Transplantation de peau murine

Summary

La transplantation allogénique de la peau est un modèle standard d'analyse des réponses des cellules T à l'hôte antigènes du donneur MHC-disparates. Cette vidéo-article fournit un tutoriel visuelle de chaque étape à effectuer une greffe BALB/c–> C57BL / 6 peau.

Abstract

Comme l'un des modèles les plus strictes et moins difficile techniquement, la peau de transplantation est une méthode standard pour le dosage réponses de l'hôte de lymphocytes T aux antigènes MHC-donateurs disparates. Le but de cette vidéo article est de fournir au spectateur une démonstration étape par étape visuelle de la transplantation de peau en utilisant le modèle de la souris. Le protocole est divisé en cinq composantes principales: 1) la peau des donneurs de récolte; 2) la préparation de bénéficiaires pour la greffe; greffe de peau 3), 4) l'enlèvement bandage et le rejet du greffon suivi; 5) des conseils utiles. Une fois compétents, la procédure elle-même devrait prendre <10 min à effectuer.

Protocol

Avant le début de l'expérience: Obtenir l'approbation du IACUC Stériliser les instruments chirurgicaux et les Q-tips Tissu I. Récolte des donateurs Euthanasier souris donneuse (en conformité avec SOP institution) Mouiller les cheveux en arrière de la base de l'oreille avec de l'alcool La peau des bailleurs de fonds récolte en coupant l'oreille à l'arrêt de base Placez le tissu de la plaque sur …

Discussion

Comme démontré dans cette vidéo l'article, le modèle de greffe de peau est une méthode rapide et facile pour le contrôle des lymphocytes T allogéniques réponses. La peau de transplantation allogénique a une large gamme d'applications et a été utilisée pour doser l'efficacité d'une variété d'agents immunosuppresseurs et les protocoles d'induction de tolérance, ainsi que pour étudier les effets biologiques des différents anticorps bloquants.

Materials

Material Name	Type	Company	Catalogue Number	Comment
Micro-dissecting forceps (curved)		Sigma	F4142
Rat-tooth forceps (1×2 teeth, straight)		Fine Science Tools	11053-10	n=2
Strabismus scissors (blunt end)		Fine Science Tools	14074-11
Iris forceps (curved)		Fine Science Tools	11065-07
Spring scissors (angled)		Fine Science Tools	15006-09
Halsey micro needle holder		Fine Science Tools	12500-12
10 cm plates		Corning	430167
PBS		Cellgro	21-040-CV
Bupernex (Buprenorphine hydrochloride)		Reckitt Bencikiser Healthcare	517201
Insulin syringes (29 Ga)		Monoject	8881 600145
Q-tips		Solon	362
Single edge razor blades (#9)		Smith	67-0238
Silk suture (2-0; PS-2)		Ethicon	583H