечных анастомозов в мышиных модели, который должен облегчить дальнейшее расследование занижены механизм исцеленияанастомоза рану 10 .

Protocol

Следующий протокол был одобрен Оклахомский университет наук Центр институциональных животных здравоохранения и использовать Комитет (IACUC) и соблюдает все институциональные этические руководящие принципы, касающиеся использования исследований животных. Кроме того все эксперименты ?…

Representative Results

7 дней после операции должны хорошо исцелил анастомоза. Анастомоз могут быть собраны в моменты времени до и после 7 дней, чтобы лучше проиллюстрировать на этапах анастомоза исцеления. На рисунке 9, гистологический анализ показывает фиброзный (коллаген в…

Discussion

Есть несколько основных шагов для обеспечения успеха и свести к минимуму заболеваемости/смертности, связанные с этой процедурой. Во-первых обеспечение тщательного регулировать кишечную ткани и заботиться, чтобы предотвратить травмы тяги при вращении внутренностей подвергать толсто?…

Disclosures

The authors have nothing to disclose.

Acknowledgements

Нет

Materials

C57BL6/J mice Jackson Labs #00664 
Fisherbrand Absorbent Underpads, 20" x 24" Fisher Scientific 14-206-62
Polylined Sterile Field, 18" x 24" Busse Hospital Disposables 696 Cut a rectangular hole 
Isothesia isoflurane Henry Schein  50033
Fisherbrand Sterile cotton gauze pad, 4" x 4" Fisher Scientific 22-415-469
Puralube petrolatum ophthalmic ointment, 1/8 oz. tube Dechra Veterinary Products NDC 17033-211-38
Nair depilatory cream Church & Dwight Co. 22339-05
Buprenex buprenorphine  0.3 mg/ml Reckitt Benckiser Pharma Inc NDC 12496-0757-5
1 cc insulin syringe, 27 G Becton Dickinson 329412
Chloraprep Shampoo Medline APL82287
Webcol alcohol prep swabs Covidien 6818
BioGel PI surgical gloves Mölnlycke Health Care ALA42675Z
Micro Forceps with teeth Roboz RS-5150
Fine scissors- sharp Fine Science Tools 14060-09
Straight serrated forceps Fine Science Tools 11050-10
Castro-Viejo needle driver Fine Science Tools 12565-14
0.9% Sodium Chloride Irrigation Baxter BHL2F7121 Warm to 37 °C prior to use
10 ml syringe Becton Dickinson 309604
4-0 Vicryl absorbable braided suture, 18", PS-2 needle Henry Schein  6546037
Blue monofilament suture 24” BV-1 needle Henry Schein  8305H Usually comes double-armed. Cut the suture at the midway point to generate two usable sutures.
Cole-Parmer Microscissors, Standard Grade, Straight, 4". Cole- Parmer EW-10818-06
Medline Sterile lubricating jelly Medline MDS032273H

References

  1. Murrell, Z. A., Stamos, M. J. Reoperation for anastomotic failure. Clinics in colon and rectal surgery. 19, 213-216 (2006).
  2. Shaban, F., Carney, K., McGarry, K., Holtham, S. Perforated Diverticulitis: To Anastomose or Not to Anastomose? A Systematic Review and Meta-Analysis. International journal of surgery (London, England). , (2018).
  3. Chambers, W. M., Mortensen, N. J. Postoperative leakage and abscess formation after colorectal surgery. Best practice, research. Clinical gastroenterology. 18, 865-880 (2004).
  4. Ashkanani, F., Krukowski, Z. H. Surgery – Oxford International Edition. Intestinal Anastomosis. 20, 104-107 (2002).
  5. Raptis, D., Pramateftakis, M. G., Kanellos, I. Our 20-year experience with experimental colonic anastomotic healing. Journal of medicine and life. 11, 5-14 (2018).
  6. Pommergaard, H. C., Rosenberg, J., Schumacher-Petersen, C., Achiam, M. P. Choosing the best animal species to mimic clinical colon anastomotic leakage in humans: a qualitative systematic review. European surgical research. Europaische chirurgische Forschung. Recherches chirurgicales europeennes. 47, 173-181 (2011).
  7. Komen, N., et al. Colorectal anastomotic leakage: a new experimental model. The Journal of surgical research. 155, 7-12 (2009).
  8. Perry, T., Borowiec, A., Dicken, B., Fedorak, R., Madsen, K. Murine ileocolic bowel resection with primary anastomosis. Journal of visualized experiments : JoVE. , e52106 (2014).
  9. Pommergaard, H. C., Achiam, M. P., Rosenberg, J. Colon anastomotic leakage: improving the mouse model. Surgery today. 44, 933-939 (2014).
  10. Bosmans, J. W. A. M., Jongen, A. C. H. M., Bouvy, N. D., Derikx, J. P. M. Colorectal anastomotic healing: why the biological processes that lead to anastomotic leakage should be revealed prior to conducting intervention studies. BMC Gastroenterology. 15, 180 (2015).
check_url/kr/58742?article_type=t

Play Video

Cite This Article
McCarthy, C. K., McGaha, P. K., Rozich, N. S., Yokell, N. A., Lees, J. S., Berry, W. L. Creation of Colonic Anastomosis in Mice. J. Vis. Exp. (143), e58742, doi:10.3791/58742 (2019).

View Video