トランスレーショナル血管化複合体他家移植研究のためのラットにおける修正 Heterotopic 後肢 Osteomyocutaneous フラップモデル
Summary
血管化複合同種移植片は、移植患者に生命を変える利点を提供するが、移植片拒絶および vasculopathy の生物学的原因はあまり理解されないままである。ここに提示されたげっ歯類外科手術モデルは、再現性のある、臨床的に関連する移植モデルを提供し、研究者がその発生を防ぐために拒絶事象および潜在的な治療戦略を評価することを可能にする。
Abstract
血管化コンポジット他家移植 (VCA) は、再建手術で比較的新しい分野です。人間の VCA で臨床的な成果には、手と顔の移植と、より最近では、腹壁、子宮、および泌尿生殖器移植が含まれます。機能的な成果は当初の期待を上回り、ほとんどの受信者は生活の質の向上を享受しています。しかし、臨床経験が蓄積するにつれて、免疫抑制からの慢性拒絶および合併症が対処されなければならない。移植片が失敗した多くの場合、その原因となる病理は虚血性 vasculopathy であった。VCA、特に虚血性 vasculopathy に関連した急性および慢性拒絶反応の生物学的メカニズムは、研究の重要な領域である。しかし、VCA 患者の数が非常に少ないため、実験モデルでは提案されたメカニズムの評価の方が適切です。複数のグループは、VCA 拒否と vasculopathy の関連する未解決の質問のいくつかに対処するために動物モデルを使用しています。様々な種を含むいくつかのモデルデザインが文献に記載されている。ここでは、トランスレーショナル VCA 研究に利用できる、ラットの VCA heterotopic 後肢 osteomyocutaneous フラップの再現性のあるモデルを紹介します。このモデルは罹患率の低いレベルを維持している間、バイオプシーおよび異なったイメージ投射様相を含む接木の連続的な評価を、可能にする。
Introduction
切断、ブラスト傷害、悪性腫瘍、および先天性欠損症による壊滅的な組織損失のための再建手術は、患者からの組織の利用可能性およびドナー部位で生じる追加の罹患率によって制限される。いくつかのケースでは、熱傷犠牲者または四辺形切断者など、再建のための生存可能な組織は、患者から入手できない。1964年、エクアドルで初めての近代的な手の移植が行われました。これは技術的な成功でしたが、現時点で利用可能な免疫抑制は拒絶を防ぐには不十分であり、移植片は3週間未満で失われました。1998および1999では、免疫抑制の現代における最初の手移植は、リヨン、フランス2とルイビル、ケンタッキー州、USA3で行われました。初めて、再建外科医は同じように置き換えることができます。顔面移植は 20054で最初に行われ、多くの他の VCA 移植片が、腹壁5、子宮、および泌尿生殖器移植6のような現在日常的に行われている。
固形臓器移植とは異なり、ほとんどの VCA 技術は、高抗原性ドナー皮膚の存在を伴います。臨床経験は、皮膚の急性拒絶反応が比較的容易に制御されることを決定したが、治療7によく反応しない基礎組織および血管の慢性拒絶に寄与し得る。同種免疫応答に関連付けられている血管機能障害は、VCA7のフィールドのためのより不吉な障害物です。Macrovasculopathies は、灌流障害、治癒の遅延、および炎症誘発性の状態につながります。両方のコンフルエント積極的な大血管 vasculopathy および焦点 intimal 過形成は、手移植レシピエント7において生じる。さらに、microvasculopathies は、おそらく VCA 合併症にも貢献し、拒絶イベントにつながる可能性もあります。免疫と非免疫系の両方の要因は、おそらく、手の移植のレシピエントの vasculopathy において役割を果たすが、VCA における遠位血管機能不全を促進する特定のメカニズムは、特に低悪性度、慢性拒絶反応の文脈においては知られていない。これらの未回答の質問は、VCA 拒否/メンテナンスと vasculopathy の臨床コース中に移植片の連続評価を可能にする動物 VCA モデルの開発を要します。このようなモデルは、免疫抑制、感染性チャレンジ、および/または他の術後外傷性損傷8,9に直面して拒絶および vasculopathy に関する洞察を提供する。
ここで紹介したのは同種ラット VCA heterotopic 後肢 osteomyocutaneous フラップモデルです。以前に公開された VCA モデルに基づいて、この手順は技術的に簡単に実行でき、多数で再現性があり、レシピエント動物に最低の罹患率と不快感を呈する。このモデルは、VCA 承認と拒否の臨床的および病理組織学的評価を可能にするように設計されており、拒絶に関与する根底にある免疫および非免疫系のメカニズムを評価する機会を提供します。
Protocol
Representative Results
Discussion
VCA のこのモデルの開発では、いくつかの重要な問題を検討しました。まず、移植片中に無傷の骨 (脛骨および腓骨)、骨髄、および皮膚を含むことが重要であった。成人ドナーからの臨床的な手の移植は、積極的に造血骨髄のかなりの量を転送しませんが, 骨髄ニッチの役割の研究は、より良いミラーリングされた長い骨ではなく、無傷の血管化骨を使用して, 結果露出した骨髄の線維症。さ?…
Disclosures
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
この作品は、賞を受けた Congressionally の医学研究プログラムを通じて、保健省国防長官の事務所によって支持されました。W81XWH-13-2-0057。意見、解釈、結論、および勧告は、著者のものであり、必ずしも国防総省によって承認されていません。
Materials
| Acepromazine | Henry Schein | 5700850 | |
| Adventitia Scissors | ASSI | SAS15R8 | |
| Approximator Clamp (Double) | ASSI | ABB2V, ABB22V | |
| Approximator Clamp (single) | FST | 00398-02 | |
| Clamp Applying Forceps | ASSI | CAF4 | |
| Dissecting Scissors | ASSI | SDS18R8 | |
| Flushing blunt needle 27G | SAI | ||
| Heparin Sodium | Sagent | 25021-400-30 | |
| Isoflurane | Patterson Veterinary | 14043-704-06 | |
| Jewelers Bipolar | ASSI | 103000BPS03 | |
| Jewelers forceps #3 | FST | 11231-30 | |
| Ketamine HCl 100 mg/ml | Zoetis | 043-304 | DEA License required |
| Lactated Ringer Solution | Hospira | 0409-7953-03 | |
| Lactated Ringer Solution + 5% Dextrose | Hospira | 0409-7953-09 | |
| Meloxicam | Henry Schein | 11695-6925-2 | |
| Micro forceps | ASSI | JFAL3 | |
| Micro needle holder | ASSI | B138 | |
| Prograf (Tacrolimus) 5 mg/ml | Astellas | 0469-3016-01 | |
| Suture, 10-0 Prolene | Ethicon | W2790 | or 10-0 Ethilon (2830) |
| Suture, 4-0 Coated Vicryl | Ethicon | J714D | |
| Vessel Dilator Forceps | ASSI | D5AZ | |
| Xylazine | VetOne | 13985-612-50 |
References
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