Murine Hauttransplantation

Summary

Allogene Hauttransplantation ist ein Standard-Modell zum Testen Host T-Zell-Antworten auf MHC-disparate Spender-Antigene. Dieses Video-Artikel bietet eine visuelle Anleitung für jeden Schritt bei der Durchführung einer BALB/c–> C57BL / 6 Hauttransplantat beteiligt.

Abstract

Als einer der härtesten und am wenigsten technisch anspruchsvollen Modellen ist Hauttransplantation eine standardisierte Methode, um Test-Host T-Zell-Antworten auf MHC-disparate Spender-Antigene. Das Ziel dieses Video-Artikels ist es, den Betrachter mit einer Schritt-für-Schritt-visuelle Demonstration der Hauttransplantation am Mausmodell liefern. ; 2) vorzubereiten Empfänger für die Transplantation, 3) Hauttransplantat; 4) Bandage entfernt und Überwachung Abstoßung des Transplantats; 5) hilfreiche Hinweise 1) Ernte Spenderhaut: Das Protokoll ist in 5 Hauptkomponenten unterteilt. Sobald beherrschen, sollte das Verfahren selbst zu nehmen <10 min zu erfüllen.

Protocol

Vor Beginn des Experiments: Erhalten IACUC Genehmigung Sterilisieren Instrumente und Q-Tipps I. Ernte Spendergewebe Euthanize Spender Maus (in Übereinstimmung mit Institution SOP) Nasses Haar zurück von der Basis des Ohres mit Alkohol Ernte Spenderhaut indem Ohr ab an der Basis Legen Gewebe in der Platte auf Eis Split Ohr: pinch ventralen und dorsalen Seiten des Gewebes an der Basis der Ohren mit Ratten-Zahn-Zange;…

Discussion

Wie in diesem Video-Beitrag gezeigt hat, ist die Hauttransplantationsmodell eine schnelle und einfache Methode zur Überwachung von allogenen T-Zell-Antworten. Allogene Hauttransplantation hat eine breite Palette von Anwendungen und hat Assay wurde die Effizienz einer Vielzahl von Immunsuppressiva und Toleranzinduktion Protokollen, sowie zur Untersuchung der biologischen Wirkungen der verschiedenen blockierende Antikörper eingesetzt.

Materials

Material Name	Type	Company	Catalogue Number	Comment
Micro-dissecting forceps (curved)		Sigma	F4142
Rat-tooth forceps (1×2 teeth, straight)		Fine Science Tools	11053-10	n=2
Strabismus scissors (blunt end)		Fine Science Tools	14074-11
Iris forceps (curved)		Fine Science Tools	11065-07
Spring scissors (angled)		Fine Science Tools	15006-09
Halsey micro needle holder		Fine Science Tools	12500-12
10 cm plates		Corning	430167
PBS		Cellgro	21-040-CV
Bupernex (Buprenorphine hydrochloride)		Reckitt Bencikiser Healthcare	517201
Insulin syringes (29 Ga)		Monoject	8881 600145
Q-tips		Solon	362
Single edge razor blades (#9)		Smith	67-0238
Silk suture (2-0; PS-2)		Ethicon	583H