Приведенный здесь протокол, в который подробно описаны шаги по созданию животной модели хронической послеишемской боли (CPIP). Это хорошо признанная модель, имитирующая человеческий сложный региональный болевой синдром типа I. Механическая и тепловая гиперчувствительность дополнительно оценивается, а также капсаицин-индуцированного ноцифенсивного поведения наблюдается в модели CPIP крысы.
Сложный региональный болевой синдром типа I (CRPS-I) является неврологическим заболеванием, которое вызывает сильную боль среди пациентов и остается нерешенным заболеванием. Тем не менее, основные механизмы КРБС-Я до сих пор не выявлено. Известно, что ишемия / реперфузии является одним из ведущих факторов, вызывающих КРБС-I. С помощью длительной ишемии и реперфузии задней конечности, крыса хронической после ишемии боли (CPIP) модель была создана для имитации КРБС-I. Модель CPIP стала хорошо признанной животной моделью для изучения механизмов CRPS-I. В этом протоколе описаны подробные процедуры, связанные с созданием крысиной модели CPIP, включая анестезию, за которой следует ишемия/реперфузия задней конечности. Характеристики модели крысы CPIP дополнительно оцениваются путем измерения механической и тепловой гиперчувствительности задней конечности, а также ноцифенцев реакции на острый капсаицин инъекции. Крыса CPIP модель экспонатов несколько КРБС-I-подобных проявлений, в том числе отек задних конечностей и гиперемии на ранней стадии после создания, стойкие тепловой и механической гиперчувствительности, и увеличение ноцифенцеватных реакций на острый капсаицин инъекции. Эти характеристики делают его подходящей животной моделью для дальнейшего изучения механизмов, участвующих в КРБС-I.
Комплексный региональный болевой синдром (КРБС) отражает сложные и хронические болевые симптомы в результате переломов, травм, хирургии, ишемии или травмы нерва1,2,3. КРБС делится на 2 подкатегории: CRPS type-I и type-II (CRPS-I и CRPS-II)4. Эпидемиологические исследования показали, что распространенность КРБС была приблизительно 1:20005. КРБС-I, который не показывает никаких очевидных повреждений нерва, может привести к хронической боли и резко влияет на качество жизни пациентов. Текущие доступные методы лечения показывают неадекватные терапевтические эффекты. Таким образом, КРБС-Я по-прежнему остается важной и сложной клинической проблемой, которую необходимо решить.
Создание доклинической модели животных, имитирующей CRPS-I, имеет решающее значение для изучения механизмов, лежащих в основе CRPS-I. Для того, чтобы решить эту проблему, Coderre и др. разработан крысы модель, применяя длительную ишемию и реперфузии на заднюю конечность, чтобы резюмировать CRPS-I6. Известно, что ишемия / реперфузионная травма является одной из основных причин КРБС-I7. Крыса CPIP модель экспонатов многие CRPS-I-подобные симптомы, которые включают отек задних конечностей и гиперемии на ранней стадии после создания модели, а затем с стойкими тепловой и механической гиперчувствительности6. С помощью этой модели, предлагается, что центральная чувствительность боли, периферийные активации канала TRPA1 и реактивного производства видов кислорода, и т.д. способствовать CRPS-I8,9,10. Недавно мы успешно создали модель крысы CPIP и выполнили РНК-секвенирование псового корневого ганглиев (DRGs), которые иннервировать пораженную заднюю лапу11. Мы обнаружили некоторые потенциальные механизмы, которые, возможно, участвуют в посредничестве боли гиперчувствительности CRPS-I11. Мы также определили переходный рецептор потенциал ваниллоид 1 (TRPV1) канал в DRG нейронов в качестве важного вклада в механические и тепловой гиперчувствительности CRPS-I12.
В этом исследовании мы описали подробные процедуры, связанные с созданием крысиной модели CPIP. Мы также оценили модель крысc CPIP путем измерения механической и тепловой гиперчувствительности, а также ее отзывчивости к острому капсаицину. Мы предлагаем, чтобы крыса CPIP модель может быть надежной моделью животных для дальнейшего изучения механизмов, участвующих в CRPS-I.
Этот протокол описывает подробные методы для создания модели крыс CPIP путем применения ишемии / реперфузии задних конечностей крыс. Она включает в себя оценку внешний вид задних конечностей, отек, механические / тепловой гиперчувствительности, и острое ноцифенцевальное поведение в отв?…
The authors have nothing to disclose.
Этот проект был спонсирован Национальным фондом естественных наук Китая (81873365 и 81603676), Чжэцзян провинциальных природных наук фонды для уважаемых молодых ученых (LR17H270001) и научно-исследовательских фондов из Чжэцзян Китайский медицинский университет ( 2019J01, 2018 Y37, 2018 Y19).
1.5 ml Eppendorf tube | Eppendorf | 22431021 | |
DMSO | Sigma-Aldrich | D1435 | |
Capsaicin | APEXBIO | A3278 | |
Digital caliper | Meinaite | NA | |
O-ring | O-Rings West | Nitrile 70 Durometer | 7/32 in. internal diameter |
Plantar Test Apparatus | UGO Basile, Italy | 37370 | |
von Frey filaments | UGO Basile, Italy | NC12775 |